广东省自然科学基金(04105837)
- 作品数：20 被引量：188H指数：7
- 相关作者：张荣华杨丽蔡宇朱晓峰黄丰更多>>
- 相关机构：暨南大学暨南大学附属第一医院中山大学更多>>
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- 益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠血清PTH、CT的影响被引量：2
- 2005年
- 目的:观察益骨胶囊治疗用药对去卵巢骨质疏松大鼠血清PTH、CT的影响,以探讨益骨胶囊治疗骨质疏松症可能的作用机制。方法:48只10月龄SD雌性大鼠随机抽取12只为假手术组,剩余36只待手术造模后随机分为3组:模型组、益骨胶囊低剂量组、益骨胶囊高剂量组;以双侧卵巢切除法复制骨质疏松模型,采用放射免疫方法测定血清PTH和CT水平。结果:大鼠造模24周时血清CT水平,益骨胶囊低剂量和高剂量组均高于模型组、其中低剂量组低于假手术组、高剂量组与假手术组接近;大鼠造模24周时血清PTH水平,益骨胶囊低剂量和高剂量组均低于模型组、其中低剂量组高于假手术组、高剂量组与假手术组接近。结论:益骨胶囊高、低剂量组均能升高骨质疏松大鼠血清CT水平、降低血清PTH水平,且高剂量组疗效优于低剂量组。
- 张荣华彭勇杨丽蔡宇朱晓峰
- 关键词：益骨胶囊甲状旁腺激素降钙素
- 益骨胶囊含药血清对共育体系中成骨细胞的影响被引量：4
- 2006年
- 目的:观察益骨胶囊含药血清在成骨-破骨细胞共育体系中对SD大鼠成骨细胞(OB)增殖的量效关系。方法:(1)取1 d龄SD大鼠颅骨分离培养OB,取5 d龄SD大鼠四肢长骨分离培养破骨细胞(OC),建立上清相通但细胞间不相互混杂的平面式成骨-破骨细胞共育体系,经考马斯亮蓝法检测蛋白质弥散情况。(2)将40只10月龄SD雌性大鼠分为益骨胶囊灌胃组(高、中、低剂量)和生理盐水对照组,制备含药血清和对照血清。(3)设置含药血清组和对照组,用MTT法检测各剂量组不同浓度含药血清在共育体系中对成骨细胞增殖的影响。结果:(1)在8 h内,培养液中蛋白质可以从一侧培养室经过隔膜弥散到另一组培养室。(2)益骨胶囊含药血清高剂量组25%和30%浓度对共育体系中OB的增殖有较明显的促进作用,与其他剂量组比较有显著差异(P<0.01)。结论:(1)为成功建立成骨细胞-破骨细胞共育体系提供依据。(2)益骨胶囊含药血清能够剂量依赖性促进共育体系中成骨细胞增殖。
- 张荣华徐立群傅淑平杨丽
- 关键词：益骨胶囊含药血清共育体系量效关系
- 淫羊藿苷对大鼠间充质干细胞骨向分化过程中转化生长因子β_1、骨形态发生蛋白2表达的影响被引量：23
- 2010年
- 背景:淫羊藿苷作为补肾中药淫羊藿的主要有效成分,能够有效促进间充质干细胞向成骨细胞分化。目的:观察淫羊藿苷在诱导间充质干细胞骨向分化过程中对转化生长因子β1、骨形态发生蛋白2表达的影响,阐释其可能的诱导机制。方法:运用全骨髓贴壁法分离、纯化大鼠骨髓间充质干细胞;以20mg/L淫羊藿苷作为间充质干细胞药物干预浓度,根据干预条件的不同将实验分为:空白组、经典组(加经典成骨诱导剂)、淫羊藿苷组、淫羊藿苷+经组;ELISA法检测各组转化生长因子β1、骨形态发生蛋白2的表达。结果与结论:经典组、淫羊藿苷组、淫羊藿苷+经组转化生长因子β1、骨形态发生蛋白2值均高于空白组(P<0.05);各组第7天的转化生长因子β1值高于14,21d(P<0.01),各组不同诱导时间骨形态发生蛋白2值之间相比差异无显著性意义(P>0.05)。提示上调转化生长因子β1、骨形态发生蛋白2的表达量可能是淫羊藿苷诱导各组促进间充质干细胞骨向分化的作用机制之一。
- 杨丽张荣华朱晓峰蔡宇黄丰
- 关键词：淫羊藿苷骨髓间充质干细胞转化生长因子Β1骨形态发生蛋白2
- 益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织Ⅰ型胶原mRNA表达的影响被引量：5
- 2005年
