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阻塞性胆汁淤积大鼠肝细胞MRP3与Lrh-1蛋白表达的关系被引量：5: 2008年; 目的通过建立梗阻性黄疸动物模型,在蛋白水平观察多耐药相关蛋白MRP3(multidrug resistance-associated protein3,MRP3)和核受体Lrh-1(liver receptor homologue-1)表达变化并分析二者之间的关系。方法胆总管结扎术法制备大鼠梗阻性黄疸模型,检测肝功能;提取大鼠肝细胞膜蛋白与核蛋白,测定提取液蛋白浓度;采用Western blot技术检测MRP3和Lrh-1蛋白表达。结果梗阻性黄疸大鼠总胆红素、直接胆红素显著升高,白蛋白显著降低;与假手术对照组相比,梗阻性黄疸组大鼠肝细胞MRP3和Lrh-1蛋白表达明显升高(P值分别为0.027和0.046),差异有统计学意义。结论MRP3表达上调可能与Lrh-1激活有关,Lrh-1蛋白可能对MRP3蛋白表达有正性调控作用。; 吴晓平柴进何宇王槐志夏锋陈文生; 关键词：核受体阻塞性胆汁淤积大鼠模型

阻塞性肝胆汁淤积下转录因子NR5A2和SP1、胆酸转运蛋白MRP3与肝脏损伤的相关性被引量：7: 2012年; 目的研究阻塞性胆汁淤积下肝脏中转录因子NR5A2、SP1表达是否上调,以及其表达上调与胆酸转运蛋白MRP3基因的表达是否密切相关;MRP3表达上调是否具有减轻阻塞性胆汁淤积肝脏损伤的作用。方法收集阻塞性胆汁淤积组(胆结石或肝内胆管结石引起的黄疸患者手术切除的肝脏)和正常对照组(排除肝脏疾病的活检肝组织及肝转移癌无黄疸的患者肝脏)肝脏样品各15例。采用半定量PCR和免疫荧光方法检测NR5A2、SP1基因的表达,利用独立样品t检验和线性回归分析阻塞性胆汁淤积肝组织样品中MRP3 mRNA表达上调是否与NR5A2或SP1呈正相关,以及MRP3表达上调与反映肝脏损伤的指标ALT、AST是否存在负相关性。HE染色观察胆汁淤积组肝细胞坏死程度和MRP3蛋白表达高低的关系。结果阻塞性胆汁淤积肝脏中NR5A2和SP1 mRNA表达显著上调,其中NR5A2 mRNA增高3.7倍(P<0.01),SP1 mRNA上升3.2倍(P<0.01)。免疫荧光结果表明,阻塞性胆汁淤积组NR5A2和SP1蛋白表达也显著增加,NR5A2或SP1蛋白与胆酸转运蛋白MRP3 mRNA表达呈显著正相关(分别为r2=0.47,P<0.05和r2=0.51,P<0.01);MRP3蛋白表达与肝细胞坏死程度存在密切相关,并且MRP3蛋白表达量与ALT和AST均呈显著负相关(分别为r2=0.52,P<0.01和r2=0.39,P<0.05)。结论人阻塞性胆汁淤积下NR5A2和SP1表达上调,可诱导胆酸转运蛋白MRP3的表达,而MRP3表达上调可能有减轻肝脏损伤的作用。; 何孝崇柴进何宇王槐志陈文生; 关键词：转录因子 SP1 MRP3 胆汁淤积

鹅去氧胆酸和苯巴比妥对HepG2细胞MRP3与核受体RXRα蛋白表达的影响被引量：1: 2006年; 目的通过诱导剂刺激体外培养的人肝癌细胞HepG2,观察多耐药相关蛋白MRP3(mu ltidrug resistance-assoc iatedprote in 3,MRP3)和核受体RXRα(retinoid-X receptor alpha,RXRα)蛋白的表达变化。方法用鹅去氧胆酸(chenodeoxycholic ac id,CDCA)或苯巴比妥(phenobarb ital,PB)分别刺激培养的肝癌细胞HepG2后,抽提HepG2细胞总蛋白和核蛋白,W estern b lot方法检测MRP3和RXRα蛋白表达水平的变化。结果CDCA和PB可诱导HepG2细胞膜MRP3蛋白表达增高,并抑制细胞核受体RXRα蛋白表达。结论HepG2细胞中膜转运蛋白MRP3表达的上调可能与核受体RXRα表达抑制相关。; 李琼陈文生罗东林房殿春; 关键词：MRP3 HEPG2细胞

