广东省科技计划工业攻关项目(2003C32711)
- 作品数：6 被引量：36H指数：5
- 相关作者：唐世杰胡素銮谢思田申纪奎易红更多>>
- 相关机构：汕头大学医学院第二附属医院中南大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金广东省卫生厅资助课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TGF-β3基因转染成纤维细胞促进大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合的实验研究被引量：8
- 2010年
- 目的观察TGF-β3基因转染的成纤维细胞对深Ⅱ度大鼠烫伤模型创面愈合的影响。方法将90只Wistar成年大鼠随机分为模型对照组(C组)、表皮转化生长因子组(EGF组)和TGF-β3转基因成纤维细胞组(TGF-β3组),制作10% TBSA烫伤模型,各组给予对应治疗,检测各组大鼠的创面愈合率,HE染色观察烫伤创面组织变化,SP法观察烫伤皮肤组织中TGF-β3蛋白表达情况。结果烫伤后14d、21d,创面愈合率TGF-β3组最高,与EGF组及C组之间的差异有统计学意义(分别为P<0.05,P<0.01);烫伤后14d及21d,C组、EGF组与TGF-β3组之间TGF-β1及TGF-β2蛋白表达差异有统计学意义(分别为P<0.05,P<0.01);烫伤后1d到21d,TGF-β3组与C及EGF组之间的TGF-β3蛋白表达的差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 TGF-β3转基因转染成纤维细胞可能通过在创面上持续分泌TGF-β3蛋白,降低TGF-β1及TGF-β2的水平,从而促进创面的愈合。
- 唐世杰朱镇森胡素銮谢思田姚建
- 关键词：成纤维细胞转化生长因子Β创面愈合烫伤大鼠
- pcDNA3.1(-)-hTGFβ_3成纤维细胞稳定表达系统的构建与生长增殖活性研究被引量：14
- 2006年
- 目的构建人转化生长因子β3的真核表达载体pcDNA3.1(-)TGFβ3转染NIH3T3成纤维细胞的稳定表达系统,研究转基因TGFβ3对成纤维细胞生长增殖活性的影响。方法通过脂质体介导的转染技术和G418细胞筛选法,将真核表达载体pcDNA3.1(-)TGFβ3质粒导入NIH3T3成纤维细胞,应用RTPCR与Westernblot检测hTGFβ3在真核细胞中的表达。经相差显微镜形态观察及四唑蓝比色实验法(MTT)检测细胞增殖活性。结果在10株转染和经G418反复筛选的NIH3T3成纤维细胞系中,有7株hTGFβ3mRNA及其蛋白的表达明显增强,其余3株细胞相对较弱或者没有表达。TGFβ3转基因稳定表达的NIH3T3成纤维细胞系的生长增殖明显减缓(P<0.05)。结论pcDNA3.1(-)TGFβ3真核表达载体转染NIH3T3成纤维细胞的稳定表达系统构建成功,转基因hTGFβ3在体外培养条件下可抑制成纤维细胞的增殖。
- 唐世杰谢思田胡素銮肖志强申纪奎易红
- 关键词：转化生长因子Β3基因转染成纤维细胞
- 转基因治疗在创面愈合中的进展被引量：5
- 2007年
- 姚建唐世杰
- 关键词：促进创面愈合转基因治疗细胞生物学病理性瘢痕分子生物细胞运动
- 转化生长因子-β_3对增生性瘢痕成纤维细胞的生物学作用(英文)被引量：6
- 2004年
- 背景:哺乳类动物有3种TGF-β异构体即TGF-β1,β2,β3,这3种异构体各自具有独特而不同的生物学作用,TGF-β1是明显的促瘢痕形成因子,而TGF-β3可减少TGF-β1,β2的产生,从而减少细胞外基质(ECM)合成,因此,TGF-β3有可能是人体内天然的抗瘢痕形成因子。目的:通过外源性TGF-β3对增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)生长增殖及Ⅰ,Ⅲ型胶原及TGF-β1蛋白表达的影响,了解其生物学行为,为临床治疗提供理论依据。设计:随机对照实验研究。地点和对象:汕头大学医学院第二附属医院整形烧伤外科完成,对象为新鲜无菌增生性瘢痕组织,来源于本科收治及门诊手术的增生性瘢痕患者6例,男3例,女3例;年龄5～45岁。干预:6例增生性瘢痕成纤维细胞体外培养,分为4组,实验组又分为5,10,50mg/L组分别加TGF-β35,10,及50mg/L,对照组加入FBM1.5mL,采用MTT比色法测定TGF-β3对HSFB增殖活性的影响,3H-脯氨酸掺入法测定其胶原合成,免疫组化检测Ⅰ,Ⅲ型胶原及TGF-β1蛋白表达情况。主要观察指标:TGF-β3对HSFB体外增殖,HSFBⅠ,Ⅲ型胶原及TGF-β1蛋白表达的影响,TGF-β3作用后HSFB胶原合成情况。结果:转化生长因子β3可抑制HSFB细胞增殖,作用120h后实验组细胞密度分别为(6.34±0.51),(6.01±0.38),(5.24±0.65)×105/瓶,明显低于对照组(10.
