国家自然科学基金(31172214)
- 作品数：9 被引量：57H指数：6
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- 干燥方法对乳蛋白氧化及机体氧化还原状态的影响被引量：7
- 2013年
- 目的:研究乳蛋白经过干燥后,乳蛋白氧化及对机体氧化还原状态的影响。方法:通过不同进风温度(160、170、180℃)对全脂乳和脱脂乳进行喷雾干燥及全脂乳的冷冻干燥处理,测定其羰基、巯基含量。小鼠分为6组,分别灌胃原奶、喷雾干燥不同温度乳粉、脱脂乳粉及冷冻干燥乳粉,测定0、30、60、90、120min血液中自由基水平,测定60、90min后小鼠肝脏、空肠、十二指肠、胃组织抗氧化能力指标(丙二醛MDA、总抗氧化能力T-AOC、GSH/GSSG)。结果:乳蛋白经过喷雾干燥及冷冻干燥处理后,羰基含量随温度的上升及脂肪含量的增多显著上升(p<0.05),巯基含量呈下降趋势。冷冻干燥组羰基含量比全脂喷雾干燥组低,巯基与之相比呈上升趋势。小鼠血液自由基的最高峰出现在灌胃90min时,灌胃喷雾干燥乳粉自由基含量显著高于其他组(p<0.05),并随温度的升高而增高。小鼠喷雾干燥组中组织总抗氧化能力T-AOC和谷胱甘肽比值GSH/GSSG均低于其他各组,丙二醛(MDA)含量高于别组。结论:喷雾干燥等加工方法会导致乳蛋白发生不同程度的氧化,导致乳蛋白理化性质的变化,短期灌胃氧化蛋白会引起机体的氧化应激,降低组织抗氧化的防御能力。
- 莫玲乐国伟施用晖
- 关键词：喷雾干燥氧化还原状态
- 抗菌肽BuforinⅡ衍生物抑制大肠杆菌大分子合成的研究被引量：9
- 2013年
- 【目的】研究抗菌肽BuforinⅡ的衍生物BF2-A/B作用大肠杆菌后对胞内生物大分子合成的影响。【方法】紫外分光光度法检测抗菌肽对细胞DNA、RNA合成能力的影响,考马斯亮蓝法检测抗菌肽对细胞总蛋白合成能力的影响,分别用邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷法和对硝基苯磷酸二钠法检测抗菌肽对β-半乳糖苷酶及碱性磷酸酶表达活性的影响。【结果】BF2-A/B不优先抑制DNA合成,而是优先抑制RNA和蛋白的合成。在相同浓度下,BF2-B抑制RNA合成的能力比BF2-A强,BF2-A抑制蛋白合成的能力比BF2-B强。胞内酶β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶的表达活性都在下降。【结论】BF2-A/B结合胞内核酸后,没有首先影响DNA的复制功能,而是优先抑制基因转录功能,主要在转译水平上抑制蛋白的合成。
- 郝刚施用晖马丹雅乐国伟
- 关键词：抗菌肽大肠杆菌大分子
- 抗菌肽buforin Ⅱ衍生物抑制细菌核酸合成的机制研究被引量：11
- 2012年
- 目的探究抗菌肽buforin Ⅱ的衍生物buforin Ⅱ-A(BF2-A)和buforin Ⅱ-B(BF2-B)对细菌的胞内抑菌作用机制。方法体外用原子力显微镜观察抗菌肽与基因组DNA的结合情况,荧光光谱分析肽与基因组DNA的结合方式。体内用透射电镜观察抗菌肽作用后金黄色葡萄球菌细胞膜超微结构的变化,流式细胞仪分析肽对金黄色葡萄球菌细胞周期的影响。最后通过凝胶阻滞实验推测肽与金黄色葡萄球菌DNA合成相关基因的结合引起了细胞周期的改变。结果肽与基因组DNA发生了结合,与溴化乙锭(EB)竞争性嵌入基因组DNA;BF2-A/BF2-B与金黄色葡萄球菌作用后几乎在不破坏细胞膜的情况下渗透进入胞内,与DNA合成相关基因发生了结合,特异性阻滞细胞周期中的DNA合成阶段;肽与DNA合成相关基因发生了结合。另外,所有的实验结果显示了BF2-B穿透细胞、与DNA结合的能力及对细胞周期的影响强于BF2-A。结论 BF2-A/BF2-B与DNA穿过金黄色葡萄球菌细胞膜后在细胞内通过与DNA结合,特异性的将细胞阻滞在了细胞周期的DNA合成期而发挥了抑菌作用,而且BF2-B的上述作用强于BF2-A。
- 苏冠芳郝刚李莉蓉施用晖乐国伟
- 关键词：抗菌肽细胞周期金黄色葡萄球菌
- 酪氨酸氧化产物对大鼠心肌氧化还原状态的影响被引量：5
- 2015年
