山西省自然科学基金(2010011047-2)
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 相关作者:徐菁李灵敏乔爱秀王宏伟张翠明更多>>
- 相关机构:山西医科大学山西医科大学第二医院更多>>
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- WT1异构体与白血病发生 发展及预后的关系
- 2013年
- WT1基因作为肿瘤抑制基因参与Wilms瘤的发生。然而.大量研究显示WT1基因作为一种重要的转录调控因子。参与许多肿瘤特别是白血病的发生.其通过两种选择性剪接编码产生四种主要异构体,不同异构体的功能及相互之间的比例与白血病的发生、发展及预后之间的关系逐渐引起人们的关注,本文就此进行综述。
- 王婕徐菁
- 关键词:WT1基因白血病异构体预后WILMS瘤
- WT1异构体比例转变对人白血病细胞株HL-60增殖和凋亡的影响被引量:1
- 2013年
- 目的:探讨WT1异构体比例改变对人白血病细胞株HL-60增殖和凋亡的影响。方法:逆转录获得人WT1(17AA-/KTS-)异构体全长cDNA序列,连接到PCDH1-MCS1-EF1-copGFP慢病毒质粒载体上,酶切和测序证实正确构建重组质粒,建立WT1异构体表达比例改变的单克隆细胞株。MTT法检测细胞增殖活性,形态学观察及Annexin V检测细胞凋亡。结果:成功构建了真核表达载体PCDH1-MCS1-EF1-copGFP-WT1(17AA-/KTS-),转染HL-60细胞后,实时荧光定量RT-PCR和Western blotting显示重组质粒转染细胞中WT1(17AA-/KTS-)mR-NA和蛋白水平明显高于空质粒转染组和正常对照组。重组质粒转染细胞的生长抑制率高于空质粒转染组和正常对照组,差异显著(P<0.05)。加2μmol/L三氧化二砷(As2O3)培养48 h后,形态学观察发现3组细胞都出现了凋亡形态,但重组质粒转染细胞更为明显。流式细胞术结果显示,As2O3作用24 h后,重组质粒转染细胞凋亡率较空质粒转染组和正常对照组细胞升高,差异显著(P<0.05)。结论:增加外源性WT1(17AA-/KTS-)异构体的表达能抑制HL-60细胞增殖,促进As2O3诱导的细胞凋亡。
- 徐菁覃艳红张翠明乔爱秀李灵敏王宏伟
- 关键词:白血病细胞凋亡