山西省科技攻关计划项目(130313021-17)
- 作品数：4 被引量：16H指数：2
- 相关作者：贺杰峰赵浩亮任崇仁马俊田伟更多>>
- 相关机构：山西医科大学山西医科大学第一医院更多>>
- 发文基金：山西省科技攻关计划项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝癌患者与健康人外周血Vγ9Vδ2T细胞扩增前后比例及分化亚型对比
- 2016年
- 目的探讨肝细胞癌（HCC）患者外周血的Vγ9Vδ2T细胞比例,成熟分化亚型与健康人的差别,经体外扩增后上述指标的变化。方法选取健康捐献者（n=10）和HCC患者（n=20）的外周血共10 mL,采用不连续密度梯度离心法分离单核细胞层,借助流式细胞术检测Vγ9Vδ2T细胞占总T细胞比例,成熟分化亚型,并在体外加入唑来膦酸和IL-2进行扩增培养,12~14 d后收集细胞再次检测上述指标。结果培养前HCC组患者外周血中Vγ9Vδ2T细胞占总T细胞比例的平均值比健康人低（P〈0.05,P=0.009）,在经过体外扩增培养后其比例明显升高（P〈0.0001）,而在体外扩增后患者与健康人的Vγ9Vδ2T细胞比例差异无统计学意义（P〉0.05,P=0.3408）。患者Vγ9Vδ2T细胞的分化与成熟亚型作体外培养的前后对比发现,培养后Tn、Tcm、Temra的比例较培养前有明显下降（P〈0.05,P=0.0045,P=0.0236,P=0.0162）,患者和健康人Tem比值均较培养前明显升高（P〈0.0001）。而在扩增前、扩增后患者和健康人的Vγ9Vδ2T细胞的成熟分化比例差异均无统计学意义。结论肝癌患者外周血Vγ9Vδ2T细胞比例虽然低于健康人,但其分化成熟亚型的分布比例与健康人相似,且经过体外扩增培养后Vγ9Vδ2T细胞和总效应细胞比例,均与健康人无差异。其增殖功能得到恢复,肝癌患者和健康人中应用这种体外扩增方法外周血Vγ9Vδ2T细胞的效果相似。
- 马俊赵浩亮田伟贺杰峰李高鹏
- 关键词：过继免疫治疗唑来膦酸
- 胸腺五肽对大鼠肝癌免疫微环境中T细胞及其亚群的影响被引量：12
- 2014年
- 目的探讨大鼠肝癌免疫微环境中T细胞及其亚群的改变;研究胸腺五肽(TP-5)对大鼠肝癌免疫微环境中T细胞及其亚群的影响。方法将60只健康雄性Wistar大鼠随机分成4组:正常对照组:建模和给药周期内一切操作均以等量生理盐水替代药物;模型对照组:建立肝癌模型后,给药期以生理盐水替代TP-5;给药Ⅰ组:建立肝癌模型后,给药期给TP-5,0.25 mg/次,1次/d;给药Ⅱ组:建成肝癌模型后,给药期给TP-5,0.5 mg/次,1次/d。流式细胞术检测肝组织中T细胞及其亚群的改变。结果模型组肝组织中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD4+CD25+调节性T细胞的比例均高于相应的正常对照组(P<0.001),CD8+T细胞在模型组肝组织中的比例低于相应的正常对照组(P<0.001)。TP-5治疗后给药Ⅰ、Ⅱ组的CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD25+Treg细胞与模型对照组间有明显差异(P<0.05),且明显趋于正常(与正常对照组比P>0.05)。结论肝癌免疫微环境中CD3+T细胞、CD4+T细胞以及对免疫起抑制作用的CD4+CD25+Treg细胞比例增高,但在抗肿瘤反应中起主要作用的CD8+T细胞比例却明显下降,导致肝癌免疫微环境处于抑制状态;TP-5对大鼠肝癌免疫微环境有改善作用。
- 兰志伟赵浩亮贺杰峰张志强
- 关键词：肝细胞免疫微环境T淋巴细胞亚群
- CNOT7基因参与诱导HepG2细胞对Vγ9Vδ2T细胞的免疫耐受被引量：2
- 2017年
- 目的研究人CCR4-NOT转录复合体亚基7（CCR4-NOT transcription complex subunit 7 human。CNOT7）在HepG2肝母细胞癌系（hepatoblastoma G2 cell line，HepG2 cells）对Vγ9Vδ2T淋巴细胞免疫耐受中的作用及相关机制。方法用CNOT7重组质粒（recombinant plasmid of CNOT，shCNOT7）及相应对照组载体质粒转染HepG2细胞，用Vγ9Vδ2T细胞因子干预转染前后的各组细胞，流式细胞仪检测细胞凋亡水平，Westernblot方法检测CNOT7及信号传导及转录激活因子1（signal transducer and activator of transcription 1，STATl）、STAT3的蛋白表达水平。Western blot法检测HepG2肝癌细胞系及人正常肝细胞系L02中CNOT7、STAT1和STAT3蛋白的表达水平。结果V19V82T细胞因子干预后．CNOT7基因敲减后的HepG2细胞组凋亡率由（7．55％±2．63％）增加至（20．59％±3．12％）。与L02细胞组比较，HepG2细胞组中的CNOT7蛋白高表达（F=28．76，P〈0．01），STAT3蛋白高表达（F=110．29，P〈0．01），STAT1蛋白低表达（F=35．67，P〈0．01）。CNOT7基因敲除后，HepG2细胞组的STATl蛋白表达上调（t=6．69，P〈0．05）。结论CNOT7基因参与诱导HepG2细胞V19VG2T细胞的免疫耐受，敲减CNOT7基因可逆转HepG2细胞对Vγ9Vδ2T细胞的免疫耐受。
- 赵雷任崇仁贺杰峰赵浩亮
- 关键词：肝细胞免疫耐受基因敲除技术
- 原发性肝癌患者外周血Vγ9Vδ2T细胞亚型及免疫功能分析被引量：2
- 2016年
- 目的检测肝癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）患者与健康人外周血中Vy9V82T细胞比例，亚型以及免疫杀伤功能的变化。方法采集25例HCC患者和20例健康人的外周血应用流式细胞术检测82T细胞比例、分化成熟亚型、表达IFN-y和CDl07a比例；加入唑来膦酸和IL-2体外培养，12-14d后收集细胞再次检测上述指标。结果HCC患者外周血82T细胞占总T细胞比例培养前比健康人低（t=4．505，P〈0．001），经体外扩增后明显升高（t=8．782，P〈0．001），与健康组比较差异无统计学意义（t=1．644，P=0．109）。患者和健康人体内82T细胞分化亚型分布比较差异无统计学意义（均P〉0．05），而Tn、Tcm、Temra比例在培养后较培养前下降[t（Tn）=2．081，t（Tcm）=2．478，t（Temra）=2．953，均P〈0．05]，而Tem、Tem＋Temra较培养前明显升高[t（Tem）=12．6，t（Tern＋Temra）=9．843，均P〈0．001]。患者和健康人外周血中分泌IFN．1和CD107a的82T细胞比例在培养前后差异无统计学意义（P〉0．05）。结论肝癌患者外周血82T细胞比例低于健康人，成熟亚型、表达CD107a和IFN-y比例与健康人无差异，唑来膦酸加IL-2可以扩增肝癌患者与健康人82T细胞。
- 马俊田伟贺杰峰任崇仁任晓静赵浩亮
- 关键词：肝细胞T淋巴细胞免疫疗法
