国家自然科学基金(30570815)
- 作品数：9 被引量：49H指数：4
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- 低氧诱导因子脯氨酰羟化酶与OS-9在大鼠低氧肺动脉高压中的协同作用被引量：2
- 2009年
- 目的:研究HIF-1α、PHDs及OS-9的表达变化在低氧性肺动脉高压(HPH)中的作用和意义。方法:SD大鼠随机分5组(n=8):对照组(C组)和低氧3、7、14和21 d组,常压低氧复制HPH大鼠模型。原位杂交、RT-PCR检测mRNA表达,免疫组化、Western blot检测蛋白质表达。结果:①HIF-1αmRNA对照组和低氧3 d无明显差异,低氧14 d后表达明显增高;HIF-1α蛋白质低氧3 d组表达明显增高,7 d达高峰;②对照组PHD1mRNA呈阳性表达,各低氧组与对照组比较差异不显著,PHD1蛋白质在对照组强阳性表达,低氧14 d下降,低氧21 d保持较低水平;对照组PHD2 mRNA呈阳性表达,低氧3 d增高,14 d达到高峰,21 d维持高水平,其蛋白质表达趋势与mRNA相同;对照组PHD3 mRNA和蛋白质表达不明显,低氧3 d mRNA明显增高,蛋白质低氧3 d明显增高,低氧7 d保持高水平,低氧14 d和21 d下降。③OS-9 mRNA在对照组呈强阳性表达,低氧3 d后迅速降低,14 d达到最低水平;其蛋白质表达趋势与mRNA相同。相关分析表明,肺小动脉壁OS-9蛋白质表达水平与Os-9 mRNA呈正相关,与RVHI、mPAP、WA%及LA%呈负相关。结论:HIF-1α、PHDs及OS-9均在大鼠HPH的发病机制中发挥作用。OS-9可能通过增强PHDs的活性来调节HIF-1α的表达,从而在HPH的发生和发展中发挥作用。
- 潘坤戴爱国胡瑞成
- 关键词：低氧诱导因子肺性低氧
- 一氧化氮抑制缺氧诱导因子α亚基表达对大鼠缺氧性肺动脉高压的作用被引量：11
- 2011年
- 目的:研究缺氧诱导因子α亚基(HIF-α)在一氧化氮(NO)抑制缺氧性肺动脉高压形成中的作用。方法:32只成年雄性SD大鼠随机分为4组:常氧对照组(C组)、单纯缺氧组(H组)、缺氧加左旋精氨酸组(L-Arg组)、缺氧加左旋精氨酸甲酯组(L-NAME组)。3个缺氧组常压缺氧(10%)21 d并每天1次腹腔注射相应药物。测定各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右室肥大指数(RVHI)、血管形态学指标;原位杂交和RT-PCR检测HIF-α、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达,免疫组化和Western blotting检测HIF-α、iNOS蛋白质的表达。结果:3个缺氧组肺组织NO浓度较C组降低,且L-Arg组肺组织NO浓度高于H组,L-NAME组肺组织NO浓度低于H组。3个缺氧组mPAP、RVHI、血管壁面积与血管面积比值(WA%)、肺动脉中膜厚度(PAMT)都较对照组增高(P<0.05)。L-Arg组mPAP和PAMT较H组低(P<0.05),RVHI和WA%与H组比较差异无显著。L-NAME组mPAP、RVHI、WA%和PAMT均较H组高(P<0.05)。3个缺氧组HIF-1α和HIF-3αmRNA表达较C组增高(P<0.05),3个缺氧组间HIF-1αmRNA表达差异无显著,而L-NAME组HIF-3αmRNA表达高于L-Arg组(P<0.05),其它组间无显著差异。L-NAME组HIF-2αmRNA高于C组,其它组之间差异无显著。3个缺氧组HIF-1α、HIF-2α和HIF-3α蛋白质表达较C组均增高(P<0.05),且L-Arg组表达低于H组(P<0.05),L-NAME组高于H组(P<0.05)。直线相关分析表明,大鼠肺组织NO浓度与HIF-α蛋白质、iNOS mRNA及蛋白质表达水平、mPAP、RVHI、WA%和PAMT呈负相关(均P<0.05)。结论:在缺氧性肺动脉高压大鼠模型中NO主要在转录后下调HIF-α的表达,NO下调HIF-α的表达可能是其抑制缺氧性肺动脉高压形成的重要机制。
- 陈云荣戴爱国胡瑞成
- 关键词：缺氧诱导因子一氧化氮缺氧
- HIF-1α的泛素化和SUMO化修饰被引量：3
- 2008年
- 低氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)是异二聚体的转录因子,由氧敏感的α亚基和在细胞内稳定表达的β亚基组成,在细胞低氧应答反应中起核心作用,能调节100多种涉及低氧应激下细胞适应和存活的靶基因.泛素是一种由76个氨基酸残基组成的保守性多肽,广泛存在真核生物中.SUMO是泛素样蛋白家族成员,分子量约为12 kD的小蛋白,从拟南芥到人类普遍存在.泛素和SUMO可共价结合许多靶底物蛋白,对其进行翻译后修饰,该过程分别称为泛素化与SUMO化.近来研究显示,HIF-1α的翻译后修饰如泛素化、SUMO化可调节其的稳定性,从而改变HIF-1α的转录激活活性.本文主要就HIF-1α泛素化及SUMO化修饰等问题作一综述.
