浙江省中医药管理局重点科研项目(2006Z002)
- 作品数：5 被引量：37H指数：4
- 相关作者：李毅卢德赵沃兴德杨贞唐利华更多>>
- 相关机构：浙江中医药大学桐庐县第一人民医院更多>>
- 发文基金：浙江省中医药管理局重点科研项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 温补肾阳药对甲状腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响被引量：11
- 2009年
- 目的:研究温补肾阳药对肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组的影响。方法:12只SD大鼠,随机分为3组,每组4只。模型组和治疗组切除两侧甲状腺,正常组做相应的假手术,但不切除甲状腺。喂养7 d后模型组和治疗组大鼠出现拱背耸毛、大便稀溏等肾阳虚的症状。从第8天开始,治疗组每天喂饲温补肾阳药1次,给药剂量6.7 g.kg-1,其他2组喂饲等体积的生理盐水,连续6 d后,断头处死3组大鼠,分离提取其肝线粒体蛋白质,分别用荧光染料Cy3,Cy5标记,每个Cy3及Cy5标记的样品与等量Cy2标记的内标混合后在同一块凝胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder 6.5软件进行差异蛋白质组分析,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。结果:双向电泳后,平均每块胶检测到997个蛋白质点,其中所有图谱共有的点有687个,并从中筛选到22个差异蛋白,其中热休克蛋白60、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物、氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ,ATP合成酶、乳铁传递蛋白、ATP酶质子通道蛋白、电子传递黄素蛋白和类钙离子激活中性蛋白酶12在肾阳虚状态下表达量均增加,而二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶、鸟氨酸转氨酶和GTP结合调节蛋白在肾阳虚状态下表达量均降低。经温补肾阳药治疗后,热休克蛋白60、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物、ATP合成酶、乳铁传递蛋白、ATP酶质子通道蛋白、电子传递黄素蛋白二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶和GTP结合调节蛋白表达量均增加,而氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ和类钙离子激活中性蛋白酶12表达量减少。结论:温补肾阳药可能通过调节物质代谢、保护线粒体膜稳定性和维护细胞内信号传导而起到治疗肾阳虚的作用。
- 卢德赵沃兴德沃立科李毅唐利华杨贞
- 关键词：蛋白质组肾阳虚温补肾阳药线粒体
- 四物汤对血虚证模型大鼠肝线粒体蛋白质组的影响被引量：10
- 2010年
- 目的探讨四物汤治疗血虚证的机理。方法Wistar大鼠随机分为模型组、治疗组、正常组各6只。模型组和治疗组大鼠在第1、4、7d皮下注射2%乙酰苯肼生理盐水注射液,第4d起模型组生理盐水灌胃,治疗组给予四物汤灌胃,正常组给予生理盐水,连用7d后,检测外周血象、肝脾湿重;提取肝脏线粒体蛋白质,用双向电泳等蛋白质组学技术测定大鼠肝线粒体中有影响的蛋白质。结果模型组大鼠出现萎靡、苍白等血虚症状,肝脾明显肿大,红细胞数和血红蛋白量明显降低,白细胞、网织红细胞计数明显升高(P<0.01);四物汤治疗后外观较快恢复,红细胞、血红蛋白、网织红细胞数较上升(P<0.01);模型大鼠肝线粒体蛋白质与正常相比有14个能量代谢相关蛋白质的水平发生改变,四物汤可使这些改变的蛋白质水平有所恢复。结论四物汤可以调节肝线粒体内一些酶和伴侣分子,清除自由基和过氧化物,稳定线粒体结构,保护线粒体功能;改善糖、脂类、蛋白质代谢,从蛋白质分子水平改善血虚动物的虚损状况。
