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新鲜人羊膜负载构建兔角膜上皮: 2008年; 目的新鲜人羊膜负载构建兔角膜上皮，为全角膜组织工程作基础。方法采用组织块法培养兔角膜缘干细胞，以新鲜人羊膜为载体，形成单层细胞膜片后用于传代；采用相差显微镜进行形态观察及AE5、p63免疫荧光鉴定。结果培养24h，兔角膜缘组织块边缘可见有细胞长出，之后形成“沙滩样”移形带，培养至7～8d细胞在羊膜上形成单层膜状，细胞透明，边缘整齐，形态呈多样化，以卵圆形和多边形为主；AE5抗体、p63抗体染色阳性细胞比例分别为（41．72±11．35）％、（21．57±6．36）％；2代AE5和p63阳性细胞比例与原代比较，无显著性差异（P〉0．05）；3代AE5和p63阳性细胞比例与原代比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；但4代AE5阳性细胞比例又明显升高。结论以新鲜羊膜为载体、采用组织块法培养角膜缘干细胞可获得较好的角膜上皮片，在传代细胞中，3代细胞分化程度最低、增殖能力最强，最适合移植。; 胡健王强雷宁玉任莉张娟; 关键词：角膜缘干细胞新鲜羊膜细胞培养

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山东省医药卫生科技发展计划项目(2005HW003)