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猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因真核表达质粒pcDNA3.1/TSO45-4B的构建被引量：7: 2006年; 目的构建表达猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因TSO45-4B的真核表达质粒pcDNA3.1/TSO45-4B。方法全基因合成TSO45-4B的基因序列,并利用PCR扩增该基因序列,将其插入真核表达载体pcDNA3.1,经酶切、测序鉴定。结果经酶切和测序鉴定表明所构建的重组表达质粒中含有TSO45-4B基因。结论成功构建pcDNA3.1/TSO45-4B重组质粒。; 方强孙新夏惠徐胜贵胡守锋杨小迪陈兴智王雪梅; 关键词：带绦虫六钩蚴重组质粒

抗猪带绦虫六钩蚴兔血清的制备及重组质粒pcDNA3.1/TSO45-4B在小鼠骨骼肌的表达被引量：6: 2006年; 目的:制备抗六钩蚴全虫可溶性抗原的兔血清,观察本室制备的猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因TSO45-4B的重组核酸疫苗pcDNA3.1/TSO45-4B经肌肉接种后在宿主体内的表达。方法:用次氯酸钠法孵化六钩蚴,Dot-Blo、tELISA检测兔血清中特异性抗体及滴度;以pcDNA3.1/TSO45-4B进行体内转染,继之免疫组化法观察其在鼠体骨骼肌的表达。结果:抗六钩蚴兔血清多克隆抗体制备成功,抗体效价为1∶20 100;免疫组化染色后在重组质粒注射部位肌肉组织的肌纤维内显示阳性的棕黄色分泌颗粒。结论:重组质粒在小鼠骨骼肌内成功地表达为猪囊尾蚴病多基因DNA疫苗的研制提供了体内表达的依据之一。; 徐胜贵方强孙新夏惠杨小迪胡守锋陈兴智王雪梅; 关键词：带绦虫六钩蚴骨骼肌

猪囊尾蚴病重组DNA疫苗pcDNA3.1-TSO45-4B在小鼠体内的表达及诱导的细胞免疫效应被引量：3: 2007年; 目的观察基于六钩蚴期的猪囊尾蚴病基因疫苗pcDNA3.1-TSO45-4B在小鼠体内的表达及诱导的小鼠细胞免疫应答。方法将真核重组表达质粒pcDNA3.1-TSO45-4B肌注小鼠,RT-PCR方法扩增出目的条带;ELISA方法检测小鼠血清细胞因子IL-2、IL-4及IFN-γ含量。结果RT-PCR产物为单一条带,大小为456bp,与TSO45-4B大小一致。免疫小鼠第2周细胞因子含量达到较高水平,第4周达到最高水平,第8周开始下降。结论基于猪囊尾蚴保护性抗原TSO45-4B的DNA疫苗能在小鼠体内表达并有效诱导细胞免疫效应。; 王媛媛孙新方强胡守锋杨小迪张莺莺陈兴智王雪梅夏惠; 关键词：猪囊尾蚴细胞免疫

次氯酸钠法孵化猪带绦虫卵的观察被引量：1: 2004年; 目的 :观察次氯酸钠作用下猪带绦虫卵的孵化过程。方法 :以 1 .0 %次氯酸钠溶液孵化猪带绦虫虫卵 ,以显微镜进行动态观察。结果 :猪带绦虫虫卵胚膜被溶解 ,六钩蚴逸出。结论; 方强孙新夏惠胡守锋; 关键词：猪带绦虫虫卵次氯酸钠孵化

猪带绦虫孕节内虫卵数量的观察被引量：1: 2003年; 目的 :了解猪带绦虫成虫成熟孕节内虫卵数量。方法 :对 10条猪带绦虫的 5 0片成熟孕节以胃蛋白酶法消化 ,收集虫卵 ,以细胞计数板进行计数。结果 :猪带绦虫每节成熟孕节内虫卵数量不等 ,最少为 5 5 0个 ,最多为 172 5 0 0个 ,平均为 2 6 891个。不同虫体间孕节内虫卵数的差异较同一虫体间的差异显著。结论 :猪带绦虫成虫成熟孕节内虫卵数量不等 ,可有悬殊的差别。; 方强孙新夏惠胡守锋沈继龙; 关键词：猪带绦虫

