国家自然科学基金(31172204)
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
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- 鼠伤寒沙门氏菌感染诱导鸡盲肠及脾脏TLR基因差异表达被引量：7
- 2014年
- 为研究鼠伤寒沙门氏菌感染后不同时间鸡盲肠和脾脏组织TLR4、TLR5、TLR15和TLR21 mRNA的表达规律,选用沙门氏菌阴性济宁百日鸡36只,随机分为2组,饲喂于隔离器中,2日龄分别接种1.23×108cfu鼠伤寒沙门氏菌和PBS溶液,接种后第1、3和7天采集盲肠和脾脏组织样品,应用荧光定量PCR检测感染后各时间、各组织中TLR4、TLR5、TLR15和TLR21的表达量。结果显示,1)济宁百日鸡感染鼠伤寒沙门氏菌后盲肠中TLR4、TLR5、TLR15和TLR21表达量均发生显著变化(P<0.05);2)脾脏中TLR21和TLR4的表达量分别在接种后第1天和第3天显著上调(P<0.05),而TLR5和TLR15的表达量差异不显著;3)感染后各时间点脾脏中TLR5的表达量显著低于盲肠(P<0.01),而TLR4、TLR15和TLR21表达量均显著高于盲肠(P<0.05)。鼠伤寒沙门氏菌感染后,鸡TLRs在盲肠和脾脏中发挥着不同的调控作用,而且这种表达调控表现出一定的时序性。
- 孙钰吴桂贤刘丽英齐玉凯李显耀
- 关键词：TLR鼠伤寒沙门氏菌基因表达
- 肠炎沙门菌感染对鸡血清SOD、GSH-Px活性及MDA含量的影响被引量：1
- 2016年
- 研究通过检测鸡感染肠炎沙门菌(SE)后血清中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量的变化,探讨氧化损伤与SE感染的关系。将90只1日龄肠炎沙门菌阴性SPF鸡随机分为两组,对照组40只接种PBS,试验组50只接种肠炎沙门菌菌液。分别于接种后第1、3、7、14及21天进行屠宰,收集血清,检测血清中SOD、GSH-Px活性以及MDA含量的变化。结果显示:接种后第1、3、7及21天,试验组SOD及GSH-Px活性均显著高于对照组(P<0.05),试验组及对照组中MDA含量差异不显著;组内不同时间点间比较表明,SOD、GSH-Px活性及MDA含量均存在波动性。由结果可知,肠炎沙门菌感染后鸡血清SOD、GSH-Px活性增强,提高了机体抗氧化能力和清除过氧化物的能力,保护了细胞免受损伤。同时血清SOD、GSH-Px活性及MDA含量波动变化表明机体对SE感染的氧化损伤调控具有时效性。
- 吴桂贤刘丽英王莎莎刘肖意王会萃唐辉李显耀
- 关键词：SPF鸡肠炎沙门菌
- 六个鸡品种CLOCK基因遗传多态性研究
- 1引言近日节律是普遍存在于生物体内的节律现象。该节律在内因和外因的共同作用下表现出以24小时为周期的特点。其内在基础为一系列具有正向或负向调节功能的节律基因及其产物,包括CLOCK、Bmall、Per1、Per2、Per...
- 张懋志刘肖意李显耀
- 关键词：CLOCK基因多态性
- 文献传递
- 鸡CLOCK基因在不同组织中的表达分析
- 1引言CLOCK基因是一种与生物节律相关的基因,对维持正常的近日节律起着关键作用,位于鸡的第四号染色体上,并且其表达在鸡体内呈现一定的节律性。有研究发现,CLOCK基因与鸡空肠弯曲杆菌感染抗性存在相关性,但其作用机制尚不...
