国家自然科学基金(30570833)
- 作品数：9 被引量：20H指数：3
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- 细胞密度调节结肠癌细胞整合素ανβ6表达——癌细胞永生化侵袭生长机制的研究
- 2008年
- 目的:探讨细胞高密度和细胞挤压状态对结肠癌细胞表面整合素ανβ6表达的影响效果,探讨结肠癌细胞永生化侵袭生长的机制。方法:用流式细胞术检测结肠癌细胞系WiDr、SW480细胞株和人正常角质细胞系HaCaT细胞株,在高低密度培养条件下各细胞表面的ανβ6表达水平;同时将100例结肠癌标本高细胞密度易侵袭的肿瘤边缘部分及低细胞密度的肿瘤中心部分制作成200点的组织芯片,用免疫组织化学方法检测整合素ανβ6在结肠癌不同部位的分布和表达差异。结果:表达ανβ6的结肠癌细胞出现细胞密度依赖的ανβ6表达增加,而缺乏ανβ6表达的癌细胞和正常角质细胞系HaCaT细胞在高低密度培养条件下ανβ6表达没有改变。组织芯片免疫组织化学检查结果显示结肠癌ανβ6阳性表达率为38%,在癌细胞密度高、细胞拥挤的肿瘤边缘部分ανβ6高表达占73.7%(28/38),且ανβ6密布于肿瘤侵袭边缘,而肿瘤中央组织以ανβ6低表达为主,高表达仅占28.9%(11/38)。结论:细胞高密度和细胞挤压状态诱导癌细胞ανβ6表达可能是构成结肠癌细胞永生化侵袭性生长的基础。
- 杨广运徐克森潘忠清齐桂苓陈融王金申寿楠海牛军
- 关键词：结肠肿瘤整合素ΑVΒ6细胞密度流式细胞术
- 结肠癌细胞中整合素αvβ6-ERK直接连接通路的研究
- 2007年
- 目的证实结肠癌细胞中整合素αvβ6与细胞外信号调节激酶(ERK)之间存在直接连接。方法应用联合免疫沉淀的方法,观察整合素αvβ免疫耗竭对细胞中ERK的影响,以及ERK免疫耗竭对整合素αvβ6的影响。结果整合素αvβ6和ERK之间存在相互依存的关系,即免疫耗竭整合素αvβ6后,细胞溶液中的ERK明显减少;而免疫耗竭ERK后,细胞溶液中整合素αvβ6也显著降低。结论整合素αvβ6和ERK之间存在着直接的连接,这一直接连接为肿瘤的生长提供了一个重要的信号调节通路。
- 高颖张朝阳王金申徐克森牛军
- 关键词：结肠肿瘤整合素细胞外信号调节激酶
- αvβ6整合素对氟尿嘧啶诱导的结肠癌细胞凋亡的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨αvβ6整合素介导的细胞与细胞外基质的黏附,及其对氟尿嘧啶诱导的结肠癌细胞凋亡的影响。方法:采用流式细胞仪测定结肠癌细胞株HT-29和WiDr细胞αvβ6整合素的表达,并应用酶联免疫吸附实验(ELISA)及丫啶橙(AO)-溴化乙啶(EB)双荧光染色方法检测细胞凋亡。结果:HT-29细胞、WiDr细胞均表达αvβ6整合素,表达率分别为80.82%及82.96%。氟尿嘧啶诱导结肠癌HT-29和WiDr细胞凋亡。经氟尿嘧啶(20mg/L)作用48h后,酶联免疫吸附实验结果显示,生长于αvβ6整合素配体-纤黏连蛋白(FN)上的HT-29细胞、WiDr细胞的富集系数(EF)分别为1.11±0.04、1.09±0.02,明显低于生长于非整合素配体-多聚赖氨酸(polylisin)上的细胞分别为3.68±0.03、3.72±0.02,P<0.01;用αvβ6整合素的特异性单抗封闭后再生长于FN上时,HT-29、WiDr细胞的EF分别为2.12±0.04、2.14±0.03,明显高于直接生长于FN上(P<0.01)。AO-EB双荧光染色法结果显示,生长于FN上的HT-29和WiDr细胞凋亡率分别为(5.6±1.1)%、(5.3±0.7)%,明显低于生长于polylisin上的细胞的凋亡率(37.0±1.4)%、(38.5±0.9)%,P<0.01;用αvβ6整合素的特异性单抗封闭后再生长于FN上,细胞凋亡率分别为(19.5±1.2)%、(20.0±0.7)%,又有明显提高(P<0.01)。结论:结肠癌细胞株HT-29和WiDr细胞表达αvβ6整合素,αvβ6整合素介导的细胞与FN的黏附抑制氟尿嘧啶诱导的结肠癌细胞凋亡。提示细胞黏附可能通过抑制细胞凋亡而促使细胞产生耐药性。
