国家科技攻关计划(2001BA804A28)
- 作品数：10 被引量：108H指数：7
- 相关作者：李建科温艳霞周艳利赵政阳梁俊更多>>
- 相关机构：陕西师范大学西北农林科技大学银川大学更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划陕西省科技攻关计划西安市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 用于农药残留检测的大豆酯酶的纯化分离被引量：3
- 2007年
- 以大豆种子为原料探索农药残留检测用酯酶的新酶原。采用差素离心、硫酸铵盐析、DE-AE-32离子交换层析和SephadexG-100凝胶过滤层析等方法对大豆酯酶进行了纯化分离,并研究了纯化酶对有机磷和氨基甲酸酯类农药的敏感性。最终得到3种电泳纯的大豆酯酶,记为E1,E2和E3。但3种大豆酯酶对有机磷和氨基甲酸酯类农药的敏感性不同,E1对农药没有敏感性,E2的敏感性比E3好。因此,大豆酯酶E2可作为农药残留检测的新酶原。
- 周艳利李建科温艳霞
- 关键词：农药残留纯化
- 耐热菌的竞争定量PCR检测方法优化与建立被引量：10
- 2006年
- 【目的】研究苹果浓缩汁中耐热菌(Alicyclobacillusacidoterrestris)的定量PCR快速检测法。【方法】通过引物设计、PCR扩增及凝胶纯化试剂盒回收,构建并获得耐热菌的PCR竞争模板;用获得的竞争模板作为定量内标物建立耐热菌的竞争定量PCR(QC-PCR)检测体系。【结果】经对建立的QC-PCR检测体系优化,目标模板检测灵敏度由5×104个分子/PCR体系,提高到50个分子/PCR体系,竞争模板和目标模板分子共扩增可检测到5×102个目标模板分子/PCR体系,并能从人工回添苹果浓缩汁样品中定量检测到5×103cfu/PCR体系的耐热菌,整个检测时间为4～5h,比传统的细菌培养皿培养记数法时间(4～5d)大大缩短。【结论】本研究建立的耐热菌竞争定量PCR检测法特异、快速,可作为微生物PCR竞争模板构建和建立竞争定量PCR的方法学参考,也可用于商品果汁和苹果浓缩汁工业化生产中耐热菌的快速检测和质量安全控制。
- 李建科冯再平仇农学
- 关键词：耐热菌苹果浓缩汁
- 活性炭对浓缩苹果汁中甲胺磷残留农药吸附性能的研究被引量：12
- 2007年
- 本实验采用超声波提取、气相色谱检测的方法,研究了活性炭对浓缩苹果汁中甲胺磷残留农药吸附的工艺参数,结果表明:活性炭添加量15%,吸附时间1min,硅藻土的添加量为6．3%时,对浓缩苹果汁中甲胺磷残留农药吸附效果最佳。
- 田洪磊詹萍李开雄
- 关键词：浓缩苹果汁甲胺磷活性炭农药残留
- 苹果农药残留研究进展被引量：28
- 2005年
- 概述了我国苹果中有机氯、有机磷、拟除虫菊酯、氨基甲酸酯类等农药的残留现状及农药残留分析的研究进展和存在问题,介绍了国内外当前在农药残留分析中应用的固相萃取(SPE)、超临界流体萃取(SFE)、加速溶剂萃取(ASE)、基质固相分散萃取(MSPDE)等样品预处理技术和超临界流体色谱(SFC)、色-质联用(GC/LC-MS)、高效毛细管电泳(HPCE)、酶联免疫吸附测定技术(ELISA)等检测方法的应用进展。对有关苹果农药残留的国内外标准进行了比较分析,指出了我国农药残留标准和农药残留检测方法与国外的差距。提出了我国苹果农药残留今后研究的重点和方向。
- 李海飞赵政阳梁俊
- 关键词：苹果农药残留
- 快速检测农药残留用大豆酯酶的稳定性被引量：2
- 2008年
