中央高校基本科研业务费专项资金(2012ZZ0083)
- 作品数：10 被引量：71H指数：5
- 相关作者：石磊闫鹤孟赫诚毕水莲徐冬旸更多>>
- 相关机构：华南理工大学广东药学院大阪府立大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金广州市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 广州市售生猪肉中金黄色葡萄球菌检测及其耐药性研究被引量：15
- 2014年
- 了解广州市某区猪肉中金黄色葡萄球菌的污染情况、分子分型及其耐药性特征。根据GB 4789.10-2010对样品进行金黄色葡萄球的分离及鉴定,用多位点序列分型法进行分子分型,纸片扩散法进行抗生素敏感试验,采用PCR法验证MRSA并筛选检测I类整合子及相关耐药基因盒。110份生猪肉样品中有34份样品检出金黄色葡萄球菌(30.9%),得到34株该菌,所有菌株共可分成7种序列分型(sequence types,STs),分别为ST6(1/34)、ST7(16/34)、ST9(9/34)、ST59(1/34)、ST239(4/34)、ST2259(2/34)及一株等位基因谱为5-4-1-4-4-6-53的新型ST,34株金黄色葡萄球菌对12种抗生素耐药率分别为对青霉素100%耐药,对四环素、甲氧苄胺嘧啶、红霉素、克林霉素的耐药率分别为88.2%、76.5%、64.7%、61.8%,MRSA检出率为38.3%(13/34),I类整合子的检测率为14.7%(5/34),其中2株菌携带相应基因盒。本次实验显示生猪肉中金黄色葡萄球菌污染比较严重且具有严重的抗生素耐药现象,ST7为主要的序列型号,I类整合子存在于食源性金黄色葡萄球菌中,相关基因盒对菌株耐药发挥作用。
- 石磊周臣清闫鹤
- 关键词：金黄色葡萄球菌抗生素耐药I类整合子
- 猪肉中单核细胞增生李斯特菌的分离与耐药性研究被引量：12
- 2013年
- 了解猪肉中单核细胞增生李斯特菌的污染情况、血清型和耐药性现状。按照国标GB 4789.30-2010程序分离猪肉中单核细胞增生李斯特菌;多重PCR确定血清型;纸片扩散法检测单核细胞增生李斯特菌对抗生素的敏感性。研究结果表明273份猪肉样本中有52(19.02%)个受单核细胞增生李斯特菌的污染,共检出78株该致病菌。33株(42.31%)、24株(30.71%)、16株(20.51%)、3株(3.85%)、2株(2.56%)分别被确定为血清型1/2a(或3a)、1/2b(或3b或7)、1/2c(或3c)、4a(或4c)和4b(或4d或4e)。所有菌株对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培能、环丙沙星、左氧氟沙星、万古霉素都敏感,对四环素(20.51%)的耐药率最为严重。11.54%的菌株对临床治疗李斯特菌病的青霉素、庆大霉素、红霉素等抗生素出现耐药。tet(M)基因是单核细胞增生李斯特菌耐四环素的主要机制之一,接合型转座子Tn916与该菌四环素耐药散播有直接关系。
- 石磊王文燕闫鹤
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌血清型耐药性
- 基于rpoB靶基因的PCR法快速检测弓形菌被引量：1
- 2013年
- 建立了一种弓形菌(Arcobacter)快速、敏感、特异的PCR检测方法。采用PCR技术扩增弓形菌编码RNA聚合酶β亚基的rpoB基因,并对该方法进行特异性和敏感性测试。结果只有弓形菌在205bp处出现目的扩增带,其他菌株扩增结果均为阴性。该法对弓形菌的检测限可达8.20×102cfu/mL。建立的PCR方法具有操作简便、准确可靠以及灵敏特异的特点,为食品中弓形菌的快速检测提供了新的手段。
- 毕水莲孟赫诚
- 关键词：PCRRPOB
- 食源性普罗威登斯菌的分离鉴定和耐药性研究被引量：8
- 2014年
- 本文研究了食源性普罗威登斯菌在肉类食品中的的分布,以及其耐药表型与I型整合子的携带状况。本文采集了市售猪肉、鸡肉和牛肉等肉类食品,对普罗威登斯菌进行分离与鉴定;采用纸片扩散法对已分离鉴定的普罗威登斯菌进行药敏实验;利用聚合酶链式反应技术筛选携带I型整合子的菌株。结果表明,85份样品中,有38份样品检出普罗威登斯菌,检出率达44.70%。38株普罗威登斯菌中,有44.74%的分离株是多重耐药菌株,最多耐6种抗生素。有两株普罗威登斯菌携带I型整合酶,一株拉氏普罗威登斯菌携带耐药基因盒。这是在国内肉类食品分离的普罗威登斯菌中首次发现I型整合子阳性菌株,表明食品中这种携带有多重耐药的菌株有可能通过食物链向人类传播,是对人类健康造成威胁的潜在危险因素。
- 石磊梁思思岛绫香山崎伸二闫鹤
- 关键词：耐药性整合子
- 食品行业中常用消毒剂对食源性单核细胞增生李斯特菌的抑菌作用研究被引量：5
- 2013年
- 目的研究食品行业中常用消毒剂对重要食源性致病菌单核细胞增生李斯特菌的抑菌效果,明确食源性单核细胞增生李斯特菌对各种消毒剂的耐受情况,为消毒剂的科学使用提供依据。方法选取5大类食品行业常用消毒剂,采用抑菌环试验检测其对73株食源性单核细胞增生李斯特菌的抑菌效果。结果过氧乙酸、碘伏及洗必泰在常规使用浓度下对食源性单核细胞增生李斯特菌不具备有效抑菌作用,84消毒液及新洁尔灭在常规使用浓度下具备抑菌作用,过氧乙酸浓度达0.9%及以上,洗必泰浓度达0.5%及以上时,具有完全抑菌作用。结论对于食源性单核细胞增生李斯特菌,84消毒液、新洁尔灭、0.9%以上浓度的过氧乙酸及0.5%以上浓度的洗必泰具有完全抑菌效果,适用于对其进行消毒防控。
