国家自然科学基金(31170168)
- 作品数：13 被引量：93H指数：6
- 相关作者：姜健郭鹏杨宝灵张万筠范方更多>>
- 相关机构：大连民族学院大连民族大学威海市农业局更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家级星火计划中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 紫花苜蓿盐诱导类受体蛋白激酶基因MsSIK1的克隆及功能分析被引量：10
- 2014年
- 【目的】对紫花苜蓿(Medicago sativa L.cv.Zhongmu-1)stress-induced protein kinase gene 1(Ms SIK1)进行克隆与表达研究,了解该基因的分子机制及其应用。【方法】以紫花苜蓿叶片总RNA为模板,根据同源克隆设计简并引物,利用RT-PCR结合RACE技术,获得Ms SIK1的编码序列。利用同源性比对进行序列分析。通过SMART网站(http://smart.embl-heidelberg.de/)模拟该基因的蛋白结构。构建Ms SIK1的亚细胞定位瞬时表达载体,使用基因枪转化法将Ms SIK1与GFP在洋葱表皮细胞中融合瞬时表达并观察其亚细胞定位荧光信号。通过Real time-PCR分析Ms SIK1在Na Cl、ABA和干旱处理条件下的表达特征。利用农杆菌侵染方法获得转基因拟南芥植株,通过RT-PCR对转基因植株进行表达鉴定,获得转基因植株后,利用转基因株系进行盐处理进而对成苗期转基因拟南芥性状鉴定。在盐胁迫处理下,测定野生型与转基因株系的叶绿素含量、MDA含量进而验证该基因的抗盐功能。【结果】获得Ms SIK1编码序列2 478 bp,编码825个氨基酸。该蛋白C端与多种植物激酶具有相当高的同源性,模拟蛋白结构发现该基因具有类受体蛋白激酶高度保守的丝氨酸/苏氨酸结构域、跨膜结构域和富含亮氨酸重复序列的膜外结构域。Real time-PCR分析表明该基因在Na Cl、ABA和干旱处理条件下上调表达,其中在盐处理条件下,Ms SIK1表达先升高后降低,在处理4 h时达到最大值(约为对照值的7倍)。在干旱胁迫处理时,Ms SIK1受诱导表达增强明显,当处理2 h时表达量达到最大值(约为对照值的6倍);ABA处理时,Ms SIK1被诱导表达明显,当处理3 h时表达量达到最大值,约为对照值的6.8倍。Ms SIK1与GFP融合瞬时表达的洋葱表皮细胞中的荧光信号主要集中于质膜附近,转化空载体的洋葱表皮细胞中的荧光信号分布于细胞各个部位。转基因植株的RT-PCR鉴定表明,T1代6个株系中所得到的Ms SIK
- 郭鹏邢鑫张万筠姜健
- 关键词：紫花苜蓿类受体蛋白激酶盐胁迫
- 新疆喀什地区抗旱耐盐碱紫花苜蓿新品种引种试验被引量：2
- 2015年
- 新疆喀什地区属于干旱地区,土壤盐碱化严重,约占现有耕地面积的47%,且饲草料的短缺成为制约畜牧业发展的重要因素.近年来,喀什地区进一步加大了饲草料种植力度,特别是优质饲草紫花苜蓿的种植,每年约7 790 hm^2.因各品种适应性不同,产量差异较大,为了选出抗旱耐盐碱的优质高产紫花苜蓿品种,专门从国外引进了根蘖型、3010、阿尔冈金、金皇后、巨人和驯鹿六个抗旱耐盐碱的苜蓿品种,进行引种试验.通过两年的种植管理和观测记录分析,结果表明根蘖型、3010、阿尔冈金、金皇后苜蓿能够适合我区平原区pH值在6.5-9.0之间,可溶性盐分在0.6%以下（中度及以下）的土壤种植推广.
- 魏林郭鹏王燎原买买提亚森.赛丁
- 关键词：紫花苜蓿抗旱耐盐碱引种
- 盐碱胁迫对紫花苜蓿根系Na^+、K^+离子流速的影响被引量：1
- 2015年
- 中国盐碱地形成,大部分与土壤中碳酸盐的累计有关,因而碱化度普遍较高。在盐碱地再利用过程中,简单说,可以分为轻盐碱地、中度盐碱地和重盐碱地。利用Na Cl、Na2SO4、Na HCO3、Na2CO34种盐,按不同比例配比,人工模拟盐碱地中轻盐碱地盐碱度、中度盐碱地盐碱度和重盐碱地盐碱度。选用耐盐苜蓿品种金皇后、中度耐盐苜蓿品种阿尔冈金、敏感苜蓿品种敖汉,分别进行盐碱胁迫实验;通过非损伤微测技术检测苜蓿根系Na+、K+离子流变化,比较轻盐碱度、中度盐碱度和重盐碱度胁迫下3个耐盐苜蓿品种的离子流速差异。结果显示:在盐碱胁迫下,耐盐碱品种金皇后Na+离子流速外流速度比中度耐盐品种阿尔冈金要高,且均表现为外流;敏感品种敖汉在中度盐碱环境下由外流转变为内流,并出现萎蔫迹象。3个苜蓿品种的K+离子流速都发生变化,表现为外流,但流速变化各不相同且无明显的规律性。所以,在盐碱抗逆性中紫花苜蓿可以通过Na+离子流速控制来适应盐碱环境。
- 郭鹏张万筠鲍雅静
- 关键词：紫花苜蓿盐碱胁迫非损伤微测技术