- 目的观察用于快速检测农药残留的大豆酯酶的稳定性,确定其最适保存条件。方法分别测定不同温度、不同酸碱度和不同保护剂对大豆酯酶酶活力的影响。结果在4℃保存30d,酶活力损失较少;在-20℃保存30d,完全失活;温度在50℃以下,pH在6.0～9.0保存10min,酶活力无明显变化;保护效果好的保护剂依次为牛血清白蛋白(BSA)、蔗糖和甘油。结论已确定大豆酯酶最适保存条件。
- 周艳利李建科
- 关键词：农药残留稳定性
- 植物酯酶法检测有机磷农药的敏感性和检测限的研究被引量：19
- 2006年
- 采用本室自制的植物酯酶,对19种有机磷农药进行了敏感性试验,并测定了该酶对这19种有机磷农药的最低检测限(LOD)。研究表明,所制备植物酯酶对受试的18种有机磷农药均有良好的敏感性,且最低检测限远低于国家规定的最大残留限量(MRL),因此,该酶可作为有机磷农药残留检测用酶。
- 温艳霞李建科张晓敏许娟
- 关键词：植物酯酶有机磷农药敏感性
- 苹果中拟除虫菊酯类农药残留分析方法研究被引量：8
- 2006年
- 采用气相色谱法研究建立了同时检测苹果中5种拟除虫菊酯类农药(甲氰菊酯、功夫、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯)残留的分析方法。该方法农药残留物用乙腈提取,弗罗里硅柱净化,添加浓度分别为0.5、1.0、2.0 mg/kg,回收率在78.16%～104.26%,最低检出限在0.012 1～0.028 4 mg/kg,相对标准偏差在3.2%～7.1%。该方法简便、准确,分离效果好,回收率高,完全符合农药残留分析的要求。
- 张金虎马书尚梁俊赵政阳
- 关键词：苹果农药多残留拟除虫菊酯类农药
- 农残检测用大豆酯酶同工酶的分离及特性研究被引量：1
- 2008年
- 从大豆中纯化分离得到三种大豆酯酶同工酶(Soybean Esterase isozyme,SEI)记为SEI1,SEI2和SEI3。利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定三种酯酶的亚基相对分子量,SEI1的亚基分子量为40.7 ku;SEI2含有两个亚基,分子量分别为37.2 ku和21.4 u;SEI3的亚基分子量为74.1 ku。催化底物α-乙酸奈酯的米氏常数Km分别为22.7,58.6和13.4μmol/L,最适温度分别为30,30和25℃,最适pH值分别为6.5,6.0和6.5。三种酯酶对农药的敏感性实验表明,SEI2对农药的敏感性最好,SEI3其次,SEI1无敏感性。故而选择SEI2作为农残检测用植物酯酶。
- 周艳利李建科
- 关键词：农药残留大豆酯酶同工酶
- 有机磷农残检测用植物酯酶的研究被引量：33
- 2006年
- 本文研究了多种植物种子中植物酯酶的提取方法和总酯酶活力,得出了最佳提取条件。并且研究了不同来源的植物酯酶对有机磷农药的敏感性,确定了黄豆来源酯酶对敌敌畏等五种农药的最低检测限。结果表明,以黄豆来源的植物酯酶的总酯酶活力和敏感性为最好。
- 温艳霞李建科
- 关键词：植物酯酶农药残留检测限
- 大豆酯酶的分离、纯化及性质研究被引量：7
- 2008年
- 本实验研究了从大豆种子中分离、纯化大豆酯酶的方法,研究表明经过缓冲液提取、差速离心、盐析沉淀和离子交换层析可以得到电泳纯级的大豆酯酶。特性研究表明大豆酯酶的最适温度为30℃,最适pH值为7.5,其酯酶活力随离子强度的变化而变化,用双倒数法求的大豆中酯酶的米氏常数为2.97μmol/L。
- 温艳霞兰文礼李建科
- 关键词：分离纯化最适温度最适PH值米氏常数
