安徽省高校省级自然科学研究项目(2001kj170)
- 作品数:5 被引量:20H指数:3
- 相关作者:章尧王惠禹莉陈昌杰周继红更多>>
- 相关机构:蚌埠医学院蚌埠医学院第一附属医院蚌埠医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金:安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 同型半胱氨酸对ECV-304细胞NO和ROS形成的影响被引量:12
- 2005年
- 目的 :观察同型半胱氨酸 (Hcy)对ECV 30 4细胞产生一氧化氮 (NO)及其对细胞内活性氧 (ROS)产生的影响。 方法 :将不同浓度的Hcy与ECV 30 4细胞体外共培养 2 4h ,硝酸还原酶法检测 3种一氧化氮合酶 (NOS)激动剂前后各组NO含量 ;流式细胞术检测细胞荧光强度 ,以反映ROS水平。结果 :0 .5 0、1.0 0mmol/LHcy作用 2 4h时NO量明显低于对照组(P <0 .0 1) ;加入 3种NOS激动剂刺激后 ,仍显示Hcy对ECV 30 4细胞释放NO反应的抑制作用 ,1.0 0mmol/LHcy组与对照组和低浓度组差异均有显著性 (P <0 .0 1)。 0 .5 0、1.0 0mmol/LHcy组的荧光强度明显高于对照组和低浓度组 (P <0 .0 1)。结论 :Hcy可促进血管内皮细胞内ROS的产生 ,并抑制NO的形成 ,且呈剂量
- 周继红章尧
- 关键词:半胱氨酸ECV-304细胞一氧化氮活性氧
- 同型半胱氨酸对A7r5细胞增殖及MMP-9表达的影响
- 2010年
- 观察同型半胱氨酸(Hcy)对大鼠胸主动脉平滑肌细胞(A7r5细胞)增殖及对基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。0.25、0.50和1.00 mmol/LHcy分别作用A7r5细胞48 h,倒置显微镜下观察细胞的形态学改变;RT-PCR检测MMP-9 mRNA的表达,Western blot检测MMP-9蛋白的表达。随着Hcy浓度的升高,细胞数目逐渐增多,体积增大,生长旺盛,呈增殖表现。不同浓度Hcy处理组MMP-9 mRNA及蛋白的表达均逐渐增加,各实验组与对照组差异均有统计学意义(P<0.05)。同时显示正常对照组中MMP-9表达相对较少,为(3.60±1.42)%、(1.60±0.82)%。Hcy能促进A7r5细胞增殖,正常A7r5细胞中MMP-9表达较少;Hcy可诱导A7r5细胞MMP-9的表达,这一效应可能是Hcy致心血管疾病的分子机制之一。提示MMP-9可能成为干预心血管疾病的靶点。
- 禹莉章尧陈昌杰王惠凌云志
- 关键词:同型半胱氨酸MMP-9
- 同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞株ECV-304生长的抑制作用被引量:3
- 2005年
- 目的 :观察同型半胱氨酸 (Hcy)对人脐静脉内皮细胞株ECV 30 4细胞生长的影响 ,探讨高同型半胱氨酸血症 (HHCY)致动脉粥样硬化 (As)的机制。方法 :将不同浓度Hcy与ECV 30 4细胞体外共培养不同时间 ,倒置显微镜下观察细胞形态 ,MTT法检测细胞生长抑制率 ,3 H TdR掺入法检测细胞DNA合成。结果 :显微镜见对照组细胞呈单层鹅卵石样紧密排列 ,而实验组随Hcy浓度的升高及作用时间的延长 ,细胞排列杂乱 ,聚集成团。低浓度Hcy对细胞生长的抑制作用不明显 ,5 .0、10 .0mmol/LHcy对细胞生长呈现抑制作用 ,且两组浓度作用 72h的生长抑制率高于作用 4 8h(P <0 .0 1)。 5 .0、10 .0mmol/LHcy作用 4 8h、72h ,3 H TdR掺入抑制率高于相应对照组和低浓度组 ,且作用 72h的掺入抑制率显著高于 4 8h(P <0 .0 1)。结论 :Hcy对VEC具有直接损伤作用 ,可以时间及剂量依赖方式抑制ECV 30 4细胞的生长及DNA的合成。
- 周继红章尧孙俊杰李伟
- 关键词:动脉粥样硬化同型半胱氨酸ECV-304细胞
- 氯化镁对同型半胱氨酸诱导的A7r5细胞增殖及MMP-2、MMP-9表达的影响
- 2009年
- 观察MgCl2对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞(A7r5细胞)增殖及基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9表达的影响,旨在探讨镁剂治疗心血管疾病的分子机制。采用细胞培养、MTT法、Western印迹以及RT-PCR等方法,研究0.5mmol/LHcy分别与不同浓度的MgCl2共同作用A7r5细胞48h后,MgCl2对Hcy诱导的A7r5细胞增殖及MMP-2、MMP-9的mRNA及其蛋白质表达的影响。MTT法结果显示,随着MgCl2浓度增加,吸光度值逐渐减少,各实验组与对照组差异均有统计学意义(P<0.05);MgCl2使Hcy诱导的A7r5细胞MMP-2、MMP-9的mRNA和蛋白质表达均减少,其中2.0、3.0mmol/LMgCl2组抑制作用显著(P<0.05)。研究结果表明Hcy促进A7r5细胞增殖的效应能被MgCl2抑制;MgCl2能抑制Hcy诱导的A7r5细胞MMP-2、MMP-9的表达。这一效应可能是镁剂治疗心血管疾病的分子机制之一。
- 禹莉陈昌杰王惠章尧
- 关键词:MGCL2同型半胱氨酸MMP-2MMP-9
- 同型半胱氨酸对A_7r_5细胞增殖及MMP-2表达的影响被引量:5
- 2008年
- 目的:观察同型半胱氨酸(Hcy)对大鼠胸主动脉平滑肌细胞(A7r5细胞)增殖及基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响。方法:分别用0、0.25、0.5、1 mmol/L Hcy作用A7r5细胞48 h后,细胞计数及MTT法检测A7r5细胞的增殖情况,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MMP-2 mRNA的表达,免疫印迹法(Western blot)检测MMP-2蛋白的表达。结果:随着Hcy浓度的增加,A7r5细胞数目和吸光度(OD)值呈剂量依赖性增加,其中0.25、0.5、1 mmol/L Hcy组与对照组差异均有统计学意义(P〈0.05-P〈0.01)。MMP-2 mRNA的表达随着Hcy浓度的增加而增加,呈剂量依赖性,各实验组与对照组差异均有统计学意义(P〈0.05)。Hcy呈剂量依赖性上调A7r5细胞MMP-2蛋白的表达,各实验组与对照组差异均有统计学意义(P〈0.05-P〈0.01)。结论:Hcy在一定范围内呈剂量依赖性促进A7r5细胞增殖,可在蛋白及mRNA水平使A7r5细胞MMP-2表达呈剂量依赖性增加,这一效应可能是Hcy致动脉粥样硬化的分子机制之一。
- 禹莉章尧陈昌杰高绪锋王惠
- 关键词:动脉粥样硬化同型半胱氨酸增殖细胞外基质基质金属蛋白酶2