河南省教育厅自然科学基金(2010A180017)
- 作品数：3 被引量：19H指数：3
- 相关作者：柯涛袁伟惠丰立陈长路刘征更多>>
- 相关机构：河南师范大学南阳师范学院湖北大学更多>>
- 发文基金：河南省教育厅自然科学基金河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 均匀设计法优化廉价型牛凝乳酶工程菌发酵培养基被引量：5
- 2011年
- 为了获得生产用廉价型牛凝乳酶工程菌发酵培养基,通过单因素试验考察发酵培养基中各组分对产酶的影响。结果显示:葡萄糖、玉米浆、酵母提取物、尿素质量浓度对产酶影响显著。以上述因素作为随机因子,进行均匀设计试验,采用逐步回归方法对试验结果进行分析。结果表明:在葡萄糖45g/L、玉米浆17g/L、酵母提取物6g/L、尿素12g/L的条件下,凝乳酶活性达342.86SU/mL,比优化前提高了1.22倍。所得培养基为重组牛凝乳酶的高效低成本生产提供了参考。
- 袁伟惠丰立柯涛程民杰赵金梅
- 关键词：凝乳酶工程菌均匀设计培养基
- 牛凝乳酶原基因的合成及其在乳酸克鲁维酵母中的表达被引量：7
- 2010年
- 凝乳酶在奶酪加工中应用广泛,为获得高活性的凝乳酶制剂,采用乳酸克鲁维酵母为宿主,首次对经密码子优化的牛凝乳酶原基因进行表达。利用DNAWorks3.0软件辅助设计,用两步PCR法合成了小牛凝乳酶原基因(GenBank Accession No.AA30448)。将该基因插入酵母表达载体pKLAC1,构建了重组载体pKLAC1-Prochy,并用电脉冲法将线性化的重组质粒转化到乳酸克鲁维酵母GG799中。通过含1%酪蛋白的YEPD平板活性筛选,PCR鉴定,最后获得了一株多拷贝整合的基因工程菌chy1。该菌株可分泌表达牛凝乳酶原,经SDS-PAGE分析,证明重组牛凝乳酶原的分子量约为41kDa,符合预期大小,酸化处理后为36kDa,证明可以正确自我剪切。液体培养96h后,酶活最高达到99.67SU/mL。分别以半乳糖和葡萄糖为碳源的条件下表达,其酶活性差异不大,说明在发酵期间,可以不经过半乳糖诱导即可产生高水平的牛凝乳酶原产物。该工程菌的获得为进一步优化产酶条件及放大工艺提供了条件,并为凝乳酶的工业化生产奠定了基础。
- 袁伟柯涛杜敏华褚学英胡凡惠丰立
- 关键词：乳酸克鲁维酵母基因合成密码子优化
- 活性红BF-3BN脱色菌群的构建及特性研究被引量：7
- 2011年
- 采用梯度压力式驯化法,从河南某印染厂的活性污泥中富集筛选一组活性红BF-3BN高效脱色菌群AR1。经菌株分离和16S rDNA测序分析,确定菌群内微生物分别归属Clostridium sp.、Pseudomonas sp.和Shewanella sp.等3个属。染料脱色实验结果表明,在活性红BF-3BN起始浓度为200 mg/L的脱色培养基中,菌群AR1脱色的适宜pH 5～10,温度25～35℃,时间24 h,能达到95%以上的最大脱色率。该菌群对高浓度活性红BF-3BN有较好的脱色效果,当活性红BF-3BN浓度低于500 mg/L时,脱色率高于90%,即使在含有600 mg/L活性红BF-3BN的脱色培养基中,脱色率仍然能达到80%以上。
- 惠丰立牛秋红刘征柯涛陈长路袁伟
- 关键词：菌群