- 目的探讨酪氨酸氧化产物(TOP)对大鼠心肌氧化还原状态的影响及其氧化损伤机制。方法 4周龄SD雄性大鼠,随机分为3组:空白对照组、TOP 440mg/kg组(TOP组)和TOP 440 mg/kg+硫辛酸(LA)5 mg/kg组(TOP+LA组),于实验6、12、24周测定大鼠血液及心肌氧化还原状态相关指标,RT-PCR法检测24周心肌Nrf2、Trx等mRNA表达。结果 TOP组血液及心肌中氧自由基(ROS)、羰基(PC)、丙二醛(MDA)、双酪氨酸(Dtyr)、三硝基酪氨酸(3-NT)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)含量均高于对照组(P<0.05);总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、还原性谷胱甘肽(GSH)/氧化性谷胱甘肽(GSSG)显著低于对照组(P<0.05)。RT-PCR结果显示,TOP组24周心肌Nrf2、Trx-1、NF-κB、AP-1显著上调(P<0.05)。结论酪氨酸氧化产物导致大鼠氧化还原状态失衡,心肌蛋白质氧化产物积累,心肌氧化损伤。机体可通过提高Nrf2及其相关基因mRNA的表达水平来抵抗酪氨酸氧化产物引起的心肌氧化损伤。
- 赵琪李竹青丁寅翼施用晖乐国伟
- 关键词：晚期氧化蛋白产物心肌
- 抗菌肽BuforinⅡ衍生物特异性结合金黄色葡萄球菌DNA抑菌机理的研究被引量：4
- 2014年
- 旨在研究抗菌肽BuforinⅡ的衍生物BF2-A/B作用于金黄色葡萄球菌基因组DNA的抑菌机制。原子力显微镜观察了BF2-A/B对金黄色葡萄球菌基因组DNA的结合作用,用凝胶阻滞试验分析了BF2-A/B结合DNA的能力,DNaseⅠ足迹试验研究衍生肽与基因组DNA结合的特异性,并考察了对细胞呼吸作用和ATP合成的影响。结果显示,BF2-A/B都能结合基因组DNA,BF2-B的结合能力比BF2-A强,并且都趋向特异性结合基因组DNA上的2个区段,其中1个是23SrRNA基因上的1段保守序列,衍生肽还影响细胞的氧化磷酸化过程,显著抑制细胞呼吸作用和ATP合成,BF2-B的抑制比BF2-A更强烈。研究结果说明BF2-A/B是通过渗透细胞膜进入细胞质,特异性结合基因组DNA上的2个区段,并抑制细胞呼吸作用和ATP合成而杀菌。BF2-B结合DNA的能力更强,抑制细胞呼吸作用和ATP合成的能力更强,因此具有更强的抑菌活性。
- 郝刚乐国伟施用晖
- 关键词：抗菌肽金黄色葡萄球菌DNA作用抑菌机理
- 鱼胶原蛋白肽对高脂膳食小鼠肝脏脂肪代谢和氧化还原状态的影响被引量：8
- 2019年
- 目的:研究鱼胶原蛋白肽(fish collagen peptides,FCPs)对高脂膳食(high-fat diet,HFD)小鼠肝脏脂肪代谢和氧化还原状态的影响。方法:54只C57BL/6雄性小鼠按体质量随机分为正常膳食组(CON)、HFD组(HF)和FCPs干预HFD组(PHF)。每周记录各组小鼠体质量,并按体质量把每组小鼠随机均分为两批,分别在第11和22周宰杀,测定采食量、脂肪表观消化率;肝脏中甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇和游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量;肝脏脂代谢相关基因乙酰辅酶A羧化酶1、脂肪酸合成酶、固醇调节元件结合蛋白1c、胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase 1,CYP7A1)、过氧化物激活受体α(peroxisome proliferatoractivatedreceptorα,PPARα)和肉毒碱棕榈酰基转移酶1(carnitinepalmity1transferase1,CPT1)的mRNA表达水平,肝脏氧化还原状态相关指标活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛、总抗氧化能力(totalantioxidant capacity,T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase,GSH-Px)活力和还原型/氧化型谷胱甘肽的水平。结果:第22周时,与HF组相比,PHF组小鼠的采食量、脂肪和能量摄入显著增加(P<0.05),肝脏的TG、FFA、脂肪空泡和脂肪浸润面积比明显降低(P<0.05),脂肪分解关键基因CYP7A1、PPARα和CPT1的mRNA表达水平显著上调(P<0.05),肝脏的ROS水平显著降低(P<0.05),T-AOC水平和GSH-Px活力显著升高(P<0.05)。结论:质量分数1%FCPs干预可能通过改善HFD小鼠肝脏氧化还原状态,促进肝脏脂肪分解代谢,起到减少小鼠肝脏脂肪蓄积和改善脂代谢。
- 田许杨玉辉王雅楠张佳红郭海涛施用晖乐国伟
- 关键词：高脂膳食肝脏脂肪代谢氧化还原状态
- 来自穿膜肽的新肽的抗菌活性及抑菌机制被引量：4
- 2013年