- 唐世杰胡素銮王玉银申纪奎
- 关键词：转化生长因子-Β3增生性瘢痕成纤维细胞生物学
- 全文增补中
- 真核表达载体pcDNA3．1(-)-转化生长因子β3的构建被引量：6
- 2005年
- 目的为研究成纤维细胞基因转染的可行性创造条件,从而为转化生长因子(TGF) β3转基因治疗创面与病理性瘢痕的研究奠定基础。方法应用基因重组技术和限制性内切酶酶切构建并鉴定pcDNA3．1(-)-hTGFβ3真核表达载体,经脂质体LipofectamineTM 2000介导质粒转染NIH3T3细胞后应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测hTGFβ3 mRNA在真核细胞中的表达。结果重组真核表达载体pcDNA 3．1(-)-hTGFβ3经限制性内切酶BamH I、HindⅢ酶切,电泳后显示1 253 bp的hTGFβ3目的片段和5．40 kb的pcDNA 3．1(-)载体片段,测序证实酶切片段与GenBank中登记的TGFβ3全长序列相同,证实pcDNA3．1(-)-hTGFβ3真核表达载体构建成功, 经RT-PCR检测了hTGFβ3在转录水平mRNA的表达情况,表明质粒转染NIH3T3细胞后 hTGFβ3 mRNA的表达明显增强。结论重组真核表达载体构建正确,并能在NIH3T3成纤维细胞中表达hTGFβ3 mRNA,为其在创面与病理性瘢痕的转基因治疗奠定了基础。
- 唐世杰谢思田胡素銮肖志强申纪奎易红
- 关键词：转化生长因子Β3基因重组成纤维细胞真核表达瘢痕
- 人脐带间充质干细胞的人转化生长因子β_3基因稳定表达系统的构建
- 2010年
- 目的:探讨构建人脐带间充质干细胞(huMSCs)的人转化生长因子(hTGF)β3基因稳定表达系统的可行性,为进一步探讨创面治疗的研究打下基础。方法:用组织贴壁法原代培养huMSCs,流式细胞术(FCM)鉴定细胞表面抗原CD29、34、44、45和80,用脂质体介导的转染技术将人pcDNA3.1(-)/TGF-β3重组质粒转染进入huMSCs,并用G418进行筛选得到单克隆细胞,扩增后得到稳定表达人TGF-β3细胞株,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学技术检测转染前、后及筛选前、后细胞内TGF-β3基因表达,再次采用FCM检测细胞表面抗原表达变化,最后Western blot检测稳定表达组及未转染huMSCs的TGF-β3蛋白表达。结果:原代培养的HuMSCs中约70%的细胞表达表面抗原CD29、44,而绝大部分不表达CD34、45和80,原代培养的细胞符合huMSCs特性。免疫细胞化学染色显示瞬时转染率为(10.0±0.2)%,稳定转染率(85.0±0.7)%(P<0.05),RT-PCR、Western blot显示转染并通过G418筛选的huMSCs高表达hTGF-β3,转染hTGF-β3基因的huMSCs其表面抗原与未转染前保持一致。结论:HuMSCs的hTGF-β3基因稳定表达系统构建成功,转染hTGF-β3基因的huMSCs体外培养条件下仍保持干细胞特性。
- 谢思田江乐文唐世杰何运铺罗红敏
- 关键词：脐带间充质干细胞转化生长因子Β3基因转染
