国家自然科学基金(81170053)
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
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- 七氟烷预处理对大鼠肺缺血再灌注损伤肺组织细胞自噬水平的影响被引量：2
- 2016年
- 目的探讨七氟烷预处理对大鼠肺缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)肺组织中细胞自噬的影响。方法健康成年雄性SD大鼠75只,采用开胸夹闭左肺门建立IRI模型,将75只大鼠编号后按随机数字表法分为5组:假手术组(Sham),缺血再灌注组(I/R),七氟烷预处理组(SEVO),LY294002组(LY)及七氟烷预处理+LY294002组(PI3K抑制剂)(SEVO+LY),各15只。缺血1 h,再灌注120 min后处死各组大鼠,取出肺组织,检测大鼠肺组织湿/干重比(W/D),Western blot法测定肺组织Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62及p-PI3K表达。结果与Sham组比较,I/R组肺组织发生严重水肿(P<0.05),且肺组织细胞自噬水平增加,自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白表达上调(P<0.05);与I/R组比较,SEVO组肺水肿明显减轻(P<0.05),Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白表达下调,而p-PI3K表达增加(P<0.05),LY组与I/R组比较差异没有统计学意义(P>0.05);与SEVO组比较,SEVO+LY组中肺水肿明显加重,Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白表达上调而p-PI3K表达下调(P<0.05)。结论七氟烷预处理通过激活PI3K信号转导通路,恢复LIRI期间细胞自噬流,减少自噬性细胞死亡从而对肺缺血再灌注损伤起保护作用。
- 邓红高静廖林刘金碧鲁开智郑洪易斌
- 关键词：七氟烷肺缺血再灌注损伤PI3K信号通路
- 梗阻性黄疸患者血清对人肺微血管内皮细胞肌样分化的影响
- 2016年
- 目的评价梗阻性黄疸患者血清对人肺微血管内皮细胞（PMVECs）肌样分化的影响。
方法分离人PMVECs，并传代培养，将培养的人PMVECs分别采用梗阻性黄疸患者血清和健康志愿者血清孵育，于孵育24、48和72 h（T1～3）时在倒置显微镜下观察原代PMVECs形态，采用Western blot法检测PMVECs肌性蛋白（α-SMA、SM-MHC、capolnin）的表达。
结果健康志愿者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA蛋白表达阴性，出现少量SM-MHC表达，梗阻性黄疸患者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达阳性。与健康志愿者血清比较，梗阻性患者黄疸血清孵育PMVECs SM-MHC表达上调（P〈0.05）；与T1时比较，T2，3时梗阻性黄疸血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达上调（P〈0.05）；与T2时比较，T3时梗阻性黄疸患者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达上调（P〈0.05）。
结论梗阻性黄疸患者血清促进PMVECs肌样分化，可能是肺微血管扩张机制之一。
- 陈啟炜杨勇陈兵陈杨李胜王桂兰吴玉龙陈崇会祖宝利易斌鲁开智廖林
- 关键词：血清细胞分化
- 乌司他丁通过上调PPAR-γ抑制低氧诱导的肺血管平滑肌细胞表型转换被引量：1
- 2016年
- 目的探讨乌司他丁对低氧诱导的肺血管平滑肌细胞(PASMCs)表型转化的影响及其分子机制。方法体外培养SD大鼠PASMCs,随机分组4组:正常组(N组),常氧+乌司他丁组(NU组),低氧组(H组),低氧+乌司他丁组(HU组),各组培养24 h后采用免疫荧光检测SM-α-actin和Calponin表达水平,应用CCK-8法、~3H-Td R和Transwell小室检测各组PASMCs增殖和迁移。并分别利用Western blotting和荧光素酶报告质粒检测PPAR-γ蛋白表达和转录活性。采用PPAR-γ抑制剂GW9662进行预处理干预乌司他丁对低氧诱导的PASMCs表型转化的影响,分析干预后PASMCs增殖和迁移改变。结果低氧条件下,乌司他丁能促进PASMCs中SM-α-actin和Calponin的表达(P<0.05),抑制PASMCs的增殖和迁移能力(P<0.05),同时乌司他丁上调PPAR-γ的表达(P<0.05)。采用GW9662预处理后,乌司他丁对低氧诱导的PASMCs表型转换的抑制作用显著下降(P<0.05)。结论乌司他丁通过上调PPAR-γ抑制低氧诱导的PASMCs表型转换。
- 唐锟刘畅陈林高静张超
- 关键词：乌司他丁低氧表型转换细胞运动
- 大鼠肺毛细血管周细胞的培养
- 2013年
- 目的 建立可靠、简便的肺毛细血管周细胞的培养方法.方法 选择健康雄性SD大鼠6只,6～7周龄,体重200 ～ 220 g,采用Ⅰ型胶原酶消化法和微孔过滤法分离肺毛细血管片段,用含10％胎牛血清和0.5％青霉素链霉素混合液的高糖DMEM/F12 1∶1培养基选择性培养肺毛细血管周细胞.倒置相差显微镜下观察细胞形态和生长状态,采用免疫荧光法计数α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、结蛋白、神经元-胶质抗原2（NG2）、分化抗原31（CD31）的阳性细胞,计算阳性细胞百分比.结果 镜下细胞呈梭型或星芒状,单核,偶见双核,核卵圆形,细胞浆丰富,漩涡或栅栏状生长,无接触性抑制.免疫荧光测定α-SMA阳性细胞百分比为（99.0±1.2）％,结蛋白阳性细胞百分比为（96.0±2.1）％,NG2阳性细胞百分比为（99.0±0.7）％,CD31阳性细胞百分比为0.结论 成功建立了一种可靠、简便的大鼠肺毛细血管周细胞的培养方法.
