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国家自然科学基金(30570821)

作品数:6 被引量:10H指数:1
相关作者:林松挺程斌黎培员杨玉珍郭晓榕更多>>
相关机构:华中科技大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 5篇细胞
  • 5篇基因
  • 3篇肝细胞
  • 3篇DNA修复
  • 2篇修复酶
  • 2篇乙型
  • 2篇乙型肝炎
  • 2篇乙型肝炎病毒
  • 2篇周期
  • 2篇细胞周期
  • 2篇恶性
  • 2篇恶性转化
  • 2篇肝炎
  • 2篇肝炎病毒
  • 2篇DNA修复酶
  • 2篇HBX基因
  • 2篇HOGG1
  • 2篇病毒
  • 1篇蛋白
  • 1篇乙型肝炎病毒...

机构

  • 5篇华中科技大学

作者

  • 5篇程斌
  • 5篇林松挺
  • 4篇黎培员
  • 3篇杨玉珍
  • 2篇郑要初
  • 2篇郭晓榕

传媒

  • 2篇中华肝脏病杂...
  • 1篇中华内科杂志
  • 1篇临床内科杂志
  • 1篇胃肠病学和肝...
  • 1篇Journa...

年份

  • 2篇2009
  • 2篇2008
  • 2篇2007
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
DNA修复酶hMTH1在乙型肝炎病毒x基因致人肝细胞系L02细胞恶性转化中的意义被引量:1
2008年
目的通过转基因细胞模型L02/HBx观察乙型肝炎病毒x基因(HBx)对DNA修复酶hMTH1转录表达的调控及其对人肝细胞系L02细胞生物学特性的影响。方法传代培养稳定表达HBx的转基因细胞模型L02/HBx及空白对照组L02细胞和空载体对照组L02/pcDNA3.1细胞,倒置显微镜下观察各组细胞的形态学特征,以四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、流式细胞术检测各组细胞增殖、细胞周期和凋亡状况,并进行软琼脂克隆形成实验观察细胞的恶性转化能力。同时应用实时定量PCR测定各组细胞DNA修复酶hMTH1的表达水平。结果镜下观察发现L02/HBx细胞与对照组L02细胞相比形态发生明显改变。MTT法显示L02/HBx细胞生长速度比两对照组显著加快。流式细胞术结果表明,HBx可加速细胞周期进程、抑制细胞凋亡。软琼脂克隆形成实验发现L02/HBx细胞的克隆形成率明显高于L02细胞和L02/pcDNA3.1细胞(P〈0.05)。实时定量PCR检测发现hMTHI在L02/HBx细胞中的表达显著高于L02细胞和L02/pcDNA3.1细胞(P〈0.05)。结论HBx可诱导L02细胞发生恶性转化,在此过程中DNA修复酶hMTH1可出现反应性的上调表达。
程斌郑要初郭晓榕林松挺黎培员
关键词:乙型肝炎病毒X基因恶性转化
阿霉素干预下HBx基因对肝细胞凋亡的影响被引量:1
2007年
HBx蛋白具有广泛的反式激活作用,可通过多种复杂的细胞信号传导途径参与细胞凋亡、DNA修复调控,促进细胞周期进程,与HCC的发生、发展具有密切的关系。我们采用脂质体转染构建稳定表达HBX的转基因细胞模型L02/HBx,运用流式细胞术观察其细胞周期、增殖及细胞凋亡情况,着重研究阿霉素干预后HBx对肝细胞凋亡的影响,旨在探索HBx致肝细胞恶性转化的分子机制。
程斌林松挺杨玉珍黎培员
关键词:细胞周期
The Effects of HBx Gene on the Expression of DNA Repair Enzymes hOGG1 and hMYHα mRNA in HepG2 Cells被引量:1
2009年
To observe the alteration in the expression of DNA repair enzymes hOGG1 and hMYHα and the change in 8-OHdG levels in the HBx gene-transfected cells HepG2/HBx and to explore the mechanisms of the HBV-associated hepatocellular carcinoma, the gene-transfected cells HepG2/HBx which stably expressed HBx was established, and the effect of HBx on the cell cycle and proliferation of HepG2 was examined. By using the β-actin as the interior control, real-time polymerase chain reaction (Real-time qPCR) was employed to quantitatively detect the expression of DNA repair enzymes hOGG1 and hMYHα in the HepG2/HBx, the control cells HepG2 and HepG2 transfected with