阻塞性胆汁淤积大鼠肝细胞膜蛋白MRP3与核受体RXRα蛋白表达关系的研究被引量：9: 2006年; 目的通过体外细胞培养和建立大鼠胆管结扎(b ile duct ligation,BDL)所致阻塞性胆汁淤积动物模型,在蛋白水平观察多耐药相关蛋白MRP3(mu ltidrug resistance-assoc iated prote in 3,MRP3)和核受体RXRα(retinoid-X receptor al-pha,RXRα)表达的关系。方法用鹅去氧胆酸(chenodeoxycholic ac id,CDCA)或苯巴比妥(phenobarb ital,PB)分别刺激培养的肝癌细胞HepG2并建立DBL阻塞性胆汁淤积大鼠模型后,分别抽提HepG2细胞总蛋白、核蛋白和大鼠肝脏细胞膜蛋白和核蛋白,W estern b lot方法检测MRP3和RXRα蛋白表达水平的变化。结果在细胞水平,CDCA和PB可诱导HepG2细胞膜MRP3蛋白表达增高,并抑制细胞核RXRα蛋白表达;在动物体内,BDL大鼠肝脏MRP3明显增加,同时RXRα表达明显下降。结论肝细胞膜蛋白MRP3表达的上调可能与核受体RXRα表达抑制有关。; 李琼陈文生罗东林肖天利房殿春; 关键词：MRP3 HEPG2细胞

核受体PXR对人结肠癌细胞增殖和化疗敏感性的影响被引量：3: 2009年; 目的:探讨核受体PXR在结肠癌细胞增殖和化疗敏感性中的作用。方法:分别用RT-PCR和westernblot方法检测PXR在人结肠癌细胞株LS174T、LOVO、HT29、HCT116中的表达情况。通过质粒稳定转染方法建立PXR敲低的细胞株。用MTT方法分析利福平活化PXR或稳定转染敲低PXR后,细胞增殖和化疗敏感性的改变。结果:在结肠癌细胞株LS174T、LOVO、HT29、HCT116中,LS174T细胞的PXR表达水平最高。利福平处理后,LS174T细胞中PXR表达增强。利福平活化PXR或稳定转染敲低PXR后,相应地促进或抑制细胞增殖,降低或提高细胞对化疗药物的敏感性。结论:PXR能促进结肠癌细胞增殖,提高细胞对化疗药物的敏感性,可能在结肠癌多药耐药机制中具有重要作用。; 江恒陈文生陈克力何建明梁后杰; 关键词：结肠癌核受体孕烷X受体细胞增殖耐药

核受体PXR与耐药相关基因在结肠癌中的表达及意义被引量：2: 2010年; 目的检测核受体PXR和耐药相关基因在人结肠癌中表达,初步探讨其相互关系在肿瘤免疫和肿瘤耐药中意义。方法分别用RT-PCR和western blot方法检测PXR、MRP2、MRP3、ABCG2、MDR1和CYP3A4在17例结肠癌组织中的表达,并进行半定量统计分析。结果与相应正常组织相比,结肠癌组织中PXR、MRP2和MRP3 mRNA水平和蛋白水平均显著增强(P<0.05)。而结肠癌组织中ABCG2、MDR1和CYP3A4 mRNA水平与相应正常组织相比没有显著差异。在癌组织和正常组织中,MRP3 mRNA水平与PXR mRNA水平呈正相关性(P<0.05)。结论 PXR、MRP2和MRP3可能在结肠癌耐药中具有重要作用,PXR调控MRP3表达可能涉及其耐药机制。; 江恒陈克力何建明欧娟娟童晶涛陈文生梁后杰; 关键词：结肠癌核受体孕烷X受体耐药

