辽宁省自然科学基金(201102126)
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
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- 铜绿假单胞菌诱导巨噬细胞凋亡与细胞周期的关系
- 2011年
- 目的探讨铜绿假单胞菌(PA)诱导巨噬细胞凋亡与细胞周期的关系。方法选用J774细胞作为PA上清液感染的体外巨噬细胞模型,使细胞与15%的PA上清液混合,在37℃水浴中培养3、6、9 h,并以此为实验组,同时设对照组(不含PA)。用吉姆萨染色技术进行J774细胞凋亡检测,用流式单染技术观察PA诱导巨噬细胞凋亡与细胞周期的关系。结果 PA上清液与J774细胞培养3 h即有少数细胞发生凋亡,随着干预时间延长,凋亡细胞数量逐渐增多;不同时间PA上清液能使J774细胞阻滞于G1期,G1期细胞百分比增加,S期细胞百分比明显下降,呈时间依赖性,且与对照组比较P均<0.05。结论 PA上清液可以诱导细胞凋亡,呈时间依赖性;PA上清液能够阻止J774细胞从G1期向S期转换。
- 柴文戍李颖
- 关键词：铜绿假单胞菌细胞周期细胞凋亡
- 2009—2011年辽宁省某医院革兰阳性菌耐药性监测结果分析被引量：2
- 2013年
- 目的了解辽宁医学院附属第一医院2009—2011年3年间临床分离的革兰阳性菌株的分布及耐药情况,指导临床合理使用抗菌药物。方法对所分离的革兰阳性菌株采用最低抑菌浓度(MIC)法进行药敏试验,按美国临床实验室标准化研究所(CLSI)2011年标准判定药敏试验结果,并用WHONET 5.6软件进行数据分析。结果共分离出非重复革兰阳性菌718株,其中葡萄球菌属495株(占68.94%),肠球菌属212株(占29.53%),链球菌属11株(占1.53%)。革兰阳性菌的检出部位来自尿液187株(占26.04%)、痰液164株(占22.84%)、创口分泌物113株(占15.74%)、血液78株(占10.86%)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为33.3%(51/153)和84.7%(288/340),未发现对万古霉素耐药的葡萄球菌属;未发现对哌拉西林/他唑巴坦及阿莫西林/克拉维酸耐药的屎肠球菌;万古霉素耐药肠球菌(VRE)分离率仍很低,粪肠球菌和屎肠球菌分别为5.0%(5/101)和5.1%(5/99);屎肠球菌对多数药物的耐药率均高于粪肠球菌。结论革兰阳性菌耐药形势严峻,应重视细菌耐药性监测及抗菌药物的合理使用。
- 卫燕丽柴文戍
- 关键词：革兰阳性菌耐药性抗菌药物
- S-亚硝基-N-乙酰半胱氨酸对绿脓菌素感染鼠体内的病理形态及氧化作用的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨S-亚硝基-N-乙酰半胱氨酸(SNAC)对绿脓菌素(PCN)感染鼠体内的病理形态及氧化作用的影响。方法 90只健康雄性SD大鼠采用随机数字表法分为3组,每组30只。对照组和PCN组大鼠分别腹腔注射1 ml/100 g 0.9%氯化钠溶液,SNAC组大鼠腹腔注射SNAC(1 ml/100 g)。用1%戊巴比妥钠溶液(40 mg/kg)行大鼠腹腔注射麻醉,对照组气管内接种0.9%氯化钠溶液0.2 ml,PCN组和SNAC组分别气管内接种PCN 0.2 ml(6×108CFU/ml)。分别于6、18、30、48、72 h观察大鼠一般状态,处死大鼠,取支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,观察肺组织形态学改变,计算BALF细胞总数和中性粒细胞计数,检测活性氧(ROS)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、白介素8(IL-8)含量。结果 PCN组鼠感染6 h后出现精神萎靡、食欲不振、寒颤、发热、呼吸困难等,感染30 h时最明显;肺组织明显充血、水肿,大量炎性细胞浸润。大鼠PCN感染后6、18、30、48、72 h BALF细胞总数、BALF中性粒细胞计数、ROS含量、SOD活性、IL-8含量比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中PCN组和SNAC组各时间点BALF细胞总数、BALF中性粒细胞计数、ROS含量、IL-8含量较对照组均增高,SOD活性较对照组均降低,SNAC组各时间点BALF细胞总数、BALF中性粒细胞计数、ROS含量、IL-8含量较PCN组均降低,SOD活性较PCN组均增高(P<0.05)。结论 SNAC对PCN感染鼠体内氧化损伤具有一定的保护作用。