次氯酸钠法孵化猪带绦虫卵的实验研究被引量：3: 2004年; 目的 :探索次氯酸钠法孵化带绦虫卵的孵化规律和适宜孵化条件。方法 :以 7种浓度的次氯酸钠溶液孵化带绦虫卵 ,观察不同时间的虫卵孵化率和六钩蚴存活率。同时观察 1 0 %次氯酸钠溶液在 3个不同孵化时间的孵化率和六钩蚴存活率。结果 :在一定浓度范围内 ,孵化率随孵化时间而升高 ,但过长的时间会导致六钩蚴存活率下降。达到最高孵化率的孵化时间随次氯酸钠溶液升高而缩短 ,但较高浓度下六钩蚴存活率下降 ,高浓度则虫卵迅速完全崩解。在 0 4%～ 1 0 %的浓度 ,孵化时间为 3～ 6min时 ,虫卵孵化率和六钩蚴存活率均较高。结论 :次氯酸钠溶液孵化带绦虫卵的孵化率与孵化时间呈正相关关系 ,孵化时间与孵化用次氯酸钠溶液浓度呈负相关关系 ;在所采用的实验条件下 ,以 0 4%～ 1 0 %的浓度 ,孵化 3～ 6min可达到较好的孵化效果。; 方强孙新夏惠胡守锋沈继龙; 关键词：次氯酸钠猪带绦虫虫卵孵化

一氧化氮对猪带绦虫六钩蚴细胞毒作用的研究被引量：3: 2004年; 目的　研究一氧化氮 (NO)对猪带绦虫六钩蚴杀伤作用。方法　以LPS诱导离体的小鼠腹腔巨噬细胞 ,使其产生NO ;加入猪带绦虫六钩蚴 ,测定 4 8h内六钩蚴的死亡率 ;分别用诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)的抑制剂地塞米松 (Dexam ethasone ,DXS)和左旋硝基精氨酸 (Nω -nitro -L -arginine ,L -NNA)抑制NO产生 ,与未加抑制剂组比较六钩蚴死亡率的变化。结果　LPS可有效诱导巨噬细胞产生NO ,2 0× 10 5巨噬细胞产生的NO浓度为 119 6 4 0 0 +5 115 4 μmol/L ,相应的杀虫率为 79 83%。加入抑制剂DXS和L -NNA后 ,巨噬细胞的NO产量均明显降低 ,其杀虫率也明显降低。结论　活化巨噬细胞产生的NO对猪带绦虫六钩蚴有杀伤作用。; 方强孙新夏惠胡守锋沈继龙; 关键词：猪带绦虫六钩蚴一氧化氮细胞毒作用

酸性胃蛋白酶法收集猪带绦虫虫卵的实验研究被引量：4: 2004年; 目的　建立收集绦虫卵的新方法。　方法　用 1%酸性胃蛋白酶溶液消化猪带绦虫孕节 ,观察不同条件下消化孕节收集虫卵的时间 ;比较酸性胃蛋白酶法与物理法收集的虫卵数量及其孵化后六钩蚴存活率 ;观察 1%酸性胃蛋白酶消化孕节 40min和 12 0min收集的虫卵以次氯酸钠法孵化后虫卵孵化率及六钩蚴存活率。　结果　 1%酸性胃蛋白酶振荡条件下消化孕节收集虫卵时间短于普通条件下的时间 (P <0 .0 1) ,消化剪碎孕节时间短于消化完整孕节时间 (P<0 .0 1) ;酸性胃蛋白酶法收集虫卵的数量较物理法提高 6.975 % ;酸性胃蛋白酶法和物理法收集的虫卵以次氯酸钠法孵化后孵化率及六钩蚴存活率差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;1%酸性胃蛋白酶消化孕节 40min和 12 0min收集的虫卵以次氯酸钠法孵化后孵化率及六钩蚴存活率差异无显著性 (P >0 .0 5 )。　结论　成功建立了较为适用的新的猪带绦虫虫卵收集方法—酸性胃蛋白酶法。; 方强孙新夏惠胡守锋; 关键词：物理法

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安徽省高校省级自然科学研究项目(2001kj174)