国家自然科学基金(81170043) 作品数:6 被引量:52 H指数:2 相关作者: 冉丕鑫 李冰 邹威凤 罗秋平 赵东兴 更多>> 相关机构: 广州医科大学 广州医学院第一附属医院 广州医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
尼古丁受体对尼古丁刺激大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响 2014年 目的探讨尼古丁受体在尼古丁刺激大鼠气道平滑肌细胞(RASMCs)增殖中的作用。方法分别设计相应的RNA引物,应用RT-PCR实验,观察RASMCs上存在的尼古丁受体(n Ach Rs)亚单位情况;应用细胞计数法检测尼古丁受体非特异性拮抗剂MCA和α7尼古丁受体特异性拮抗剂MG624对尼古丁作用的RASMCs增殖作用的影响;EDU掺入法测定应用尼古丁受体拮抗剂MCA和MG624对尼古丁作用的RASMCs DNA复制活性的影响。结果RT-PCR实验证实大鼠气道平滑肌细胞上存在n Ach Rs亚单位,分别是α1、4、7、9、10,β1、2、4。细胞计数法检测发现尼古丁受体拮抗剂MCA、MG624均可以抑制尼古丁的促增殖作用,细胞数量明显下降,与尼古丁单独作用组比较差异有统计学意义(P<0.05);EDU检测显示尼古丁受体拮抗剂MCA和MG624均可以抑制尼古丁的作用,使DNA复制活性降低,细胞复制水平下降,与尼古丁单独作用组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论尼古丁能够通过尼古丁受体介导促进大鼠气道平滑肌细胞的增殖。 何芳 冉丕鑫 李冰关键词:尼古丁 尼古丁受体 增殖 木材烟雾凝聚物对人气道平滑肌细胞的弱增殖和强坏死效应 2013年 目的观察木材烟雾凝集物(WSC)对人气道平滑肌细胞(HASMC)增殖与坏死的影响。方法原代培养的HASMC取2至8代细胞,分为对照组、WSC组和烟草烟雾凝集物(CSC)组,每组4个复孔。用细胞毒性检测试剂盒检测细胞活性,用核酸类似物标记检测细胞增殖试剂盒和流式细胞术检测增殖期(s期)细胞比例并分析细胞周期,以荧光定量PCR和Westernblot法定量检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达。用膜联蛋白-V/碘化丙啶双荧光染色法鉴别细胞坏死和凋亡。多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD—t检验。结果细胞活性峰浓度时,WSC组和CSC组的细胞活性[(126±12)%和(142±11)%]均显著高于对照组[(100±0)%],细胞活性抑制浓度时(WSC10mg/L、CSC60mg/L),WSC组和CSC组的细胞活性(86%和76%)均显著低于对照组[(100±0)%],差异均有统计学意义(q值为3.63~9.33,均P〈0.05)。WSC1mg/L组细胞增殖比例和cyclinD1蛋白表达量[(124±20)%和1.31+0.64]显著高于对照组[(100±0)%和1.0±0.0].差异均有统计学意义(g值分别为5.85和5.91,均P〈0.05),S+G:/M期细胞比例和cyclinD1的mRNA表达量[(103±4)%和1.18±0.21]与对照组[(100±0)%和1.0±0.0]比较,差异均无统计学意义(q值分别为1.16和2.05,均P〉0.05);CSC10mg/L组细胞增殖比例、cyclinD1蛋白表达量、S+G:/M期细胞比例和cyclinD1的mRNA表达量分别为(204±45)%、1.80±0.25、(140±6)%和1.48±0.2,均显著高于WSC1mg/L组和对照组[(100±0)%、1.0±0.0、(100±0)%和1.0±0.01。WSC10mg/L组坏死细胞比例[(13.39±0.15)%]均显著高于对照组[(1.57±0.41)%]和CSC60mg/L组[(6.61±1.91)%],CSC40mg/L组凋亡细胞比例[(61.8±10.6)%]均显著高于对照组[(0.0±0.0)%] 潘仪玲 李冰 冉丕鑫关键词:肌细胞 平滑肌 细胞增殖 慢性阻塞性肺疾病社区综合防治管理平台的建立及应用效果评价 被引量:46 2017年 目的建立适合我国国情的慢阻肺社区综合防治管理平台,并评估其在慢阻肺综合防治中的效果。
方法基于电子管理系统建立慢阻肺社区综合防治管理平台,包括慢阻肺的初筛、电子健康档案、慢阻肺分级管理与双向转诊等功能模块。在粤北农村以抽签法随机选取2个乡镇作为实验和对照社区,两社区均选择常驻家庭,每户随机选取1位≥40岁居民纳入试验,随访观察2年。实验社区入选人数460例,实际完成2年管理和随访340例,其中慢阻肺患者45例、高危人群117例和一般人群178例;对照社区入选380例,实际回访212例,其中慢阻肺患者39例、高危人群68例和一般人群105例。在实验社区基于慢阻肺社区综合防治管理平台开展慢阻肺初筛、分级管理和双向转诊等卫生服务。对照社区仅提供基本诊断与治疗服务。通过比较两个社区中人群的肺功能变化、急性加重情况、生活质量和危险因素改变情况等,以评价该管理平台的效果。