- 张琦陈融牛军
- 关键词：整合素类结肠肿瘤氟尿嘧啶细胞凋亡抗药性
- 反义整合素β6基因对结肠癌细胞作用的研究被引量：4
- 2007年
- 目的研究反义整合素β6基因对结肠癌细胞生长增殖的作用。方法先构建反义β6基因的表达载体,然后转染结肠癌细胞,使其稳定表达。应用 RT-PCR 检测细胞中β6mRNA 的表达量;应用流式细胞技术检测细胞表面β6蛋白的表达量;检测分析各组细胞与纤连蛋白结合力的改变;检测分析各组细胞增殖能力的改变;将转染细胞及正常细胞分别种植于裸鼠皮下,观察细胞的成瘤能力。将实验组与对照组的检测结果进行比较。结果与对照组相比,转染了反义β6基因的结肠癌细胞,其β6mRNA 的量及细胞表面β6蛋白的表达量(30%)均明显减少(P<0.01);其与纤连蛋白的结合力降低;其生长及增殖的能力较对照组细胞明显减弱;其在裸鼠皮下的成瘤能力明显减弱(P<0.01)。结论反义β6基因可以在转录和翻译水平明显抑制β6基因的表达,从而抑制结肠癌细胞的生长增殖,证实了整合素β6对结肠癌细胞的生长增殖具有重要的调控作用。
- 张朝阳徐克森杨广运王金申高颖刘炎峰帅晶王家勇李少燕寿楠海牛军
- 关键词：结肠肿瘤
- 整合素ανβ6与MMP-9在结肠癌组织中的表达及其相关性研究被引量：2
- 2009年
- 目的:研究结肠癌组织中整合素ανβ6与基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测80例结肠癌及切缘正常组织中整合素ανβ6与MMP-9的表达并分析二者与结肠癌临床病理因素之间关系。结果:结肠癌组织中整合素ανβ6、MMP-9阳性率明显高于切缘结肠组织(P<0.01),且与结肠癌的分化程度、Dukes分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结肠癌组织中整合素ανβ6与MMP-9表达呈正相关(r=0.892,P<0.01)。结论:检测整合素ανβ6与MMP-9在结肠癌组织中表达情况,可作为结肠癌预后评估指标之一;针对二者进行相关靶向研究可能为治疗结肠癌提供新途径。
- 刘恩宇彭程宋炜牛卫博王加勇赵传宗贺兆斌牛军
- 关键词：结肠肿瘤整合素类基质金属蛋白酶9
- 整合素αvβ6与肿瘤关系的研究进展被引量：3
- 2008年
- 整合素αvβ6是由α、β亚单位以非共价键结合组成的跨膜异二聚体,只表达于恶性上皮性肿瘤组织而健康组织及良性肿瘤组织无表达。目前研究发现,整合素αvβ6参与多种信号传导通路,在多种肿瘤的发生发展、侵袭转移过程中发挥重要作用。对整合素αvβ6的深入研究为恶性肿瘤的诊治提供一条新的思路。
- 王加勇徐克森牛军
- 关键词：肿瘤信号传导
- 细胞密度对结肠癌细胞整合素αγβ6表达和基质金属蛋白酶9分泌的影响
- 2008年