- 目的:观察益骨胶囊治疗用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织Ⅰ型胶原mRNA表达的影响,以探讨益骨胶囊治疗骨质疏松症的可能机理。方法:36只10月龄SD雌性大鼠随机抽取12只为假手术组,剩余24只待手术造模后随机分为2组:模型组、益骨胶囊组;以双侧卵巢切除法复制骨质疏松模型;采用RT-FQ-PCR方法检测骨组织Ⅰ型胶原mRNA的表达。结果:益骨胶囊组骨组织Ⅰ型胶原mRNA表达明显高于模型组(P<0.05),与假手术组相近(P>0.05)。结论:益骨胶囊能促进骨组织Ⅰ型胶原mRNA基因表达。
- 张荣华彭勇杨丽蔡宇朱晓峰
- 关键词：益骨胶囊骨质疏松症
- 益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织cbf α-1mNRA表达的影响被引量：7
- 2008年
- 目的:分析成骨细胞分化因子cbf α-1基因在去卵巢骨质疏松(OP)大鼠的表达水平,观察益骨胶囊的调节作用。方法:将36只10月龄SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、药物组,相应干预后,留取股骨,采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR技术测定cbf α-1 mRNA表达,以GAPDH基因为内参照,根据相对定量公式(2-ΔΔCt)分别计算模型组、药物组与假手术组表达差异倍数。结果:根据相对定量公式分析显示:与假手术组相比,模型组大鼠骨组织中cbf α-1 mRNA表达下降(P<0.01)。而药物组cbf α-1 mRNA表达相当于假手术组的0.19-0.92倍(P>0.05),明显高于模型组(P<0.05)。结论:结果表明去卵巢OP模型大鼠骨组织cbf α-1基因表达降低,而益骨胶囊可上调cbf α-1的基因表达水平,这可能与其诱导骨髓间质干细胞分化为成骨细胞发挥其防治OP的作用有关。
- 黎波张荣华
- 关键词：骨质疏松卵巢切除术CBF益骨胶囊
- TNF-α对共育体系中成骨细胞凋亡的影响及益骨胶囊含药血清的保护作用被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对成骨-破骨细胞共育体系中成骨细胞(OB)凋亡的影响及益骨胶囊含药血清的保护作用。方法:(1)将20只10月龄SD大鼠随机分为益骨胶囊灌胃组和生理盐水灌胃组,制备含药血清与空白血清;(2)将分离的OB与破骨细胞(OC)分别接种到共育体系中,加培养液培养后,同时添入20μg/L、30μg/L、40μg/L、50μg/L、60μg/LTNF-α分别作用24h、48h、72h诱导OB凋亡,用DNA电泳法确定最佳诱导方案;(3)将细胞分为TNF-α组、TNF-α+含药血清组、TNF-α+空白血清组和正常对照组,分别加入DMEM培养液、含药血清培养液、空白血清培养液、DMEM培养液,除正常对照组加入PBS外,其它各组均同时加入60μg/LTNF-α,培养72h后,用荧光染色法、DNA电泳法、流式细胞仪观察各组OB凋亡情况。结果:(1)60μg/LTNF-α作用72h后,共育体系中OBDNA电泳呈较典型的梯形改变;(2)TNF-α+含药血清组中OBDNA电泳仅出现二个条带,荧光染色可见大多数细胞均匀染色,其凋亡率(9.60%±0.26%)明显低于TNF-α组(26.90%±0.06%)与TNF-α+空白血清组(18.10%±0.06%),P<0.01。结论:60μg/LTNF-α作用72h可诱导共育体系中OB凋亡;益骨胶囊含药血清对TNF-α诱导的OB凋亡具有抑制作用。
- 傅淑平张荣华徐立群
- 关键词：肿瘤坏死因子益骨胶囊成骨细胞
- 田基黄水煎液对应激+动脉粥样硬化模型大鼠血脂、斑块炎性因子的作用研究被引量：3
- 2011年
- 目的观察田基黄水煎液对应激+动脉粥样硬化模型大鼠血脂、斑块炎性因子的影响。方法将60只Wistar雄性大鼠随机分为4组:正常对照组、模型对照组、辛伐他汀组、田基黄水煎液组,建立应激负荷下的动脉粥样硬化模型,检测各组大鼠血脂、斑块炎性因子指标的变化。结果田基黄水煎液降低应激+动脉粥样硬化模型大鼠血脂代谢紊乱水平,对斑块炎性因子hs-CRP、MCP-1、MMP-9指标降低显著。结论田基黄水煎液对应激负荷下大鼠动脉粥样硬化斑块的稳定性有改善作用。
- 胡向阳李莉莉马义
- 关键词：田基黄动脉粥样硬化应激炎性因子
- 建立大鼠骨髓间充质干细胞稳定分离培养体系与鉴定被引量：64