- 陈兵易斌杨勇王芝陈杨祖宝利鲁开智
- 关键词：周细胞细胞培养技术微脉管
- 低氧肺血管重建中肺动脉平滑肌细胞表型转换相关信号通路研究进展被引量：5
- 2013年
- 低氧肺血管重建(hypoxia pulmomary vascular remodeling,HPVR)是多种血管性疾病的主要病理特征,肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)的表型转换是HPVR病理过程中的基本病理变化。文中就HPVR中PASMCs表型转换相关通路研究进展作一综述。
- 陈杨易斌鲁开智
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞表型转换信号通路
- 肝肺综合征大鼠肺组织膜联蛋白A2表达的变化被引量：1
- 2013年
- 目的评价肝肺综合征（HPS）大鼠肺组织膜联蛋白A2（ANXA2）表达的变化。方法健康sD大鼠40只，雌雄不拘，3～4月龄，体重220～250g。采用随机数字表法，将其分为3组：对照组（c组，n=10）、假手术组（s组，n=10）和肝肺综合征组（HPS组，n=20）。HPS组采用胆总管结扎法建立肝肺综合征模型；c组不做任何处理；S组仅开腹暴露胆总管，但不结扎。术后5周时，处死大鼠，取肺组织，采用RT—PCR法检测ANXA2和平滑肌肌动蛋白α（SM-α-actin）的mRNA表达，采用Westernblot法检测ANXA2和SM—α—actin的蛋白表达。结果与C组比较，S组肺组织ANXA2和SM—α—actin的mRNA及其蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）；与s组比较，HPS组肺组织ANXA2和SM—α-ctin的mRNA及其蛋白表达上调（P〈0．05）。结论大鼠肝肺综合征时肺组织ANXA2表达上调。
- 陈杨易斌陈兵杨勇祖宝利鲁开智
- 关键词：肝肺综合征膜联蛋白A2
- 奥曲肽对肝叶切除术患者围术期肺功能及炎性介质的影响被引量：2
- 2014年
- 目的观察奥曲肽对肝叶切除术患者围术期血浆肿瘤坏死因子-α（tumournecYo$i8factoralpha，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin6，IL-6）、肺表面活性物质相关蛋白D（surfaetantproteinD，SP-D）、氧合指数（oxygenationindex，OI）和呼吸指数（respiratoryindex，RI）的影响，探讨奥曲肽对肝癌患者肝叶切除术围术期肺损伤的保护效应及可能机制。方法选择2013年2—12月于西南医院肝胆外科择期行肝叶切除术的肝癌患者40例，ASAⅡ～Ⅲ级，随机分为对照组或奥曲肽组，每组20例。2组患者均采用相同的麻醉方法。奥曲肽组在麻醉诱导后静脉注射奥曲肽0．1mg，然后0．5mg溶于60mL氯化钠注射液中泵注至手术结束前30min停止；对照组予等容量氯化钠注射液泵注。监测并对比分析麻醉诱导前（T0）、切皮后10min（T1）、解除阻断恢复肝血流后30min（T2）、术后1h（T3）、术后24h（T4）桡动脉血血气分析结果，计算0I值和RI值；于T0、T1、T2、T4时检测TNF--α、IL-6和sP-D浓度。结果两组组内各时相点与麻醉诱导前（Tn）相比，T2～T4时两组TNF-α、IL-6、SP-D的含量和RI值均显著升高（P〈0．05）；而0I值显著降低（P〈0．05）。两组组间各时相点同时值比较，T2-T4三个时相点奥曲肽组TNF-α、IL-6、SP-D的含量和RI值均低于对照组，而0I值高于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论奥曲肽能够抑制肝叶切除术患者围术期炎性反应，减轻肺损伤，并由此降低手术对肺功能的影响。
- 查兴盛陈林陈杨张喆
- 关键词：奥曲肽肺功能肝叶切除术
- 梗阻性黄疸患者血清对人PASMCs增殖、迁移及表型转换的影响
- 2014年
- 目的 探讨梗阻性黄疸患者血清对人肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）迁移、增殖及表型转换的影响.方法 分离人PASMCs,并传代培养,将培养的人PASMCs分别用梗阻性黄疸患者血清和健康志愿者血清孵育,于孵育24、48和72 h时采用CCK-8法和细胞划痕实验分别检测细胞增殖能力和迁移能力,采用Western blot法检测平滑肌-α-肌动蛋白（SM-α-actin）和钙调蛋白表达水平.结果 与健康志愿者血清孵育的人PASMCs比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育的PASMCs增殖能力和迁移能力增强,孵育24h时钙调蛋白表达上调,孵育48、72 h时SM-α-actin和钙调蛋白表达下调（P＜0.05）;与孵育24 h时比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育48 h时人PASMCs增殖能力和迁移能力增强,SM-α-actin表达上调,钙调蛋白表达下调（P＜0.05）;与孵育48 h时比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育72 h时人PASMCs迁移能力增强（P＜0.05）,增殖能力、SM-α-actin和钙调蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 梗阻性黄疸患者血清可增强人PASMCs增殖和迁移能力,并促进其向合成表型的转换.
- 杨勇陈兵陈杨祖宝利易斌鲁开智
- 关键词：细胞增殖细胞运动细胞分化