- 刘肖意张懋志李显耀
- 关键词：CLOCK基因MRNA
- 文献传递
- 肠炎沙门氏菌接种对雏鸡免疫器官指数的影响被引量：7
- 2015年
- 为探讨家禽对肠炎沙门氏菌感染的遗传免疫效应,本研究选用济宁百日鸡阴性个体为试验材料,用肠炎沙门氏菌进行接种,分别在接种后第1、3、7、14和21天称重屠宰,采集脾脏,胸腺和法氏囊等组织样品并称重。试验结果显示,肠炎沙门氏菌感染能抑制鸡体重的增加,但不显著。而对脾脏的影响主要体现在接种菌后第7天,其器官指数在肠炎沙门氏菌接种后降低0.04%;接种后第21天,试验组法氏囊指数比对照组显著增加;胸腺在接种后第21天前,细菌对其影响较小,但在接种后第21天,器官指数显著降低。本研究结果初步揭示了肠炎沙门氏菌感染对雏鸡体重和免疫器官的影响,这些作用因接种后的不同时间而有差异,为今后肠炎沙门氏菌感染家禽的机制研究提供了理论依据。
- 王莎莎刘丽英吴桂贤唐辉刘肖意张浩陆诗海李显耀
- 关键词：肠炎沙门氏菌免疫器官指数济宁百日鸡
- 抗凝剂EDTA-Na_2对家禽血液指标及基因组DNA的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:分析不同浓度的抗凝剂EDTA-Na2对家禽血液指标及基因组DNA抽提的影响。方法:采集鸡血,分别加入0.6(A组)、0.9(B组)、1.2(C组)、1.5(D组)、1.8(E组)和2.1(F组)mg/mL的EDTA-Na2,立即检测白细胞总数(WBC)、淋巴细胞(LYM)、中间细胞(MID)、粒细胞(GRAN)、红细胞总数(RBC)、血红蛋白(HGB)、血红蛋白含量(MCH)和血小板总数(PLT),用SPSS软件分析检测数据;用酚-氯仿法提取添加不同量抗凝剂的血液基因组DNA,并进行PCR扩增,基因组DNA和PCR产物用琼脂糖凝胶电泳检测。结果:A组样品出现肉眼可见的凝块,B组有2/7样品有凝集现象,C、D、E和F组均无凝集现象。A组凝集现象严重无法进行血液指标测定,其余5组样品中,对于RBC和HGB指标,C组与B组相比无显著性差异,与D、E、F组差异极显著(P<0.01);对于PLT,C组与B组相比无显著性差异,与D、E、F组差异显著(P<0.05);WBC无显著变化。除A组外,各组均能获得质量较好的基因组DNA,并能扩增出目的条带。结论:除A组外,不同浓度的EDTA-Na2对基因组DNA提取和PCR扩增无影响。以EDTA-Na2作为禽血抗凝剂时,建议用量应不低于1.2 mg/mL。
- 齐玉凯孙钰刘丽英李显耀
- 关键词：抗凝剂血液指标基因组DNAPCR扩增
- 肠炎沙门菌感染对鸡盲肠组织DNA甲基化的影响被引量：1
- 2016年
- 为探讨肠炎沙门菌感染对鸡盲肠组织甲基化的影响,本研究选用2日龄肠炎沙门菌阴性寿光鸡和SPF白来航为试验材料,用肠炎沙门菌进行接种,接种后第1、3、14和21天采集盲肠组织样品提取DNA,进行甲基化水平检测。结果显示,肠炎沙门菌感染后第3天和第14天,寿光鸡基因组甲基化水平显著降低,感染后不同时间点,对照组和试验组甲基化水平均降低,且第21天对照组甲基化水平显著低于第1、3和14天;感染后各时间点,SPF鸡盲肠组织甲基化水平均低于对照组,但没有达到显著性水平,感染后不同时间点,对照组和试验组的甲基化水平均有所升高。本研究初步揭示了肠炎沙门菌感染抑制盲肠组织全基因组甲基化,这种抑制作用受遗传背景和感染后时间的影响,为今后基因组甲基化在沙门菌感染中的调控机制提供了理论依据。
- 王莎莎刘丽英吴桂贤刘肖意唐辉李显耀
- 关键词：肠炎沙门菌寿光鸡SPF鸡
- 鸡CLOCK基因在不同组织中的表达被引量：3
- 2015年
- CLOCK基因是一种与生物节律相关的基因,对维持正常的近日节律起重要作用。本研究旨在分析鸡CLOCK基因在不同组织间的表达以及在同一组织中的节律性表达情况。根据鸡CLOCK基因mRNA序列(登录号:NM_204174)设计特异性引物,利用QRT-PCR方法,检测早上(06:00)、中午(12:00)、傍晚(18:00)3个时间点CLOCK基因在下丘脑、心脏、肝脏、脾脏等17种组织中的表达。结果表明:鸡CLOCK基因在各组织中均有表达,在胸肌中的表达量极显著高于其他各组织(P<0.01),为心脏表达量的1.99倍;在同一种组织不同时间点的表达呈现出一定的节律性,心脏、肝脏、肌胃中表达量持续升高,下丘脑、回肠、空肠、盲肠、腺胃等先升高后降低,且在空肠、盲肠、腺胃中表现出显著的节律性,脂肪中先降低后升高,脾脏、卵巢中持续下降。结果显示,鸡CLOCK基因表达存在时空特异性,并呈现较强的节律性。
- 刘肖意张懋志刘丽英李显耀
- 关键词：CLOCK基因MRNA荧光定量PCR
- 鸡TLR4突变位点对蛋白结构的影响及其遗传多样性
- 2013年
- 为研究TLR4不同SNPs位点对TLR4蛋白结构的影响及其在不同鸡种中的遗传变异,采用直接测序法发掘TLR4基因外显子中的SNPs,分析每个SNP位点对TLR4蛋白结构的影响,并检测对蛋白结构影响较大的两位点在不同鸡种中的遗传多样性。结果表明,在7个鸡群中共发现了17个SNPs;C77T和G247A位点对TLR4蛋白功能影响较大;C77T位点在汶上芦花鸡偏离Hardy-Weinberg平衡,在其它4个地方鸡种和2个商业品种都处于Hardy-Weinberg平衡,其多态信息含量在寿光鸡最高;G247A位点在5个地方鸡种中均处于Hardy-Weinberg平衡状态,而在两个商业品种偏离Hardy-Weinberg平衡,其多态信息含量在寿光鸡最低。本研究表明,TLR4基因C77T和G247A位点在7个鸡群中具有不同程度的遗传多样性,推测与该基因的功能存在相关。
- 孙钰齐玉凯刘丽英李显耀
- 关键词：蛋白结构
