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脂质胶束介导VEGF基因对称和不对称siRNA的抑瘤效果: 2011年; 目的:探讨脂质胶束递送靶向VEGF基因的对称siRNA和不对称siRNA(asiRNA)的抑瘤效果。方法:通过RNA电泳等方法,筛选不同组分比例的脂质胶束,用Western blot、细胞板计数法、CCK-8实验检测对乳腺癌MCF-7细胞活力的影响。构建H22肝癌荷瘤小鼠模型,随机分为不同实验组,连续14天尾静脉注射给药,计算抑瘤率和小鼠生存率。结果:在4组不同RNA干扰片段中,asiRNA21/23组抑制VEGF蛋白表达效果最好。在H22荷瘤小鼠实验中,asiRNA21/23组显示了明显的抑瘤效果,且延长了荷瘤小鼠的生存期。结论:脂质胶束递送VEGF-asiRNA21/23降低了MCF-7细胞中VEGF基因的表达,且具有明显的肿瘤抑制效果。; 郭佳佳殷妍张昌栋王建军徐根兴; 关键词：血管内皮生长因子

靶向HIV-1细胞受体基因CCR5的不对称siRNA的稳定性和体内分布研究: 2011年; 目的:探讨靶向HIV-1细胞受体基因CCR5的不对称siRNA(asiRNA)在血清和动物体内的稳定性和在动物体内分布情况。方法:用内皮抑素同脂质胶束联合递送asiRNA,琼脂糖凝胶电泳法检测asiRNA的血清稳定性,ELISA法和活体荧光成像法检测asiRNA的体内分布。结果:改变合适的实验条件和asiRNA的修饰,可提高asiRNA的血清稳定性。用ELISA法检测出静脉给药15 min后双链asiRNA在血液、肝、肺和肾内浓度较高,用活体荧光成像法检测出静脉给药24 h后asiRNA向肾内汇集排泄,两种检测方法测得asiRNA在脾内浓度较低。结论:两种检测方法方便实用,灵敏度不同,均可用于阳离子脂质体递送asiRNA的体内分布检测。; 张昌栋殷妍郭佳佳梁晓飞段友容吴稚伟王建军徐根兴; 关键词：CCR5 SIRNA ELISA

RNAi介导肿瘤细胞VEGF基因表达临床研究的现状被引量：5: 2012年; 目的:针对RNA干扰(RNAi)技术及VEGF基因做相关介绍,总结应用RNAi技术以VEFG为靶点抑制癌细胞生长的实验研究进展。方法:应用CNKI期刊全文数据库、万方数据库检索系统,以"RNAi、肿瘤细胞、VEGF"等为关键词,检索所有的相关文献,纳入标准:1)VEGF的发现及其受体;2)RNAi机制及特点;3)用RNAi技术抑制肿瘤细胞VEGF基因表达的实验研究,凡符合以上几点的发表在2000-01-2011-09的文章都可作为本文的参考文献。经筛选引用的中文文献25篇,英文文献13篇。结果:RNAi是现在基因治疗的热门方法,由于其高效特异性,越来越受到更多学者得关注。血管生长在肿瘤生长、转移过程中起着关键作用,而VEGF是血管内皮生长的最关键因子,通过RNAi对VEGF mRNA表达抑制率可达94%左右,从而可有效抑制癌细胞的增殖。结论:应用RNAi技术以VEGF为治疗靶点的实验研究为肿瘤的治疗提供的大量的实验依据,为其临床应用做好充足的准备。; 王立花樊燕蓉李鹏夏雪飞; 关键词：VEGF RNAI 肿瘤细胞转录后基因沉默

靶向VEGF的不对称siRNA抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖被引量：1: 2012年; 目的:探讨靶向血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因的siRNA对乳腺癌MCF-7细胞的抑制效果。方法:设计靶向VEGF的4种小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),包括对称siRNA(siRNA21/21,siRNA23/23)与不对称siRNA(asymmetric siRNA,aiRNA;aiRNA21/23,aiRNA19/21)。siRNA转染入MCF-7细胞后,MTT及流式细胞术检测MCF-7细胞增殖及凋亡情况,RT-PCR、ELISA法检测MCF-7细胞中VEGF基因和蛋白的表达。结果:与对照组相比,aiRNA21/23、siRNA23/23、aiRNA19/21、siRNA21/21这4种siRNA都能有效抑制VEGF mRNA的表达[(71.4±5.01)%、(40.0±3.11)%、(37.2±2.79)%、(11.1±0.99)%vs(2.4±0.11)%,P<0.01],且抑制MCF-7细胞的增殖[(44.7±5.38)%、(38.5±5.67)%、(33.6±2.18)%、(33.1±3.18)%vs(2.2±0.28)%,P<0.01],其中以不对称aiRNA21/23的抑制效果最明显。与对照组比较,aiRNA21/23显著促进MCF-7细胞的凋亡[(49.9±4.02)%vs(4.7±0.91)%,P<0.01]。结论:靶向VEGF基因的siRNA可抑制MCF-7细胞的增殖、促进细胞凋亡,尤以不对称siRNA的效果最明显。; 王立花李鹏夏雪飞樊燕蓉; 关键词：乳腺癌 MCF-7细胞 RNA干扰血管内皮生长因子

RNAi药物的临床研究进展被引量：8: 2010年; RNA干扰(RNAi)是指在细胞内由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的降解同源序列的mRNA,从而抑制相应基因表达的现象。它是转录后基因沉默(PTGS)的一种。RNA干扰不仅是基础研究的热点,也是临床应用研究的热点,小干扰RNA(siRNA)药物虽然在国际上已有部分进入I～III期临床研究,但是siR-NA的脱靶效应、siRNA的导入等实际问题一直是RNA干扰临床治疗的最大障碍。核酸药物比传统的化学分子甚至比蛋白质更容易被降解,而RNA干扰药物的有效传递依旧是RNAi药物临床应用的拦路虎,该技术一旦被攻克,将会被广泛应用于基因性疾病、传染性疾病及恶性肿瘤的临床治疗。本文就RNA干扰的作用机制、临床应用、存在问题及广阔前景作一简要综述。; 王庆晓王建军徐根兴; 关键词：RNA干扰

不对称RNA干扰研究进展: 2010年; RNA干扰是生物医学研究,特别是基因功能研究中的重要工具。目前在哺乳细胞和临床研究中的RNA干扰技术主要由相同长度对称的双链小干扰RNA(siRNA)介导。正义链和反义链长度不一致的不对称双链小干扰RNA(aiRNA)能更有效地使相应的靶基因沉默,并且降低脱靶效应,提高体内外稳定性,成为疾病治疗的新希望。本文就aiRNA的研究进展作一综述。; 陈旭王建军徐根兴; 关键词：SIRNA RNA干扰

siRNA的体内递送及药物代谢动力学特性被引量：1: 2010年; siRNA作为一种高效的RNA干扰药物在疾病治疗方面前景广阔。但其临床应用还需解决由于高负电荷和分子量等引起的体内递送系统、脱靶效应、免疫激活、毒副作用、改善其药物代谢动力学特性等问题。本文简要综述了siRNA的作用原理、体内递送方式、药代动力学特性、安全问题及临床应用展望。; 郭佳佳王建军徐根兴; 关键词：小干扰RNA RNA干扰药物代谢动力学

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国家科技重大专项(2009ZX09103-635)