- 龚文君沃兴德卢德赵丁慧登李毅
- 关键词：四物汤血虚证肝线粒体蛋白质组中医药疗法
- 甲亢型肾阴虚大鼠肝线粒体蛋白质组的研究被引量：11
- 2009年
- 目的:应用双向电泳技术和质谱技术研究甲亢型肾阴虚大鼠肝线粒体蛋白质组,并从肝线粒体蛋白质组角度阐述肾阴虚与能量代谢的关系。方法:双向电泳分离正常大鼠和甲状腺素造成的肾阴虚模型大鼠肝线粒体蛋白质,用银染方法染色,经扫描得到蛋白质组图谱,用ImageMaster 2D 6.0软件进行差异蛋白质组分析,筛选差异在2倍以上的蛋白质作为差异蛋白,进行质谱鉴定和生物信息学分析。结果:肾阴虚大鼠氨甲酰磷酸合酶Ⅰ、转甲状腺素蛋白D链表达量降低,短链-3-羟酰辅酶A脱氢酶、线粒体分裂蛋白1、谷胱甘肽硫转移酶Mu1、核有丝分裂器蛋白1、凋亡抑制蛋白3、热休克蛋白60、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶1β亚单位、核转录因子-kB2、BNIP1 protein、鸟氨酸转氨酶表达量均增加。结论:肾阴虚大鼠能量代谢活跃,线粒体内物质氧化分解作用加强,柠檬酸循环和氧化磷酸化加速。肾阴虚大鼠存在以NF-kB过量表达为主的免疫炎性细胞因子紊乱和凋亡抑制状态。这些发现提示肾阴虚证的发病机理和能量代谢亢进、炎性细胞因子紊乱、凋亡抑制状态有相关性。
- 沃兴德丁慧登卢德赵龚文君杨贞李毅唐利华
- 关键词：肾阴虚线粒体蛋白质组能量代谢NF-KB
- 寒凉药对热证大鼠肝线粒体蛋白质组的影响被引量：5
- 2013年
- 自20世纪60年代起,现代科学开始对热证的本质进行研究,但有关热证的病理机制和寒凉药物的作用机制等尚未深入系统研究。该研究以具有代表性的热性中药喂饲动物造成热证模型,后用寒凉药进行实验性治疗,拟采用双向电泳及质谱分析技术对热证模型大鼠及寒凉药治疗后的大鼠肝线粒体蛋白组进行比较,从中发现热证及寒凉药治疗后的特异性相关蛋白质。
- 李毅卢德赵唐利华沃兴德杨贞
- 关键词：寒凉药热证线粒体蛋白质组
- 肝肾阴虚型甲亢和脾肾阳虚型甲减患者血清蛋白质组的比较分析被引量：2
- 2012年
- [目的]通过对肝肾阴虚型甲亢和脾肾阳虚型甲减患者血清蛋白质组的分析,阐述肝肾阴虚和脾肾阳虚的物质基础。[方法]将正常人、甲亢和甲减患者血清用亲和层析法除去其中的高丰度蛋白质,再用双向电泳技术分析不同组样品蛋白质组的变化,所获的差异蛋白质用质谱进行鉴定。[结果]与正常人相比,肝肾阴虚型甲亢患者血清中RBP和TTR的表达量降低,而IGF-2、FDA-C、NF-κB及PTP表达量升高;脾肾阳虚型甲减患者TTR表达量升高,NHE-1、ZAG、UCH、IGF-2和MHC–II蛋白则表达量下降。肝肾阴虚型甲亢和脾肾阳虚型甲减相比,ProapoA-Ⅰ和TTR表达量降低,而NDU、SCDH/SCR、PK、Cyt P450蛋白、IGF-2和IRF-5表达增加。[结论]肝肾阴虚型甲亢患者机体代谢活跃,而脾肾阳虚型甲减患者则机体代谢减低,合成代谢的速度>分解代谢的速度。肝肾阴虚型甲亢血清IGF-2表达升高,脾肾阳虚型甲减则正好相反,说明血清IGF-2具有成为中医辨证肝肾阴虚和脾肾阳虚血清标志物的可能性。
- 卢德赵宋俊玲王萍儿杨贞唐利华李毅沃兴德
- 关键词：肝肾阴虚脾肾阳虚甲亢甲减蛋白质组
