国家自然科学基金(31172207) 作品数:7 被引量:57 H指数:3 相关作者: 李晓霞 禹学礼 曹平华 韩文霞 张凡 更多>> 相关机构: 河南科技大学 西北农林科技大学 河南农业职业学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 博士科研启动基金 河南省教育厅科学技术研究重点项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
不同冷冻载体对牛未成熟卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响 被引量:2 2017年 为了研究不同冷冻载体制备方法及其对牛未成熟卵母细胞发育能力的影响,以牛未成熟卵母细胞为实验材料,分别探究开放式拉长细管(OPS,open pulled straw)和玻璃微管(GMP,glass micropipette)的制备方法,并以OPS、GMP和冷冻叶片为冷冻载体玻璃化冷冻牛未成熟卵母细胞,解冻后经体外成熟培养和体外受精,统计形态正常率、成熟率、卵裂率及囊胚率。结果显示:以简易小酒精灯为热源,以细管为原材料可以制备出适用的OPS冷冻载体;以酒精喷灯为热源,以细玻璃管为原材料可以制备出适用的GMP冷冻载体。OPS和GMP组形态正常率分别为(74.3%±1.8)%和(72.5%±2.6)%;无显著差异(P>0.05),上述二组均显著低于冷冻叶片组(82.1%±1.3)%,P<0.05,但三组间成熟率、卵裂率和囊胚率均无显著差异(P>0.05)。研究表明,分别以简易小酒精灯和酒精喷灯为热源,以细管和细玻璃管为原材料可以成功制备出OPS和GMP载体;以OPS、GMP和冷冻叶片为冷冻载体均可成功地玻璃化冷冻牛未成熟卵母细胞。 裴旭哲 马德全 张凡 武花 郭先飞 李晓霞 栗颖华 禹学礼关键词:未成熟卵母细胞 玻璃化冷冻 放牧条件下不同处理对西门塔尔牛超排效果的影响 被引量:2 2012年 为探索适合草原放牧条件下西门塔尔牛的超数排卵技术,分别采用国产及进口促卵泡素(FSH)和三种方案(A:FSH+PG;B:FSH+PG+GnRH;C:FSH+PG+CIDR+GnRH)对放牧条件下西门塔尔牛进行超数排卵试验。结果表明,采用国产FSH超排时,方案A、方案B和方案C所获头均可用胚数分别为(3.43±2.41)枚、(5.93±3.54)枚和(7.21±3.19)枚,采用进口FSH超排时,三种超排方案所获头均可用胚数分别为(4.34±2.71)枚、(6.76±3.79)枚和(7.79±4.23)枚,采用两种FSH超排,方案B、方案C所获头均可用胚数明显高于方案A(P<0.05);3种方案中,国产与进口FSH所获头均可用胚数差异均不显著(P>0.05)。试验表明,在放牧条件下,采用三种超排处理方案,以FSH+PG+CIDR+GnRH法最好,FSH+PG+GnRH法次之,FSH+PG法效果最差;国产FSH与进口FSH超排效果差异不显著。 董文听 徐照学 田万强 王二耀 马永阔 辛晓玲 魏成斌 冯亚杰 楚秋霞 施巧婷 王治方 郝建刚 郝建忠 陈秀亮 李晓霞 禹学礼关键词:超数排卵 胚胎移植 褪黑素在牛卵母细胞体外受精中的抗氧化作用 被引量:10 2015年 为探讨褪黑素(MLT)对牛卵母细胞成熟、精子获能和胚胎发育的抗氧化效果。在体外培养液中添加10-9 M MLT,以评估牛卵母细胞成熟率及胚胎发育效果;同时利用目测法、低渗膨胀法、JC-1和考马斯亮兰染色法评估不同浓度MLT(0 M、10-3 M、10-4 M和10-5M)添加在牛精子获能液经上游法处理45min后对精子质量的影响。结果表明:与对照组相比,添加10-9 M MLT既可显著提高牛卵母细胞的成熟率(62.5%vs 77.8%)(P<0.05),又可明显刺激受精后胚胎体外发育的卵裂率(53.2%vs 67.6%)(P<0.05)和囊胚率(20.3%vs35.4%)。在精子获能液中添加10-4 M MLT上游处理45 min后,其精子活力(84.6%vs71.6%)、质膜完整率(88.8%vs 75.2%)、线粒体高膜电位百分率(83.0%vs 70.2%)和顶体完整率(87.0%vs 74.4%)均显著高于对照组(P<0.05)。这些结果有助于优化IVF技术体系,利于体外胚胎生产效率提高。 李晓霞 刘燕 曹平华 韩文霞 姚昱君 祝蕊 禹学礼关键词:褪黑素 卵母细胞 体外受精 体细胞混合共培养体系对牛早期胚胎体外发育的影响 2013年 旨在探索单层颗粒细胞—输卵管上皮细胞(GC-BOEC)混合共培养体系对牛早期胚胎体外发育的影响。