- 符代炎戴爱国陈云荣朱黎明胡瑞成
- 关键词：低氧低氧诱导因子-1翻译后修饰泛素化
- Siah、PHDs和HIFs-α在慢性阻塞性肺疾病患者中的表达变化被引量：1
- 2013年
- 目的研究慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者肺动脉高压形成过程中Siah表达变化的规律及与PHDs和HIFs—α的相关关系。方法HE染色检测COPD患者和对照组患者肺小动脉形态学改变，应用原位杂交检测肺小动脉壁内Siah、PHDs及HIFs—αmRNA的表达水平，应用免疫组织化学检测肺小动脉壁内Siah、PHDs及HIFs—α蛋白质表达水平。结果COPD患者肺小血管HIFs—αmRNA和蛋白质表达均增高，蛋白质增高更明显，COPD患者PHDlmRNA与对照组比较差异无统计学意义，PHD2、PHD3mRNA表达明显增高，PHD1蛋白质表达水平降低，PHD2蛋白质水平升高，PHD3较对照组比较差异无统计学意义。COPD组Siahl和Siah2蛋白质与mRNA的表达均有升高，与对照组比较差异有统计学意义。直线相关分析表明，Siam、Siah2蛋白质与HIFs—α蛋白质呈正相关。结论COPD患者中Siahl与Siah2可能通过泛素-蛋白酶体途径在转录后水平对PHDs的蛋白稳定性进行调节，间接对HIFs起正调控作用。
- 蒋永亮潘坤戴爱国
- 关键词：低氧诱导因子高血压肺性
- 大鼠肺动脉平滑肌细胞原代培养及低氧对缺氧诱导因子-1α的影响被引量：1
- 2011年
- 目的获得活力稳定、高度纯化的体外培养大鼠血管平滑肌细胞,为肿瘤研究提供实验材料;并探讨低氧对抗肿瘤药物研究新靶点:缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。方法无菌下取SD大鼠心肺组织,然后分离出肺动脉段,分离肺动脉中膜层,用组织块贴壁法培养,倒置相差显微镜观察细胞形态、普通免疫组织化学法(SP法)进行细胞鉴定。随后,将体外培养的大鼠PASMCs,设计常氧组、低氧组H2,H6,H12,H24,用Western blotting法检测HIF-1α的蛋白表达。结果用组织贴块法成功培养大鼠PASMCs,得到生长稳定、纯度高的PASMCs,且培养与纯化可以同时进行,可获得稳定传代的细胞;HIF-1α蛋白在常氧组有少量表达,在低氧条件下,其表达明显增加。结论成功建立体外大鼠肺动脉平滑肌细胞原代培养模型;低氧条件下促进其中HIF-1α的表达;这提示HIF-1α蛋白的表达可能是肿瘤细胞适应缺氧环境的重要原因。
- 李广戴爱国
- 关键词：平滑肌细胞肿瘤缺氧诱导因子-1Α
- 慢性阻塞性肺疾病患者肺小血管低氧诱导因子1α与其羟化酶表达被引量：13
- 2012年
- 目的:通过观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺小动脉内低氧诱导因子α亚基(HIF-1α)及HIF脯氨酸羟化酶(PHD)、HIF抑制因子的表达,探讨其在肺血管重塑中的可能作用。方法:选因肺肿瘤行肺叶切除者,COPD组(12例),对照组(14例)。取2组患者的肺组织,原位杂交和免疫组化检测HIF-1α、PHD1、PHD2、PHD3、FIH的mRNA及蛋白表达水平。观察并计算肺小动脉管壁厚度(PAMT)及肺小动脉管壁面积与血管总面积的比值(WA%)。结果:①COPD组PAMT(40μm±5μm)、WA%(50%±9%)均较对照组(分别为(31μm±4μm,39%±6%)高(均P<0.01);②COPD组肺小血管HIF-1αmRNA和蛋白表达(吸光度(A)值)(0.230±0.036,0.275±0.039)较对照组(0.174±0.029,0.102±0.015)增强(均P<0.01),蛋白质表达增高更明显。COPD组肺小血管PHD1 mRNA表达(0.180±0.030)与对照组(0.191±0.029)比无明显改变(P>0.05)。COPD组PHD2、PHD3 mRNA表达(0.245±0.044,0.252±0.023)较对照组(0.182±0.028,0.127±0.017)明显增高(均P<0.01)。PHD1蛋白质表达(0.104±0.015)较对照组(0.209±0.023)降低(P<0.01)。PHD2蛋白质表达(0.274±0.044)较对照组(0.219±0.043)增高(P<0.01)。PHD3蛋白质表达(0.161±0.023)较对照组(0.146±0.021)略增高,但差异无统计学意义(P>0.05)。两组间FIHmRNA和蛋白质表达差异均无显著性(P>0.05);③相关分析表明HIF-1α蛋白质水平与WA%,PAMT及PHD2、PHD3 mRNA及PHD2蛋白质呈正相关,与PHD1蛋白质呈负相关。结论:PHDs可能通过调节HIF-1α表达参与COPD患者的肺血管重塑。