- 2009年
- 背景:骨髓间充质干细胞作为种子细胞在组织工程等领域应用广泛,建立稳定的分离培养体系和统一鉴定标准尤为重要。目的:以不同方法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,并进行细胞形态学观察、表面标志物鉴定及多向分化能力检测。设计、时间及地点:细胞学体外对比观察,于2005-08/12在暨南大学完成。材料:SPF级3月龄SD雌性大鼠5只,由中山大学实验动物中心提供。方法:无菌条件下分离大鼠双下肢,低糖DMEM培养液冲出骨髓,分别运用全骨髓贴壁法和密度梯度离心法体外分离骨髓间充质干细胞,利用差速贴壁原理对细胞进行纯化扩增。取生长状态良好的第3代骨髓间充质干细胞,分别加入成骨、成脂、成软骨诱导培养基,培养14d。主要观察指标:倒置相差显微镜下观察骨髓间充质干细胞的生长状态,流式细胞仪检测细胞表面标志物的表达,采用碱性磷酸酶染色鉴定成骨能力,以油红O染色鉴定成脂能力,以甲苯胺蓝染色鉴定成软骨能力。结果:与密度梯度离心法相比,全骨髓贴壁法分离获得的骨髓间充质干细胞贴壁时间短,增殖快,经传代后能够纯化。第3代骨髓间充质干细胞形态单一均匀,呈典型的极性漩涡状生长,不表达造血前体细胞标志抗原CD34和白细胞标志抗原CD45,表达整合素家族成员CD29和黏附分子CD44,经诱导后碱性磷酸酶染色、油红O染色和甲苯胺蓝染色均呈阳性。结论:采用全骨髓贴壁法可稳定获得均质性良好的大鼠骨髓间充质干细胞,效果优于密度梯度离心法。经全骨髓贴壁法体外分离培养的细胞在形态学、细胞表面标志物表达和多向分化能力方面具有干细胞生物学特性,经鉴定为大鼠骨髓间充质干细胞。
- 杨丽张荣华谢厚杰蔡宇黄丰
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织TGF-β_1mRNA表达的影响被引量：8
- 2005年
- 目的:观察益骨胶囊预防和治疗用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织TGF- β1mRNA基因表达的影响,在分子水平上阐明益骨胶囊防治骨质疏松症的可能作用机制。方法:从72只10月龄SD雌性大鼠中随机抽取24只为假手术A和B组,余48只待手术造模后随机分为4组:模型A组、模型B组、预防组、治疗组,每组12只;以双侧卵巢切除法复制骨质疏松模型;预防各组均在手术后3天即开始灌胃,假A组、模A组灌胃NS3ml、预防组灌胃益骨胶囊水溶液3ml,每天1次,共24周;治疗各组均在手术后第13周即开始灌胃,假B组、模B组灌胃NS3ml、治疗组灌胃益骨胶囊水溶液3ml,每天1次,共12周。FQ- PCR方法检测骨组织TGF- β1mRNA基因表达。结果:大鼠造模24周时,益骨胶囊预防组和治疗组骨组织TGF- β1mRNA基因表达均明显高于模型组,与假手术组相近。结论:益骨胶囊能促进骨组织TGF- βmRNA基因表达。
- 张荣华杨丽朱晓峰蔡宇黄丰
- 关键词：益骨胶囊大鼠骨组织去卵巢SD雌性大鼠双侧卵巢切除法
- 益骨胶囊含药血清对共育体系中破骨细胞活性和凋亡的影响被引量：6
- 2006年
- 目的:观察益骨胶囊含药血清在成骨-破骨细胞共育体系中对SD大鼠破骨细胞(OC)活性和凋亡的影响。方法:(1)取1d龄SD大鼠颅骨分离培养成骨细胞(OB),取5d龄SD大鼠四肢股骨、胫骨分离培养OC,建立细胞上清相通但细胞间不相互混杂的平面式成骨-破骨细胞共育体系,实验分为含药血清组和对照组;(2)将10月龄SD雌性大鼠分为益骨胶囊灌胃组和生理盐水对照组,制备含药血清和对照血清;(3)重氮盐法检测抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)和光镜观察骨陷窝数;(4)光镜和荧光显微镜下观察共育体系中OC凋亡情况。结果:含药血清组在48 h7、2 h9、6 h对成骨-破骨细胞共育体系中OC分泌TRACP的活性均明显降低于对照组,OC的存活数明显低于对照组,OC的凋亡率明显高于对照组且呈明显的时效关系;所形成骨吸收陷窝的数目明显低于对照组(P<0.01)。结论:益骨胶囊含药血清在共育体系中能够抑制OC活性,诱导破骨细胞的凋亡。
- 张荣华徐立群傅淑平杨丽
- 关键词：益骨胶囊破骨细胞含药血清