- 刘伟柴文戍
- 关键词：绿脓菌素乙酰半胱氨酸氧化性应激
- 绿脓菌素诱导J774细胞氧化损伤及N-乙酰半胱氨酸对其保护作用的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨绿脓菌素(PCN)诱导J774细胞氧化损伤及N-乙酰半胱氨酸(NAC)对其损伤的保护作用。方法:J774细胞随机分为3个组,(1)正常对照组:未加任何实验药物;(2)模型组:选择不同浓度PCN(10,25,50mg/L)感染J774细胞24h,结合MTT细胞毒性实验结果,选择最佳浓度PCN(25mg/L);(3)NAC干预组:选择NAC(5mmol/L)预处理J774细胞1h,观察NAC对PCN(25mg/L)感染J774细胞(6,12,24h)的影响。应用MTT法测定细胞毒性;应用流式细胞术检测活性氧(ROS)的水平;分别应用试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;应用Western blot方法测定锰超氧化物歧化酶(MnSOD)蛋白表达水平。结果:与正常对照组相比,模型组ROS水平逐渐升高,LDH漏出量增加,MDA含量增加,SOD活性下降,MnSOD蛋白表达逐渐减弱,呈剂量依赖关系;与模型组相比,NAC干预组ROS水平逐渐降低,LDH漏出量减少,MDA含量减少,SOD活性升高,MnSOD蛋白表达逐渐增强,呈时间依赖关系,各组间比较差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论:PCN可以诱导J774细胞氧化损伤,并呈剂量依赖关系;NAC对PCN诱导J774细胞氧化损伤可能具有保护作用。
- 刘丹柴文戍
- 关键词：绿脓菌素N-乙酰半胱氨酸乳酸脱氢酶锰超氧化物歧化酶
- 绿脓菌素诱导分化的U937细胞氧化损伤及抗氧化剂对其保护作用的实验研究
- 2014年
- 目的:探讨绿脓菌素(PCN)诱导U937细胞氧化损伤及抗氧化剂(NAC和PDTC)对其损伤的保护作用。方法选择不同浓度PCN (5,25和50μM)感染佛波酯(PMA)分化的U937细胞24h,选择最佳浓度PCN(25μM)进行感染实验。给予不同浓度的NAC(5,10 or 20 mM)及PDTC (50、100、200μM)预处理U937细胞1h,PCN感染细胞24h后,应用试剂盒进行丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶( LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性以及谷胱甘肽(GSH)含量测定。结果与正常对照组相比,模型组LDH漏出量增加,MDA含量增加,SOD及CAT活性下降,GSH含量下降,呈剂量依赖关系。与模型组相比,NAC及PDTC干预组均呈LDH漏出量减少,MDA含量减少,SOD及CAT活性升高,GSH含量增加,呈浓度依赖关系,组间比较差异有统计学意义。结论 PCN可以诱导U937细胞氧化损伤,并呈剂量依赖关系, NAC及PDTC对PCN诱导J774细胞氧化损伤具有保护作用。
- 李靖刘丹柴文戍
- 关键词：绿脓菌素U937细胞N-乙酰半胱氨酸PDTC
- 铜绿假单胞菌上清液诱导J774细胞凋亡过程中Fas蛋白的表达被引量：3
- 2012年
- 铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa,PA）是医院内感染最常见的致病菌,一旦感染,治疗困难。巨噬细胞是机体重要的免疫防御细胞,细菌侵袭机体组织,首先要避免被巨噬细胞等机体免疫细胞的吞噬、清除。因此激发巨噬细胞凋亡对细菌而言很重要。近来研究显示,PA以剂量依赖和时间依赖的方式诱导U937巨噬细胞凋亡,且与线粒体途径有关[1]。本研究采用J774细胞作为巨噬细胞的模型[2],通过观察PA上清液诱导J774细胞凋亡过程中Fas蛋白的表达,进一步探讨PA上清液诱导J774细胞凋亡的致病机制,为开发新型抗感染药物提供重要的理论依据。
- 孟子卜柴文戍
- 关键词：细胞凋亡铜绿假单胞菌FASFASL