- 徐冬旸石磊曾晓敏何建华闫鹤
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌抑菌作用
- 实时浊度LAMP法检测豆制品中转基因成分被引量：4
- 2012年
- 通过设计转基因大豆内源基因(Lectin)、外源基因NOS和2个转基因大豆品系(GTS 40-3-2,MON89788)特异性LAMP引物,建立快速检测转基因大豆以及鉴定转基因大豆品系的LAMP体系,并选取国内豆制品利用CTAB法进行DNA提取,并针对上述基因进行PCR和LAMP扩增的对比,建立起了检测大豆制品中转基因成分的定性的LAMP方法。结果表明:4个LAMP方法均有较好的特异性,除了NOS、GTS 40-3-2的检测限为0.1%外,其他LAMP方法的灵敏度为0.01%,均能满足实际检测要求;在实时浊度LAMP法检测大豆制品转基因成分的鉴定中,传统的CTAB法能成功提取大豆粗加工制品的DNA,且DNA纯度能够进行核酸扩增反应。利用转基因外引物进行的普通PCR结果与实时浊度LAMP结果是一致的,说明建立的转基因实时浊度LAMP检测方法有很好的准确性。
- 叶蕾沈会平闫鹤李琳石磊
- 关键词：LAMP豆制品转基因
- 致病性弓形杆菌属生物学特性及诊断研究进展被引量：17
- 2013年
- 弓形杆菌(Arcobacter)属于弯曲菌科,革兰氏阴性,与弯曲菌(Campylobacter)类似。但不同的是,它在需氧、微需氧和15℃低温条件下均可生长。Arcobacter是一种人畜共患的食源性和水源性病原菌,主要分离自猪肉、牛肉、禽肉等动物性食品和水体。基于对国内外相关文献资料的整理,综述了Arcobacter的生物学特性、分类和分布、分离鉴定方法、致病性和防控措施等方面内容,为深入开展Arcobacter的检测、诊断、防控技术等方面研究提供背景参考。
- 毕水莲孟赫诚
- 食源性单核细胞增生李斯特菌的重金属镉抗性及其与抗生素耐药性的关系研究被引量：3
- 2013年
- 研究了不同血清型食源性单核细胞增生李斯特菌对重金属镉的抗性及其与抗生素耐药性之间的关系。采用琼脂稀释法检测单核细胞增生李斯特菌对重金属镉的抗性,与菌株的抗生素耐药性进行比较分析。结果表明,73株实验菌株中,36株具有镉抗性,总体镉抗性率达49.3%(36/73)。分离到的5株多重耐药单核细胞增生李斯特菌均为镉抗性菌株,表明食品生产、加工及其储存环境中这种同时携带多重耐药性与重金属抗性的微生物从食品链及有关环境进入到人类,就会对人类健康构成构成潜在威胁。
- 何建华徐冬旸刘星宇石磊闫鹤
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌血清型抗生素耐药性
- 恒温实时荧光法检测金黄色葡萄球菌被引量：5
- 2013年
- 恒温实时荧光技术是目前最新颖的核酸扩增方法。本文创建了恒温实时荧光法快速检测微生物技术方法并应用于金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)的快速检测。本研究针对金葡菌特异序列nuc设计6条引物,选取常见病原菌标准株为对照品进行引物特异性检测;选取金葡菌标准菌株进行灵敏度检测;并且利用食品中分离的金葡菌,同时进行LAMP反应和荧光PCR实验,验证LAMP反应的检出率,结合ESEQuant tube scanner进行实时检测。结果显示:所建立的恒温荧光扩增法具有扩增效率高、特异性强、灵敏度高(灵敏度为102CFU/mL)等优点。对50食品中分离的金葡菌进行检测,恒温荧光法检测出50株,荧光PCR的方法检测出50株,两种方法的检出率都为100%。本文引入的ESE Quant tube scanner平台结合恒温实时荧光法检测金葡菌不仅操作简单,便于携带,同时实现检测过程的数据化及自动化,适合金葡菌的现场检测和大规模监控。
- 刘羽霏叶蕾孟赫诚闫鹤石磊
- 关键词：金黄色葡萄球菌环介导等温扩增
- 禽肉中弯曲菌的分离、PFGE和DGGE分型被引量：3
- 2012年
- 随机选取某肉菜市场8份鸡肉和鸭肉样品中的弯曲菌(Campylobacter),分别采用Bolton和Preston肉汤增菌,然后以Skirrow、mCCDA选择分离培养和膜过滤的方法同时分离,运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和变性梯度凝胶电泳(DGGE)对分离出的菌株进行分子水平的分型和溯源.结果表明:共有6份样品污染了空肠弯曲菌(C.jejuni)或结肠弯曲菌(C.coli);Preston肉汤增菌、mCCDA选择分离培养法的分离效果最好;4份样品被同一种C.coli污染,2份样品分别污染了2种C.jejuni和3种C.coli;与PFGE相比,DGGE分型方法的灵敏度略低,但更快速、成本更低,且稳定、准确,可用于食品中弯曲菌的快速分型.
- 孟赫诚毕水莲闫鹤石磊
- 关键词：弯曲菌脉冲场凝胶电泳变性梯度凝胶电泳