pcDNA3.1 vector (HepG2/pDNA3.1). The 8-OHdG levels were determined by HPLC/ECD in the established gene-transfected cells HepG2/HBx and the control cells HepG2 and HepG2/pcDNA3.1. Our results showed that the expression of DNA repair enzyme hMYHα in the HepG2/HBx (0.021±0.007) was significantly lower than that of HepG2 (0.099±0.041) (P<0.05) and HepG2/pDNA3.1 (0.121±0.005) (P<0.05). However, the no significant differences existed in the expression of DNA repair enzyme hOGG1 among the three cell strains (P>0.05). The 8-OHdG level in the HepG2/HBx was significantly higher than that in HepG2 and HepG2/pcDNA3.1 (P<0.05). It is concluded that HBx gene may inhibit the expression of DNA repair enzyme hMYHα mRNA to impair the ability to repair the intracellular DNA oxidative damage, to increase the oxidative DNA-adduct 8-OHdG and to affect the nucleotide excision repair function, thus participate in the occurrence and development of hepatocellular carcinoma.
程斌郭晓榕郑要初王颖刘春黎培员
关键词:DNA修复酶HOGG1HBX蛋白MRNA基因转染细胞实时聚合酶链反应
HBx基因对HepG2细胞DNA修复酶表达的影响被引量:1
2009年
乙型肝炎病毒X基因(HBx)可通过与宿主细胞的多种蛋白相互作用,参与肝细胞癌(HCC)的发生和发展。但其详细机制尚未完全阐明。8羟基鸟嘌呤是一种具有高度致突变作用的DNA氧化损伤产物,可导致G/C到T/A的碱基置换,进而诱发基因突变和肿瘤发生。人DNA修复酶1(hOGG1)可特异性地切除和修复DNA双链中与碱基C配对的80HdG;
程斌郭晓榕郑要初林松挺黎培员
关键词:HOGG1HEPG2细胞
乙型肝炎病毒x影响肝细胞增殖与凋亡的初步研究被引量:5
2008年
目的观察乙型肝炎病毒x(HBx)导入正常肝细胞后对细胞周期及凋亡的影响,探讨HBx致肝细胞癌的发生机制。方法应用脂质体转染重组质粒pcDNA3.1(+)/v5-hisB-HBx后,G418筛选获得阳性克隆L02/HBx,分别用RT-PCR和Westernblot鉴定其HBxmRNA与蛋白的表达。噻唑蓝比色法(MTT)及细胞生长曲线观察细胞增殖情况,流式细胞术分析其细胞周期特征与凋亡率。结果构建的L02/HBx细胞中可稳定表达HBxmRNA及蛋白。与对照组比较,L02/HBx细胞增殖速度明显加快(P<0.05);其G1期细胞比例明显减少,S期细胞比例显著增加,凋亡率明显降低(P<0.05)。结论成功构建稳定表达HBx的转基因细胞株L02/HBx,初步显示HBx可促进肝细胞增殖,抑制细胞凋亡,从而加速细胞周期进程,可能参与肝细胞的恶性转化。
程斌林松挺杨玉珍黎培员
关键词:HBX细胞周期流式细胞术肝细胞癌
HBVX基因与肝细胞恶性转化相关性的初步研究被引量:1
2007年
目的研究HBVX基因对L02肝细胞生物学特性的影响,初步探讨HBVX基因在肝细胞恶性转化中的作用,为进一步研究HBx致原发性肝细胞癌(HCC)的机制及HCC新的防治策略奠定基础。方法构建稳定表达HBx的转基因细胞株L02/HBx,运用倒置相差显微镜、四唑盐(MTT)比色试验、流式细胞仪观察和检测L02/HBx在形态学、增殖、凋亡和细胞周期等方面的变化。结果成功构建L02/HBx,观察发现细胞形态发生明显改变,MTT检测结果表明L02/HBx生长速度加快但经阿霉素(ADM)处理后凋亡速度加快。流式细胞仪(FCM)检测结果显示,与对照组细胞相比,L02/HBx凋亡率及G1期细胞比例降低,S期细胞所占比例增高,二倍体细胞比例降低,非整倍体细胞比例增高。经阿霉素处理后,L02/HBx细胞的凋亡率大大增加,G1期细胞的比例仍比对照组低,S期细胞的比例亦比对照组高,二倍体细胞的比例显著降低,非整倍体细胞的比例明显增加。结论HBx能引起细胞增殖失控而导致恶性转化,在凋亡因子的作用下,HBx抑制损伤DNA的修复而促进细胞凋亡,并可能引起细胞的变异而导致恶变。
林松挺杨玉珍程斌
关键词:HBVX基因恶性转化HCCFCM
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