国家自然科学基金(30570861)
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
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- 相关机构：复旦大学新乡医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部“211”工程更多>>
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- 细胞骨架蛋白巢蛋白在人肾足细胞中的表达及意义被引量：3
- 2008年
- 目的 检测细胞骨架蛋白巢蛋白在成人正常及病理状态肾组织中的表达，并观察其表达水平与患者尿蛋白的关系，初步探讨巢蛋白与足细胞损伤的关系。方法 正常对照肾组织（外科手术切除）6例，应用免疫组织化学（SP法）和免疫电镜检测巢蛋白的表达；病理状态肾组织：IgA肾病（无蛋白尿，电镜观察无足突融合，IgA—np）4例；IgA肾病（有蛋白尿，IgA—p）17例；膜性肾病8例；局灶性节段性肾小球硬化3例。应用免疫组织化学及即时RT-PCR的方法检测巢蛋白在肾组织中的表达并进行半定量、定量分析，与患者尿蛋白水平进行比较，分析两者之间相关关系。结果 巢蛋白表达在成人正常肾组织的足细胞初级足突中；免疫组织化学半定量及即时RT-PCR结果显示：IgA-np中巢蛋白的表达水平与正常肾组织差异无统计学意义；IgA-P、局灶性节段性肾小球硬化、膜性肾病中，巢蛋白的表达比正常肾组织显著降低（P〈0．05），并与24h尿蛋白呈负相关（r=-0．43，P〈0．05）。结论 巢蛋白在足细胞中低表达与肾小球中足细胞的损伤有关。
- 苏蔚房成杨海春顾勇郝传明
- 关键词：肾小球肾炎膜性肾小球肾炎肾小球硬化症局灶节段性
- 足细胞中巢蛋白的表达及其相互作用分子的研究被引量：9
- 2006年
- 目的观察细胞骨架蛋白巢蛋白(Nestin)在肾脏足细胞的表达及其在足细胞中的作用方式。方法免疫组化、免疫荧光、免疫电镜方法检测Nestin在人正常肾组织、体外培养的小鼠足细胞中的表达。免疫共沉淀方法检测足细胞中与巢蛋白相互作用的蛋白分子。结果在正常肾组织中巢蛋白的表达局限于肾小球。免疫电镜证实巢蛋白主要表达于足细胞胞浆及初级足突,体外培养的足细胞中也可观察到巢蛋白丝状分布于胞浆。免疫共沉淀显示足细胞中Nestin与另两种细胞骨架蛋白波形蛋白(vimentin)、α-internexin相互作用。结论巢蛋白除了表达于中枢神经干细胞、胰岛干细胞等之外,在肾脏足细胞中也有表达,并与足细胞中其他细胞骨架蛋白相互作用,共同维持其正常形态和功能。
- 苏蔚陈靖杨海春尤莉王翔申宗侯林善锬郝传明顾勇
- 关键词：细胞骨架足细胞巢蛋白免疫共沉淀
- 巢蛋白在足突广泛融合的肾小球中表达下调及与蛋白尿程度的相关性被引量：3
- 2008年
- 目的观察中间丝蛋白类的巢蛋白（nestin）在足突广泛融合的肾小球中的表达及其与足突病变动态过程和蛋白尿产生的关系。方法免疫组化法检测nestin在人正常肾组织及微小病变肾组织中的表达。构建氨基核苷嘌呤霉素肾病大鼠模型，应用免疫组化、荧光实时定量PCR、Western印迹法检测注射嘌呤霉素后第1、4、10、20天大鼠肾小球中nestin的分布与表达；电镜观察肾脏足细胞改变，测定尿蛋白量（24h）。分析nestin的变化与蛋白尿的相关性。结果免疫组化显示nestin在人类微小病变肾小球中的表达较正常组织显著下调（0．93±0．08比1．65±0．12，P〈0．05）。在嘌呤霉素损伤足细胞早期，肾小球nestin的表达曾有一过性增加（mRNA和蛋白水平分别为对照组的1．23倍和1．48倍，P〈0．05），随后持续下降。nestin的mRNA水平在嘌呤霉素注射后第4天时降至对照组的35．8％；第10天时为对照组的12．1％（均P〈0．01）；病变好转后开始上升，恢复为对照组的65．8％（P〈0．05）。Western印迹检测nestin蛋白改变也有类似的趋势，嘌呤霉素注射后第4天，nestin蛋白水平有所下降，为对照组的77．0％（P〈0．05）；至大量蛋白尿的第10天，nestin蛋白水平仅为对照组的58．0％（P〈0．05）；而随着病变的恢复，嘌呤霉素注射后第20天时nestin蛋白量恢复为对照的83．4％。Pearson相关分析结果显示，注射嘌呤霉素后nestinmRNA（r=-0．667，P〈0．05）及蛋白（r=-0．621，P〈0．05）表达与尿蛋白量（24h）均呈负相关。结论在以足突广泛融合为特征的肾脏病变中，肾小球中间丝蛋白nestin表达显著减少，并与蛋白尿程度呈负相关，提示nestin可能参与了足细胞形态和功能的维持。
- 尤莉陈靖苏蔚张敏敏朱蔚钰张力胤郝传明顾勇
- 关键词：中间丝蛋白质类肾小球蛋白尿NESTIN微小病变肾病
- 巢蛋白对维持足细胞形态作用的探讨被引量：2
- 2009年
- 目的:观察细胞骨架蛋白巢蛋白(nestin)在体外培养的小鼠足细胞中的表达及在维持足细胞形态方面的作用。方法:应用免疫荧光技术检测nestin在条件性永生的足细胞中的表达;应用RNA干扰技术抑制巢蛋白nestin在足细胞中的表达,观察足细胞形态的变化并计算nestin siRNA组和无关序列siRNA组中有足突的足细胞数量。结果:体外培养的足细胞中巢蛋白呈丝状分布于胞浆;转染nestin siRNA质粒的足细胞,足突变短或消失,而转染无关对照序列siRNA质粒的足细胞形态未见改变;无关对照组有足突的足细胞数为77.0%±6.3%,转染nestin siRNA序列质粒组有足突的细胞数为16.0%±4.6%,两组差异显著(n=3,P<0.01)。结论:巢蛋白nes-tin对于维持足细胞正常形态具有重要作用。
- 苏蔚房成杨海春陈靖顾勇郝传明
- 关键词：足细胞巢蛋白RNA干扰免疫荧光