- 目的探讨细胞密度对结肠癌细胞整合素αγβ6表达和基质金属蛋白酶9（MMP-9）分泌的影响。方法用流式细胞仪检测结肠癌细胞系WiDr和人正常角质细胞系HaCaT细胞株在高、低细胞密度培养条件下αγβ6表达的情况；用Biotrak MMP-9测定仪和明胶酶谱法分别测定不同的结肠癌细胞WiDr和SW480细胞株在高、低密度培养条件下MMP-9的活性和分泌水平。结果表达αγβ6的结肠癌WiDr细胞出现细胞密度依赖的αγβ6表达增加，而正常角质细胞系HaCaT细胞在高、低密度培养条件下αγβ6表达无改变。Biotrak MMP-9活性分析显示，每个表达αγβ6的WiDr细胞和SW480 β6细胞的MMP-9分泌量在高密度培养条件下分别是（3．3±1．2）×10^-7ng和（27．24-3．0）×10^-7ng，在低密度培养条件下分别足（1．8±0．7）×10^-7ng和（10．9±2．0）×10^-7ng，而每个缺乏αγβ6表达的SW480 wild细胞在高、低细胞密度培养条件下分别是（3．9±1．7）×10^-7ng和（3．8±0．7）×10^-7ng，MMP-9分泌水平无明显变化（t=0．47，P〉0．05）。明胶酶谱分析显示SW480 β6细胞的MMP-9活性水平在高密度培养时比低密度培养明显增加，而SWd80 wild和HaCaT细胞的MMP-9活性水平无明显改变。结论细胞高密度诱导结肠癌细胞αγβ6表达，促进MMP-9的分泌，构成了癌细胞永牛化侵袭浸润性牛长的基础。
- 杨广运徐克森潘忠清齐桂苓寿楠海牛军
- 关键词：整合素类基质金属蛋白酶类细胞计数
- αvβ6整合素与肿瘤关系的研究进展被引量：2
- 2008年
- 目的:总结国内外关于αvβ6整合素与肿瘤关系的研究进展。方法:应用Medline和CNKI期刊全文数据库检索系统,以"αvβ6整合素"和"肿瘤"为关键词,检索1992-01-2008-05相关αvβ6整合素的文献174篇,其中英文文献172篇,中文文献2篇。纳入标准:1)αvβ6整合素的结构和功能;2)αvβ6在恶性肿瘤中的表达情况;3)αvβ6促进肿瘤进展的分子机制;4)以αvβ6为靶点的肿瘤靶向研究。根据纳入标准,精选73篇文献,最后纳入分析29篇文献。结果:αvβ6作为一类上皮限制性的特殊整合素亚型,在多种上皮源性恶性肿瘤中诱导表达,通过促进肿瘤细胞迁移、参与细胞外基质降解、激活细胞因子TGF-β1以及抑制肿瘤细胞凋亡等途径促进肿瘤侵袭和转移。结论:深入研究αvβ6在恶性肿瘤中的表达及功能,有助于进一步理解肿瘤侵袭和转移的分子机制,有望在肿瘤的靶向治疗方面取得新的突破。
- 牛卫博牛军徐克森
- 关键词：整合素类肿瘤
- 整合素ανβ6-ERK2直接通路调控MMP-9分泌与结肠癌转移关系的实验研究被引量：8
- 2007年
- 目的 探讨在结肠癌细胞中整合素ανβ6-ERK2信号直接通路对MMP-9分泌的影响，进一步探讨结肠癌转移的机制。方法 采用流式细胞仪检测各细胞表面ανβ整合素的表达，采用明胶酶谱分析法和MMP-9活性检测法，定性定量分析不同结肠癌细胞在TCM中MMP-9的分泌水平。结果 WiDr MOCK，HT29MOCK细胞表面β6表达量明显高于WiDrA／Sense，HT29A／Sense细胞，且每个细胞分泌到无血清TCM中的MMP-9总量比WiDrA／Sense、HT29A／Sense细胞高2～3倍。SW480 β6 Full Length细胞分泌到TCM中的MMP-9分泌量不仅显著高于SW480MOCK细胞，而且能被MEK-1抑制剂PD98059所抑制。SW480 β6 Full Length细胞表面β6表达量和SW480 β6 Truncate细胞表面β6表达量相近，但SW480 β6 Truncate细胞在TCM中MMP-9的分泌量降低到SW480Mock细胞的分泌水平。结论 抑制β6的表达，阻滞MEK或删除β6-ERK2的连接位点均可抑制MMPO的分泌；阻断ανβ6-ERK2直接连接可降低结肠癌细胞MMPO的分泌，抑制结肠癌细胞侵袭和转移。
- 杨广运徐克森张朝阳王金申王加勇刘炎锋帅晶寿楠海牛军
- 关键词：结肠肿瘤整合素类基质金属蛋白酶类
