国家自然科学基金(30771005)
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
- 相关作者：黄颂敏杨玉玺吴蔚桦颜晓勇樊文星更多>>
- 相关机构：四川大学华西医院遵义医学院附属医院昆明医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糖尿病肾病模型中NF-κB与甘露聚糖结合凝集素途径补体激活的关系被引量：3
- 2011年
- 目的通过链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病肾病大鼠模型,了解糖尿病肾病时甘露聚糖结合凝集素(MBL)途径补体激活情况及其与核转录因子κB(NF-κB)的关系。方法将SD大鼠分为正常对照组(N组)和糖尿病肾病组(DN组)。DN组按55 mg/kg体质量一次性腹腔注射1% STZ,N组一次性腹腔注射等量柠檬酸缓冲液。于实验1、2、4、8周分别处死两组各5只大鼠,测量大鼠的血糖、24 h尿量、24 h尿白蛋白量、24 h尿肌酐、血清肌酐、体质量和肾脏质量,计算肌酐清除率和肾脏肥大指数,采用免疫组化SP法观察各组大鼠1、2、4、8周肾组织MBL,膜攻击复合物(MAC)及NF-κB的表达。结果与正常组相比,DN组大鼠肾小球MBL沉积增多,MAC,NF-κB表达明显增多(P<0.05),并随时间推移继续增高,各时间点差异有统计学意义(P<0.05)。STZ腹腔注射所致DN组大鼠的肾小球MBL,NF-κB的表达水平成显著正相关(r=0.973,P<0.01)。结论甘露聚糖结合凝集素途径的补体激活参与了糖尿病肾病的发生发展,可能为下一步的诊断治疗提供新的方向。
- 杨玉玺黄颂敏颜晓勇吴蔚桦
- 关键词：糖尿病肾病甘露聚糖结合凝集素膜攻击复合物核转录因子-ΚB
- 高糖和MBL途径的补体激活对人肾小球内皮细胞表达IL-6、TNF-α的影响被引量：3
- 2011年
- 目的观察高糖和甘露聚糖结合凝集素(MBL)途径补体激活对人肾小球内皮细胞(HRGEC)表达炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探索糖尿病肾病(DN)新的发病机制。方法体外培养正常HRGEC,随机分为正常糖组(5mmol/LD-葡萄糖)、甘露醇组(5mmol/LD-葡萄糖+25mmol/L甘露醇)和高糖组(30mmol/LD-葡萄糖),分别培养24h后,采用实时荧光定量RCR法(real-time PCR)检测各组细胞中IL-6和TNF-α mRNA的表达,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中IL-6和TNF-α的蛋白浓度。另将HRGEC随机分为单纯高糖组和高糖+MBL组,两组用30mmol/LD-葡萄糖培养24h后,加入等量30%MBL缺乏的人血清,高糖+MBL组另外加入1μg/mL MBL,继续培养4h。采用流式细胞技术和免疫荧光染色分别观察细胞表面MBL、C3和膜攻击复合物(MAC)的沉积;同时检测两组IL-6、TNF-α mRNA和蛋白的表达。结果与正常糖组和甘露醇组相比,高糖组细胞IL-6、TNF-α mRNA及蛋白表达增加(P<0.05)。流式细胞技术证实,高糖+MBL组细胞表面有明显的MBL和C3的共沉积,免疫荧光染色显示细胞表面有明显MAC沉积,单纯高糖组无上述现象;与单纯高糖组相比,高糖+MBL组细胞IL-6、TNF-α mRNA以及蛋白表达增加(P<0.05)。结论高糖可以诱导HRGEC炎症因子过表达;高糖和MBL共同存在时,MBL补体途径激活,炎症因子表达明显增加,提示MBL补体途径激活作为可能的未知发病机制对DN及其炎症状态起促进作用。
- 武晓慧黄颂敏樊文星唐万欣邱红渝
- 关键词：高糖甘露聚糖结合凝集素
- 甘露聚糖结合凝集素-A在早期糖尿病大鼠肾脏中的表达及意义被引量：7
- 2011年
- 目的探讨甘露聚糖结合凝集素-A(mannose-binding lectin A,MBL-A)在早期糖尿病大鼠肾脏中表达的变化规律及其与糖尿病肾病发生发展的关系。方法将实验大鼠分为模型组和对照组。模型组采用链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,分别于造模成功后第2、4、6、8周,用免疫组织化学、TUNEL染色分析和计算机图像分析技术连续多时点观察肾脏MBL-A的表达变化和细胞凋亡情况,并分析两者之间的关系及其与肾脏病理变化指标的相关性。结果模型组第2、4、6、8周MBL-A蛋白表达均强于对照组,各时间点比较差异有统计学意义;模型组第4、6、8周肾小球细胞凋亡指数(AI)均高于对照组,各时点间差异有统计学意义。模型组MBL-A与尿蛋白、肾脏肥大指数(KI)呈正相关;肾小球细胞AI与尿蛋白、KI呈正相关;MBL-A与细胞AI呈正相关。结论 MBL-A在早期糖尿病大鼠肾脏中表达上调,以肾小球表达上调为主,并随病程延长逐渐增强,其表达变化与糖尿病肾脏病变相关。细胞凋亡也参与了糖尿病早期肾脏病变的变化,激活MBL,两者相互作用,从而促进糖尿病肾病的发展。
- 颜晓勇黄颂敏吴蔚桦杨玉玺薄虹
- 关键词：糖尿病肾病甘露聚糖结合凝集素细胞凋亡
- 高糖和甘露聚糖结合凝集素激活补体途径对人肾小球内皮细胞TGF-β_1表达及NF-κB活性的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察高糖和甘露聚糖结合凝集素(MBL)激活补体凝集素途径(LCP)对人肾小球内皮细胞(HRGECs)转化生子因子-β1(TGF-β1)表达和核转录因子-κB(NF-κB)活性的影响。方法体外培养HRGECs,根据不同体外干预条件,随机分为5组:正常糖对照组,正常糖+MBL组,高糖组,高糖+MBL组以及抗MBL组。采用流式细胞计数检测HRGECs表面LCP相关信号通路蛋白MBL和C3的表达;实时荧光定量RCR和ELISA法分别检测HRGECs中TGF-β1mRNA表达及其上清液中蛋白浓度,凝胶迁移滞后实验(EMSA)检测细胞核内NF-κB的活性。结果①高糖+MBL组HRGECs表面MBL、C3及MBL+C3蛋白沉积高于正常糖+MBL组、高糖组(P<0.05);而对高糖+MBL组进行抗MBL干预后,HRGECs表面MBL、C3及MBL+C3蛋白沉积明显减少(P<0.05)。②高糖+MBL组的TGF-β1mRNA和蛋白表达均高于正常糖+MBL组和高糖组(P均<0.05);进行抗MBL干预后,其TGF-β1mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05)。③高糖+MBL组可见NF-κB活性明显增强,且高于正常糖+MBL组和高糖组(P<0.05);抗MBL干预后,其NF-κB活性明显减弱(P<0.05)。结论高糖和MBL可能通过激活LCP使人肾小球内皮细胞TGF-β1核酸表达及蛋白释放增加,并导致细胞内NF-κB活性明显增强;抗MBL干预可阻断LCP激活,下调TGF-β1核酸及蛋白表达,抑制NF-κB激活。
- 邱红渝樊文星左川黄颂敏刘芳唐万欣
- 关键词：甘露聚糖结合凝集素转化生长因子-Β1核因子NF-ΚB