代谢性核受体在结肠癌中的表达及意义被引量：1: 2009年; 目的初步探讨代谢性核受体在人结肠癌组织中的表达及意义。方法分别用RT-PCR和Western blot检测维甲酸受体α(RARα)、孕烷X受体(PXR)、维生素D受体(VDR)、过氧化物酶体增殖体激活受体α(PPARα)和法尼酯衍生物X受体(FXR)在17例结肠癌组织中的表达,并进行半定量统计分析。结果与相应正常组织比较,除FXR外,结肠癌组织中RARα、PXR、VDR和PPARαmRNA水平均显著上调,差异有统计学意义(P<0.05);而结肠癌组织RARα和PXR蛋白表达水平也显著高于相应正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论结肠癌中RARα、PXR、VDR和PPARα表达上调可能与结肠癌发生发展相关。; 江恒陈克力何建明陈文生梁后杰; 关键词：结肠癌代谢性核受体

阻塞性胆汁淤积大鼠肝脏胆固醇7α-羟化酶和核受体FXR、SHP表达变化被引量：3: 2009年; 目的:通过建立梗阻性黄疸动物模型,观察胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7alpha-hydroxylase,CYP7A1)、类法尼醇X受体(farnesoid Xreceptor,FXR)及小异源二聚体伴侣受体(small heterodi mer partner,SHP)的表达变化,并分析CYP7A1和FXR、SHP之间的关系。方法:采用胆总管结扎术制备大鼠梗阻性黄疸模型,分别于术后1、3、14 d麻醉后放血处死。取大鼠肝脏,抽提总RNA,采用实时定量RT-PCR检测CYP7A1 mRNA表达;提取肝细胞核蛋白,采用蛋白质印迹技术检测FXR和SHP蛋白表达。结果:与假手术对照组相比,梗阻性黄疸组大鼠肝细胞CYP7A1 mRNA表达明显增强,FXR和SHP蛋白表达同步降低,差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.05)。结论:CYP7A1表达增强可能与FXR、SHP表达减弱有关。; 吴晓平柴进陈文生; 关键词：胆固醇7Α-羟化酶阻塞性黄疸

梗阻性黄疸大鼠肝细胞MRP2和FXR蛋白表达变化及意义分析被引量：9: 2008年; 目的通过建立梗阻性黄疸动物模型,在蛋白水平观察多耐药相关蛋白MRP2(mu ltidrug resistance-assoc iated prote in2,MRP2)和类法尼醇X受体FXR(farnesoid X receptor)表达变化并分析二者之间的关系。方法用胆总管结扎术方法制备大鼠梗阻性黄疸模型,检测肝功能;提取大鼠肝细胞膜蛋白与核蛋白,测定提取液蛋白浓度;采用W estern b lot技术检测MRP2和FXR蛋白表达。结果梗阻性黄疸大鼠总胆红素、直接胆红素显著升高;与假手术对照组相比,梗阻性黄疸组大鼠肝细胞MRP2蛋白表达明显降低(P=0.041),FXR蛋白无表达,差异均有统计学意义。结论MRP2表达下调可能与FXR表达抑制有关,FXR蛋白可能对MRP2蛋白表达有正性调控作用。; 吴晓平柴进何宇王槐志夏锋陈文生; 关键词：MRP2 FXR 肝细胞

熊脱氧胆酸和利福平诱导HepG2细胞核受体FTF和膜转运蛋白MRP3的表达被引量：1: 2009年; 目的体外细胞培养观察利胆药物熊脱氧胆酸(ursodeoxycholic acid,UDCA)及其衍生物牛磺熊脱氧胆酸(tauroursdeoxycholic acid,TUDCA)或利福平(rifampicin,Rif)对多耐药相关蛋白3(multidrug resistance-associate protein 3,MRP3)及其核受体FTF(fetoprotein transcription factor)表达的影响。方法用UDCA及其衍生物TUDCA或Rif分别刺激培养的肝癌细胞HepG2后,抽提HepG2的总RNA与细胞总膜蛋白、核蛋白,分别用Quantitative real-time PCR和Westernblot检测MRP3和FTF mRNA与蛋白水平表达的变化。结果UDCA及其衍生物TUDCA与Rif均可诱导HepG2细胞内核受体FTF表达增高,同时MRP3 mRNA和蛋白水平表达也相应增高。结论UDCA及其衍生物TUDCA和Rif刺激肝癌细胞HepG2细胞膜转运蛋白MRP3表达上调可能与核受体FTF途径相关。; 柴进吴晓平夏锋何宇王槐志肖天利陈文生; 关键词：UDCA MRP3 肝癌细胞HEPG2

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