将卵丘卵母细胞复合体(COCs)经体外培养成熟后,按相同的方法进行体外受精,精卵共孵12 h后随机将假定受精卵分别移入含有不同体细胞的培养体系中进行共培养(GC组、BOEC组、GC-BOEC组、对照组)。结果显示:各个试验组之间卵裂率无显著差异(P>0.05);GC-BOEC组的桑葚胚率(43.1%)显著高于其他3个试验组(P<0.05),GC组与BOEC组之间差异不显著(P>0.05);GC-BOEC组的囊胚率(34.9%)显著高于GC组(30.6%)、BOEC组(26.1%)和无共培养组(3.4%)(P<0.05),GC组与BOEC组之间差异不显著(P>0.05)。结果表明:牛卵巢颗粒细胞与输卵管上皮细胞混合滋养层较之单一滋养层能更好地维持和促进牛早期胚胎的体外发育,可替代单一滋养层。 陈聪慧 陈君怡 许亚坤 郑均均 李晓霞 禹学礼关键词:颗粒细胞 输卵管上皮细胞 共培养 胚胎 不同浓度玻璃化冷冻液对牛未成熟卵母细胞发育能力的影响 被引量:1 2013年 旨在研究含不同浓度乙二醇(EG)、二甲基亚砜(DMSO)的玻璃化冷冻液对牛未成熟卵母细胞冷冻后发育能力的影响。将卵丘卵母细胞复合体(COCs)置于不同配方的玻璃化冷冻液(VS1:10%EG+10%DMSO;VS2:20%EG+20%DMSO;VS3:25%EG+25%DMSO)中暴露30s或60s,体外成熟培养22h,以未在玻璃化冷冻液中暴露而直接体外成熟22h的COCs为对照组。结果表明,在VS3中暴露60s时,成熟率比对照组明显下降(P<0.01),其他组与对照组差异均不显著(P>0.05);在不同玻璃化冷冻液(VS1、VS2、VS3)中,采用开放式拉长细管(OPS)法冷冻COCs,解冻后再进行体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)和早期胚胎的体外培养(IVC)。结果表明,VS2组囊胚率(5.4%)最高,与VS3组(3.6%)差异不显著(P>0.05),VS1组没有获得囊胚。研究表明,含20%EG、20%DMSO的玻璃化冷冻液可以用于牛未成熟卵母细胞的冷冻,COCs在冷冻液中处理的时间应控制在30s内。 栗颖华 禹学礼 张德勋 陈君怡 许亚坤 李晓霞 昝林森关键词:卵母细胞 胎次和配种季节对PIC母猪繁殖性能的影响 被引量:39 2013年 为研究胎次和配种季节对PIC母猪繁殖性能的影响,根据陕西省某PIC父母代良种猪繁育场2007~2009年繁殖母猪生产资料,分别选取607头和692头繁殖母猪生产资料(剔除有寄养仔猪的繁殖母猪),统计其不同胎次和配种季节的总产仔数、产活仔数、健仔数、仔猪初生窝重、初生个体均重和断奶率等繁殖性能。结果表明:胎次和配种季节对PIC母猪繁殖性能均有显著影响(P<0.05);母猪1~3胎繁殖性能随胎次呈增加趋势,第3胎达到高峰,第6胎后繁殖性能逐渐下降;同时,PIC母猪的繁殖性能以秋季配种时最好,冬季次之,夏季最差。PIC母猪的最佳繁殖胎次为第2~6胎次,适宜配种季节为秋季和冬季。 李晓霞 曹平华 禹学礼关键词:胎次 配种季节 繁殖性能 添加褪黑素对牛卵母细胞及其ICSI操作后胚胎发育效果的影响 被引量:3 2016年 为探讨抗氧化剂褪黑素(MLT)对牛卵母细胞体外成熟及胞浆单精子注射(ICSI)显微操作后早期胚胎体外发育的影响。在牛卵母细胞体外成熟培养液中,分别添加0 M、10^(-10) M、10^(-9) M、10^(-8) M MLT,通过统计核成熟率,评估不同浓度的MLT对牛卵母细胞体外成熟的影响。于24h后收集核成熟的牛卵母细胞进行显微操作,同时在显微操作液中分别添加0 M、10^(-10) M、10^(-9) M、10^(-8) M MLT,经体外培养后评估MLT对ICSI处理后胚胎体外发育的影响。结果表明:与对照组相比,在成熟液中添加10^(-9) M MLT(73.8%vs 81.3%)(P<0.05)可显著提高牛卵母细胞成熟率;同时在显微操作液中添加10^(-9) M MLT,与对照组相比,牛卵母细胞ICSI后胚胎体外发育的卵裂率(81.3%vs 85.5%)差异不显著(P>0.05),但囊胚率(14.3%vs 22.6%)显著提高(P<0.05)。因此,添加10^(-9) M MLT有助于优化ICSI技术体系,提高显微授精后胚胎体外生产效率。 韩文霞 李晓霞 曹平华 武花 郭先飞 裴旭哲 张凡 禹学礼 王建平关键词:褪黑素 卵母细胞 胞浆内单精子注射