- 陈云荣戴爱国胡瑞成孔春初
- 关键词：缺氧诱导因子1,Α亚基肺血管重塑
- 低氧性肺动脉高压大鼠肺小动脉Siah1的表达变化及意义被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺小动脉Siah1的动态表达变化及作用。方法:40只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组和低氧3d、7d、14d、21d组,每组8只,常压间断低氧复制HPH大鼠模型。测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥大指数(RVHI)、血管形态学指标;原位杂交、RT-PCR检测肺内Siah1mRNA表达,免疫组化、Westernblot检测其蛋白质水平。结果:①低氧7d后,肺小动脉出现血管重塑,且mPAP明显上升;低氧14d后,肺小动脉重塑更明显,mPAP达高峰。RVHI在低氧14d后明显增加。②Siah1mRNA在对照组肺小动脉壁呈弱阳性表达,低氧7d后显著增高,低氧14d后达高峰,低氧21d后下降但仍高于对照组。免疫组化显示,Siah1蛋白在对照组肺小动脉壁呈弱阳性表达,低氧7d后显著增高,低氧14d后达高峰,低氧21d后下降但仍高于对照组。③大鼠肺小动脉壁Siah1蛋白与Siah1mRNA呈正相关;Siah1mRNA、Siah1蛋白与mPAP、重塑指数、RVHI均呈正相关。结论:慢性低氧诱导肺小动脉壁Siah1表达增加,进而在HPH发病过程中发挥一定的作用。
- 符代炎戴爱国潘坤胡瑞成陈云荣朱黎明
- 关键词：低氧高血压肺性
- ING4、PHDs以及HIF-1α在低氧性肺动脉高压大鼠中的表达变化被引量：4
- 2014年
- 目的研究大鼠低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension,HPH)模型中ING4表达变化的规律及其与PHDs、HIF-1α间的相互关系。方法实验复制HPH大鼠模型,在缺氧不同时间点,测定大鼠平均肺动脉压(mPAP)及右心室肥大指数(RVHI),HE染色观察肺小动脉重塑(HPVR)。原位杂交、RT-PCR、检测肺内ING4、PHD1、PHD2、PHD3及HIF-1α的mRNA表达水平及部位,免疫组化、Western blot检测以上蛋白质表达水平及部位。结果 (1)缺氧7d后大鼠的mPAP开始上升,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),缺氧14d后出现肺血管重塑和RVHI增加,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。HIF-1α蛋白在缺氧3d组表达均开始升高(P<0.05,与对照组比),缺氧7d达高峰,14d和21d稍下降。HIF-1αmRNA在缺氧14d后表达略增高(与对照组比较P<0.05)。(2)对照组PHD1蛋白质呈阳性表达,缺氧14d下降,缺氧21d保持较低水平。PHD1mRNA表达差异无显著性。对照组PHD2蛋白质和mRNA呈阳性表达,缺氧3d增高,缺氧14d达高峰,缺氧21d保持较高水平。对照组PHD3蛋白质呈弱阳性表达,缺氧3d明显增高,缺氧7d保持高水平,缺氧14d和21d下降。对照组肺小血管PHD3mRNA缺氧3d后迅速增高,缺氧14d达高峰,缺氧21d保持高水平。(3)对照组ING4蛋白质呈弱阳性表达,缺氧3d和7d后表达增高,缺氧14d达高峰,缺氧21d稍有下降。对照组ING4mRNA呈阳性表达,缺氧7d组比表达显著增高,直线相关分析表明,在缺氧组大鼠中ING4蛋白质与HIF-1α蛋白质及mPAP、RVHI、WA%负相关。结论肺动脉高压大鼠模型中ING4、PHDs和HIF-1α的表达变化,可能在HPH的发生和发展中发挥作用。
- 蒋永亮聂金刘蕾戴爱国
- 关键词：ING4缺氧