结果实验社区的随访率、戒烟率、现吸烟中吸烟量减少者、被动吸烟减少者和改用清洁能源烹饪者占比均显著高于对照社区(分别为73.9%和55.8%,70.8%和9.1%,24.2%和7.1%,32.6%和3.5%,67.8%和3.2%,P〈0.05)。实验后实验社区的人群在"了解慢阻肺"、"慢阻肺常见症状"、"慢阻肺是否可以防治"和"肺功能检查"等知晓率均较实验前升高(分别为84.7%和30.0%,76.4%和7.6%,71.5%和6.8%,72.1%和27.4%,P〈0.05),且明显高于对照社区(分别为84.7%和73.6%,76.4%和9.4%,71.5%和7.1%,72.1%和32.5%,P〈0.05)。实验社区慢阻肺患者的FEV1、FEV1占预计值%较实验前显著增加(分别为1.88±0.71和1.74±0.64, 75.6±25.0和69.4±20.5,P〈0.05);实验社区GOLD 1级慢阻肺患者实验前后FEV1和FEV1占预计值%的差值显著大于对照社区(分别为0.17±0.24和-0.09±0.33, 10.7±15.3和� 赵东兴 陈淑云 周玉民 李晓尘 邹威凤 陈戏墨 冉丕鑫关键词:肺疾病 慢性阻塞性 管理平台 尼古丁对人气道上皮细胞基因表达谱变化的影响 被引量:1 2012年 目的体外观察尼古丁作用于原代人小气道上皮细胞后全基因表达谱的变化,了解其对细胞生理和细胞表型的影响。方法将原代人气道上皮细胞分为实验1组、实验2组和对照组1组、对照2组,每组细胞密度为1×10^8/L。用生理浓度尼古丁(1×10^-5mol/L)分别处理4h和48h后抽提RNA。通过基因芯片检测尼古丁作用前后的差异表达基因,从中选取部分与上皮问质转分化相关的差异基因,用荧光定量PCR法进行验证。结果实验1组经尼古丁处理4h后,表达上调的基因为63个,表达下调的基因为44个,主要是细胞对外界刺激产生应激反应的有关基因;实验2组经尼古丁处理48h后,表达上调的基因为860个,表达下调的基因为582个。对差异基因进行功能分析和差异基因通路分析的结果表明,差异基因涉及胚胎发育、细胞极性维持、细胞与细胞黏附等与细胞转分化相关的重要生理过程和信号转导通路。对个别基因的分析结果表明,尼古丁可以下调上皮角蛋白、上皮黏蛋白等具有上皮特征的基因,上调纤维连接蛋白1、N-钙黏蛋白等具有间质细胞特征的基因。荧光定量PCR验证的基因差异表达与基因芯片结果变化趋势一致。结论尼古丁能够刺激原代人气道上皮细胞与上皮间质转分化发生过程有关基因的表达水平。 杨文静 罗秋平 李冰 冉丕鑫关键词:尼古丁 上皮细胞 寡核苷酸序列分析 上皮间质转分化 木材烟雾凝集物刺激人气道上皮细胞发生转分化样改变 被引量:3 2014年 目的观察木材烟雾凝集物(WSC)对人支气管上皮细胞(HBEC)间充质转分化(EMT)样改变的影响。方法WSC组和烟草烟雾凝集物(CSC)组分别用5、10、20、40和50mg/L的WSC和CSC刺激HBEC7d,空白对照组仅用细胞培养基培养刺激HBEC7d,每组细胞数为1.2×106/ml。采用细胞计数试剂盒.8检测细胞总体活性。用WSC最大影响活性剂量(10mg/L)刺激HBEC7d,观察细胞形态,用Westernblot法和细胞免疫荧光技术检测EMT标记物E-钙黏蛋白、I型胶原、波形蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平。多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验。结果10mg/L的WSC吸光度值最高(2.36±0.07),部分细胞形态由鹅卵石状向长梭形、多角形或星形改变,E一钙黏蛋白表达吸光度值(0.30±0.05)显著低于空白对照组(0.59±0.08),差异有统计学意义(F=22.07,P〈0.05),但与10mg/L的CSC组吸光度值(0.30±0.05)比较,差异无统计学意义(F=22.07,P〉0.05);10mg/L的WSC组I型胶原相对含量吸光度值(0.58±0.04)显著高于空白对照组(0.26±0.02),差异有统计学意义(F=119.72,P〈0.05),与CSC组(0.60±0.02)比较,差异无统计学意义(F=119.72,P〉0.05);WSC组和CSC组MMP-9表达吸光度值(0.56±0.08和0.54±0.10)均显著高于空白对照组(0.19±0.03),差异均有统计学意义(F=21.79,均P〈0.05)。结论WSC能够刺激HBEC出现转分化样改变。 李雯曦 邹威凤 李冰 冉丕鑫关键词:木材 上皮细胞 尼古丁诱导人气道成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化 被引量:2 2012年 吸娴是COPD的主要致病因素,气道承塑足COPD患者出现持续气流受限的主要病理基础。尼古丁占炯革生物碱总量的95%以上,尼古丁对COPD发病,特别是对气道曩塑有着重要影响。 罗秋平 洪玮 李冰 冉丕鑫关键词:尼古丁 细胞转分化 病理基础 气流受限