广东省自然科学基金(06300768)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 缺氧诱导因子-1α小干扰RNA联合顺铂诱导人食管鳞癌细胞凋亡被引量：2
- 2009年
- 目的观察缺氧诱导因子（HIF）-1α小干扰RNA联合顺铂（DDP）对人食管鳞癌TE-1细胞凋亡的影响。方法人工合成HIF-1α小干扰RNA，体外培养人食管鳞癌TE-1细胞分为4组：A组用生理盐水处理，B组用DDP处理，C组用小干扰RNA处理，D组用小干扰RNA和DDP协同处理；逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）半定量检测HIF-1αmRNA的表达，Westernblot法检测HIF-1α蛋白的表达，流式细胞仪检测细胞凋亡。结果RT-PCR法检测A、B、C和D组细胞的HIF-1αmRNA表达分别为（0．5325±0．0809）、（0．5003±0．0726）、（0．0986±0．0171）和（0．0849±0．0133），Westernblot法检测HIF-1α蛋白表达分别为（0．7280±0．0268）、（0．7115±0．1293）、（0．2362±0．0266）和（0．1917±0．0234），其中D组与A、B两组比较差异有统计学意义（P〈0．01），与C组比较差异无统计学意义（P〉0．05）；A、B、C和D组的细胞凋亡率分别为（3．23±0．61）％、（29．88±3．48）％、（34．48±5．69）％、（56．37±7．99）％，其中D组与其他3组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论HIF-1α小干扰RNA能够提高DDP的细胞毒性作用，两者联合能有效促进人食管鳞癌TE一1细胞的凋亡，显著提高化疗效果。
- 廖洪映宋江平谷力加翁毅敏黄邵洪李昀张健蔡松旺陈惠国
- 关键词：HIF-1Α顺铂脱噬作用
- 纳米介导的缺氧诱导因子1α小干扰RNA抑制人食管鳞癌TE-1细胞生长
- 2009年
- 背景:纳米微粒作为一种比较理想的非病毒基因递送载体,具有无免疫原性和致瘤性等优越性。利用纳米技术和基因干扰技术阻断缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1,HIF-1α)在食管鳞癌组织的表达,降低癌细胞对化疗药物的耐药性,理论上成为能够抑制食管癌细胞生长的有效方法。目的:探讨HIF-1α小干扰RNA纳米微粒对人食管鳞癌TE-1细胞生长的抑制作用。设计、时间及地点:以体外培养的食管鳞癌TE-1细胞为对象,基因水平完全随机对照实验,于2007-01/2008-12在中山大学附属第三医院中心实验室完成。材料:由上海生物工程公司合成HIF-1α小干扰RNA,采用超声乳化法制备纳米微粒。人食管鳞癌TE-1细胞株购自中科院上海细胞库。方法:体外培养的人食管鳞癌TE-1细胞分为4组:分别为生理盐水组,不含基因的纳米微粒组,HIF-1α小干扰RNA组,HIF-1α小干扰RNA纳米微粒组。主要观察指标:RT-PCR检测HIF-1α mRNA的表达,Western-blot法检测HIF-1α蛋白的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;MTT法检测细胞增殖情况。结果:处理72h后HIF-1α小干扰RNA纳米微粒组细胞的HIF-1α mRNA表达和HIF-1α蛋白表达低于其他3组(P<0.01),细胞凋亡率高于其他3组(P<0.01)。HIF-1α小干扰RNA纳米微粒组细胞增殖受明显抑制,生长缓慢,与其他3组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:HIF-1α小干扰RNA纳米微粒能够有效减少食管鳞癌TE-1细胞的HIF-1α mRNA和蛋白的表达,提高肿瘤细胞的凋亡,显著抑制TE-1细胞的生长。
- 廖洪映宋江平谷力加翁毅敏李昀张健蔡松旺余超陈惠国王翠苹
- 关键词：HIF-1Α纳米食管肿瘤
- 缺氧诱导因子1α小干扰RNA联合顺铂抑制人食管鳞癌TE-1细胞裸鼠移植瘤的生长
- 2009年
- 目的探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）小干扰RNA（siRNA）联合顺铂对人食管鳞癌TE-1细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法体外培养人食管鳞癌TE-1细胞，接种于12只裸鼠右上肢外侧皮下，建立裸鼠荷瘤模型开始抑瘤实验。实验分为4组，每组3只，A组用生理盐水瘤内注射；B组用顺铂（20mg／L）瘤内注射；C组用HIF-1α siRNA（20umol/L）瘤内注射；D组用HIF—1α siRNA（20umol/L）和顺铂（20mg／L）协同瘤内注射。各组注射体积均为20ul，每周测量肿瘤体积变化。3周后处死裸鼠，测量各组移植瘤质量；RT-PCR半定量检测各组移植瘤TE-1细胞HIF—1α mRNA的表达；免疫组织化学法检测其HIF—1α蛋白的表达；流式细胞仪Annexin V-FITC／PI双标检测其细胞的凋亡。结果抑瘤实验开始3周后，A、B、C和D组的移植瘤体积分别为（1．477±0．132）cm^3、（1．200±0．114）cm^3、（1．223±0．129）cm^3和（0．890±0．141）cm^3；移植瘤质量分别为（7．38±0．96）g、（6．35±0．73）g、（6．12±0．65）g和（3．51±0．42）g。B、C、D3组的抑瘤率分别为14．0％、17．1％、52．4％，其中D组移植瘤的生长受抑制最明显，与其他3组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。C和D组TE-1细胞的HIF-1α mRNA表达下调至0．343±0．080和0．312±0．055，蛋白表达下调至0．196±0．018和0．229±0．035，与A（mRNA1．315±0．179，蛋白0．523±0．102）、B（mRNA1．483±0．460，蛋白0．542±0．174）两组差异有统计学意义（P〈0．01），而C、D两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。A、B、C和D组的TE-1细胞凋亡率分别为（6．13±1．38）％、（28．30±4．82）％、（34．10±5．56）％、（52．88±8．77）％，其中D组与其他3组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论HIF—1α siRNA能有效下调裸鼠体内食管鳞癌TE-1细胞HIF—1α的表达，提高顺铂的细胞毒性作用，诱导�
- 廖洪映谷力加翁毅敏黄邵洪陈惠国李昀蔡松旺张健宋江平
- 关键词：顺铂食管肿瘤鳞癌
