中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(SKLVBP201312)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：杜承周建华王雪峰林跃智韦华冕更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所塔里木大学宁夏医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 马传染性贫血病毒弱毒疫苗gp90多样性及其对病毒体外增殖的影响被引量：1
- 2014年
- 为研究马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗gp90基因多样性的生物学意义,本研究对EIAV驴胎皮肤细胞弱毒疫苗(EIAVFDDV13)gp90基因进行测序,在随机获得的15个克隆中,不同克隆推导的氨基酸平均差异率为2.7%(0~5.8%),其中克隆F13-15与感染性克隆pLGFD3-8的gp90之间的差异率均为4.8%。以pLGFD3-8为骨架,通过对gp90基因的替换方法构建了感染性克隆pLGFD13-15。将pLGFD13-15转染驴胎皮肤细胞后,拯救出一株衍生病毒vpLGFD13-15。比较vpLGFD13-15和vpLGFD3-8在驴胎皮肤细胞和马单核细胞来源的巨噬细胞中的复制特性显示,vpLGFD13-15在感染驴胎皮肤细胞后4 d^6 d内,上清液中的病毒含量明显高于vpLGFD3-8。但vpLGFD13-15在巨噬细胞中的复制较vpLGFD3-8明显延迟。结果表明,EIAV疫苗株中不同gp90基因的病毒克隆在体外复制特性存在差异。该研究结果为进一步分析EIAV弱毒疫苗基因多样性的生物学意义,特别是对其诱导免疫保护作用的研究奠定了基础。
- 秦玉寅王雪峰韦华冕王帅林跃智杜承王晓钧周建华胡建军
- 关键词：马传染性贫血病毒弱毒疫苗基因多样性
- 马Viperin的抗EIAV功能初步研究及其重组腺病毒的构建
- 2014年
- Viperin是一种细胞内抗病毒蛋白,可以被I型干扰素、多聚I:C、脂多糖及多种病毒诱导表达,在细胞内主要定位在内质网和脂滴,具有广谱的抗病毒功能。为研究马Viperin(eViperin)在抗病毒感染中的作用,本研究应用RT-PCR从马巨噬细胞中扩增eViperin基因,并将其克隆于真核表达载体pDC315中构建重组质粒pDC-eViperin-Flag,将重组质粒转染293T细胞,western blot检测结果表明eViperin在293T细胞中正确表达。将该重组表达质粒与表达马传染性贫血病毒(EIAV)Gag前体蛋白(Gag precursor,Pr55gag)的表达质粒共转染293T细胞,转染48 h后western blot检测,结果显示实验组细胞培养上清中的Pr55gag含量显著低于空白对照组,表明eViperin具有抑制EIAV释放的作用。此外,将该重组表达质粒与腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,E3Cre共转染HEK293细胞,进一步构建拯救出表达eViperin的重组腺病毒,为研究eViperin的抗病毒功能研究奠定了基础。
- 朱春辉汤艳东那雷付丽华王雪峰林跃智杜承周建华徐方
- 关键词：马传染性贫血病毒重组腺病毒
