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国家自然科学基金(30570857)
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2
被引量:5
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张农
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黄平
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p38MAPK信号通路与醛糖还原酶对转化生长因子β1诱导人系膜细胞纤连蛋白表达的影响
被引量:4
2015年
目的探讨p38MAPK信号通路与醛糖还原酶(AR)对转化生长因子131(TGF·131)诱导人系膜细胞(HMC)细胞外基质成分纤连蛋白(FN)表达的影响。方法应用醛糖还原酶抑制剂和p38MAPK信号通路抑制剂、转染及RNA干扰技术分别作用于HMC后,再用TGF-1刺激,观察刺激前后HMC表达FN的情况。Westernblot和免疫荧光检测HMC的FN、AR、p38的变化及real—time聚合酶链反应(PCR)鉴定转染和RNA干扰效果。结果HMC在TGF—β1作用后,AR和FN蛋白表达升高;单独使用醛糖还原酶抑制剂Sorbinil、Zopolrestat并不能下调FN蛋白的表达;但预先使用Sorbinil或Zopolrestat孵育后,再用TGF-β1刺激,FN蛋白表达下降(P〈0.05);单独使用p38MAPK信号通路抑制剂后,FN蛋白表达下降;各组细胞预先使用Sorbinil、Zopolrestat、SB203580孵育后,再用TGF-β1刺激,FN蛋白表达下降(P〈0.05);转染pCDNA3-AR后,HMC中ARmRNA及FN蛋白表达增多,再用TGF—β1刺激,FN蛋白表达明显上调(P〈0.05);用AR—siRNA干扰AR基因后,HMC中ARmRNA及FN蛋白表达减少,即使用TGF-β1刺激,FN蛋白表达仍然下降(P〈0.05)。结论AR基因作为TGF-β1反应性基因,参与了HMC中TGF-Bl诱导的FN表达的调控,p38MAPK信号通路在这一过程中起着重要作用。
黄平
张月娟
蒋涛
张农
关键词:
转化生长因子Β1
纤连蛋白
肾小球系膜细胞
高糖对大鼠系膜细胞肝细胞生长因子受体表达的影响及其机制研究
被引量:1
2007年
目的观察高糖作用下大鼠系膜细胞(MsC)肝细胞生长因子(HGF)受体c-Met的表达,并探讨其机制和意义。方法用RT-PCR和Western印迹方法检测高糖作用大鼠MsC的不同时间点(0、12、24、48、96h)c-Met的表达。分别用光辉霉素A(mithramycin A)和SU11274抑制转录因子Sp1的DNA结合活性和阻断c-Met。用电泳迁移率改变实验(EMSA)观察Sp1与c-Met基因启动子的结合活性。以荧光探剂二氯双氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)捕获细胞内活性氧。结果大鼠MsC的c-Met表达在高糖作用12、24和48h都明显上升,96 h开始下降。光辉霉素A呈浓度依赖性抑制高糖作用下大鼠MsC的c-Met表达上调。大鼠MsC内Sp1与c-Met基因启动子的结合活性在高糖作用下明显增强。HGF及c-Met显著抑制高糖诱导的大鼠MsC内活性氧的增多。结论高糖作用下大鼠MsC的c-Met表达增强,其机制可能是通过Sp1介导。HGF-c-Met信号通路激活能抑制高糖所致大鼠MsC内的氧化应激反应。
李慧
蒋涛
林伊凤
赵仲华
张农
关键词:
原癌基因蛋白质C-MET
肝细胞生长因子
系膜细胞
转录因子SP1
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