- 【目的】研究基于穿膜肽和抗菌肽构效关系改造获得的新肽P7的抗菌活性及其对大肠杆菌(E.coli)的抑菌机制。【方法】微量稀释法和溶血实验分析P7的抑菌活性及其对正常细胞的细胞毒性;采用膜荧光探针、流式细胞术和扫描电镜分析P7对E.coli膜通透性、膜完整性的影响和细胞超微结构变化;通过激光共聚焦分析P7在E.coli细胞中的定位;凝胶阻滞实验测定P7与E.coli基因组DNA结合能力。【结果】P7比母肽显示更强的抑菌活性,最低抑菌浓度范围为4-32μmol/L,且在作用浓度范围内具有较弱的溶血活性。P7可以增加E.coli外膜和内膜的通透性,使E.coli细胞膜的完整性和细胞表面结构受损。同时P7可以穿过E.coli细胞膜在细胞质聚集并与基因组DNA结合。【结论】P7通过增加E.coli内外膜通透性,穿过细胞膜与胞内DNA结合发挥抑菌活性。
- 李莉蓉施用晖乐国伟
- 关键词：穿膜肽抑菌活性DNA结合
- 蛋氨酸限制和胶原蛋白肽对高脂饮食小鼠脂代谢和氧化应激的联合作用被引量：8
- 2018年
- 目的:研究饮食蛋氨酸限制(methionine restriction,MR)和胶原蛋白肽对高脂饮食小鼠肝脏脂代谢和氧化应激的联合作用。方法:将36只C57BL/6雄性小鼠随机分为4组:低脂正常饮食组(ND组)、高脂饮食组(HF组)、高脂蛋氨酸限制组(MR组)及高脂蛋氨酸限制和胶原蛋白肽联合作用组(PMR组)。每周监测体质量,22周实验结束,测定血浆中的甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量;测定肝脏中的TG和TC含量;测定肝脏和血浆中的总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase,GSH-Px)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,q PCR)测定脂代谢相关基因固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element-binding protein1c,SREBP1c)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl Co A-carboxylase 1,ACC-1)、胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)、对肉碱酰基转移酶1(carnitine palmityl transferase 1,CPT1)和过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptorα,PPARα)的表达。结果:与HF组相比,MR组小鼠体质量、肝脏中的TG和TC含量极显著降低(P<0.01);肝脏脂肪合成相关基因FAS和SREBP1c极显著下调(P<0.01),ACC-1显著下调(P<0.05);脂肪分解相关基因CYP7A1和PPARα极显著上调(P<0.01),CPT1显著上调(P<0.05);肝脏中T-AOC和GSH-Px活力显著增加(P<0.05),MDA和活性氧含量极显著降低(P<0.01);血浆中T-AOC和GSH-Px活力极显著增加(P<0.01),血浆MDA和全血活性氧含量极显著降低(P<0.01)。与MR组相比,PMR组体质量和肝脏中的TG含量极显著降低(P<0.01);血浆中的TG和TC含量显著降低(P<0.05);脂肪合成相关基因SREBP1c和ACC-1显著下调(P<0.05);脂肪分解相关基因CPT1和PPA
- 王雅楠张佳红郭海涛乐国伟施用晖
- 关键词：胶原蛋白肽脂代谢氧化应激
- 氧化酪蛋白对小鼠血液和消化器官氧化损伤的影响被引量：6
- 2013年
- 目的评估H2O2-Cu及脂质氧化产物丙二醛(MDA)氧化修饰的酪蛋白对小鼠血液和消化器官氧化损伤的影响。方法用H2O2-Cu、MDA处理酪蛋白,测定蛋白体外蛋白消化率及消化产物清除自由基的能力。用氧化酪蛋白饲喂小鼠10 w,测定小鼠血液和消化器官的抗氧化及氧化损伤指标。结果酪蛋白经过氧化处理后,羰基、双酪氨酸(Dtyr)、氧化蛋白晚期产物(AOPP)含量上升,巯基含量下降。氧化蛋白体外消化率下降,消化液清除自由基能力下降。饲喂氧化酪蛋白日粮组小鼠的血液和消化器官氧化还原状态失衡,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),过氧化氢还原酶(CAT)活性及总体抗氧化(T-AOC)能力下降,并积累大量活性氧(ROS)和氧化蛋白产物,包括羰基、MDA、Dtyr、AOPP。小鼠体重增长率下降,脏体比上升。结论氧化导致酪蛋白消化率和蛋白消化液清除自由基能力下降,摄食氧化酪蛋白降低机体抗氧化能力,导致消化器官的氧化损伤和机体营养状况的恶化。
- 李竹青吴伶艳乐国伟施用晖
- 关键词：消化器官
