国家高技术研究发展计划(2002AA213011) 作品数:2 被引量:15 H指数:2 相关作者: 姚冬生 谢春芳 刘大岭 黄小葵 胡熔 更多>> 相关机构: 暨南大学 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 广东省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 农业科学 轻工技术与工程 化学工程 生物学 更多>>
重组阿拉伯糖苷酶在毕赤酵母中的分泌表达及其活性分析 被引量:2 2006年 假密环菌是一种果树腐病菌,具有较强的分解代谢纤维素的能力。根据已克隆出的阿拉伯糖苷酶基因序列(Accession Number AJ620046)设计引物从假密环菌的mRNA中克隆出阿拉伯糖苷酶的ORF片段,构建重组质粒pPIC9-AF,与组氨酸标签融合,电转化毕赤酵母菌GS115并进行诱导表达。所得到的重组阿拉伯糖苷酶在30-35℃时有较高的酶活,最适反应活性pH值在 6.0~8.0之间,而在pH4.0~8.0范围内酶活基本保持在80%以上,比大多已报道的阿拉伯糖苷酶最适pH范围宽。对于高效表达重组阿拉伯糖苷酶以及对其进一步的酶学性质研究提供了良好的基础。 姚冬生 谭慧媚 黄辉 刘大岭 谢春芳Aflatoxin-detoxifizyme的质谱鉴定及其cDNA的克隆与表达 黄曲霉毒素(Aflatoxins,AFT)被认为是潜在的对人类危害极为突出的强致癌诱变剂,世界卫生组织(WHO)在确定重点研究的毒物中,把黄曲霉毒素列在首位。AFT对人类的危害主要通过下面几方面:①污染AFT的食品食用前... 姚冬生 刘大岭 管敏 谢春芳 宋艳萍关键词:AFLATOXIN-DETOXIFIZYME CDNA 文献传递 Armillariella tabescens EJLY2098β-甘露聚糖酶的诱导、纯化及酶学性质分析 被引量:13 2006年 Armillariella,tabescens EJLY2098经魔芋精粉诱导,可产β-甘露聚糖酶,再用正交实验优化诱导培养基,结果在培养基为魔芋精粉2%、蛋白胨1%、土豆汁25%、KH2PO4 0.3%、MgSO4·7H2O 0.15%、维生素B1 0.01%时可诱导出较高活性的酶。用DEAE-阴离子交换色谱从培养上清分离纯化β-甘露聚糖酶,出现2个活性组份。活性组份P2的SDS-PAGE分析显示电泳纯的一条带,分子量约78.9kDa。HPTLC分析P2为内切β-甘露聚糖酶;酶反应的最适温度为60℃,最适pH为4.0-6.0。保温30min的半失活温度T1/2为63℃,在pH4.5-6.0之间稳定性较好。Na+和Ba2+对其有激活作用,等电点pI约为4.0-4.1。获得了一株产β-甘露聚糖酶的新菌种,为进一步用基因工程方法克隆并构建具有完整自主知识产权的重组β-甘露聚糖酶基因工程菌提供了重要的基础工作。 姚冬生 黄小葵 刘大岭 谢春芳 胡熔关键词:魔芋精粉 Β-甘露聚糖酶 纯化 产ADTZ真菌cDNA文库的构建及部分克隆的随机测序与生物信息学分析 <正>黄曲霉毒素(AFT)是某些黄曲霉属真菌的次级代谢产物,对人类和动物危害极大。AFT的生物去毒转化是该领域中倍受关注的热点。本研究组筛选到一株产AFT毒酶的菌株(E-20),并从中分离出黄曲霉毒素解毒酶(ADTZ)。... 赵龙 谢春芳 郑嘉瑜 刘大岭 姚冬生文献传递