- 欧美杨PdPP2C基因的克隆与功能分析被引量：13
- 2015年
- 欧美杨是中纬度地区最适合的短轮伐期工业用材集约经营树种之一,然而盐渍、干旱和低温严重影响了欧美杨的生长发育和产量。本文利用RT-PCR等技术克隆出欧美杨PP2C基因并进行了序列分析。Pd PP2C基因开放阅读框为1 320 bp,编码439个氨基酸。蛋白质序列分析表明,PP2C蛋白N端保守性不强,C端有保守的蛋白磷酸酶区域。荧光定量PCR分析表明,该基因在欧美杨根、成熟叶、顶端叶和茎中都有表达且根中表达量最高。逆境胁迫分析表明,该基因受Na Cl、ABA和干旱等诱导表达。干旱和盐胁迫处理下转Pd PP2C基因拟南芥与野生型相比生长受到较少抑制,且叶绿素含量上升,丙二醛含量下降,表明Pd PP2C基因作为一种蛋白磷酸酶提高了拟南芥的抗逆性。
- 郭鹏张士刚邢鑫姜健
- 关键词：欧美杨克隆逆境
- 盐碱胁迫下紫花苜蓿的生理学及解剖学特征比较被引量：3
- 2014年
- 以紫花苜蓿"中苜一号"为材料,分别比较了盐碱不同胁迫下紫花苜蓿光合参数、叶绿素和MDA的质量分数以及表皮解剖学特征。结果发现盐碱胁迫下,光合参数、叶绿素的质量分数、气孔开度都下降,而且碱胁迫下的下降程度高于盐胁迫,说明碱胁迫对紫花苜蓿的伤害强于盐胁迫。
- 郭鹏张万筠杨宝灵姜健
- 关键词：盐胁迫碱胁迫紫花苜蓿生理学解剖学
- 盐胁迫对紫花苜蓿根系形态特征和水分利用效率的影响被引量：6
- 2016年
- 为提高紫花苜蓿的耐盐能力,分别采用盆栽试验和田间试验,利用Delta-t scan根系分析软件对不同盐处理下紫花苜蓿根总面积、根总长度、平均直径和根尖数进行分析。结果表明:在田间试验条件下,在低度盐浓度胁迫下,无论不同土壤深度还是全株根系分析过程中,只有平均直径略有所下降,其它各根系形态指标均呈上升趋势。中度盐胁迫下,根系的平均直径和根总长度显著低于轻度盐处理,但还高于对照。重度盐胁迫下,各根系指标均低于对照。但在盆栽试验下,随着盐胁迫的加重,各根系指标均呈下降趋势。另外在轻度盐胁迫下发现叶片通过降低Tr和提高WUE的方式减少水分的损失,提高植物的耐盐性,但随着盐胁迫的加重,WUE逐渐下降。总之盐胁迫下紫花苜蓿根面积、根长度、根尖数、根平均半径等形态上的变化虽然趋势不一,但彼此相互协调一方面维系了根系的吸水功能进而提高对盐胁迫的一种适应性反应。
- 黄依婷郭鹏许涵杰
- 关键词：紫花苜蓿根系盐胁迫水分利用效率
- 番茄Sly-MIR167的抗冷性研究被引量：3
- 2014年
- 以番茄为材料,采用Northern杂交技术,分析番茄MIR167(Sly-MIR167)在低温胁迫下的表达模式,以明确Sly-MIR167在冷胁迫下的分子调控机制,为基因工程在改良番茄品种中的实际应用提供依据。结果显示:(1)25℃下Sly-MIR167在番茄根、茎、花瓣、果实、叶片都有表达,4℃低温胁迫下的表达量均增加,表明Sly-MIR167表达受低温诱导。(2)采用农杆菌侵染构建表达载体并转化番茄获得转基因植株,冷胁迫实验结果显示:转基因植株在冷胁迫处理的生长状况明显优于对照;另外,冷胁迫下2个转基因株系(T2-5和T2-19)的最大光化学效率、叶绿素含量下降幅度明显低于野生型;脯氨酸含量高于野生型;MDA含量低于野生型,表明Sly-MIR167能够提高番茄对冷胁迫的耐受性。(3)通过miRU在线软件预测Sly-MIR167的靶基因为NF-YA1、NF-YA2,利用RT-PCR技术分析其表达下调,证明它们被MIR167负调控。
- 郭鹏张万筠马红玉姜健
- 关键词：MIRNAS克隆冷胁迫番茄
- 紫花苜蓿耐盐种质资源的遗传多样性分析被引量：22
- 2011年
- 利用RAPD技术分析了25个紫花苜蓿耐盐品种的遗传结构和遗传多样性。结果表明,30条引物在25个紫花苜蓿耐盐品种单株DNA间的多态性位点比率(P)为81.52%,在各品种混合DNA间的多态性位点比率为61.65%,说明采用单株DNA样品比采用混合DNA样品能更好地揭示紫花苜蓿品种内和品种间的遗传变异水平。基因分化系数(Gst)主要反应品种间变异占总变异的比例,中国18个耐盐紫花苜蓿品种和美国7个耐盐紫花苜蓿品种的基因分化系数分别为0.271和0.152,表明中国耐盐紫花苜蓿种质资源品种间基因交流机会比美国品种间交流机会多。紫花苜蓿作为典型的异交植物,其生物群体的遗传结构与其繁育体系具有直接的联系。依据遗传距离(GD)分析结果,25份材料从遗传结构上可以分为9个组群,其中图牧1号和图牧2号遗传距离最小(GD=0.148),捷达和图牧1号遗传距离最大(GD=0.786)。紫花苜蓿耐盐种质遗传多样性分析为紫花苜蓿耐盐核心种质库构建和耐盐新品种选育提供了理论依据。
- 姜健杨宝灵夏彤于淑梅乌云娜
- 关键词：紫花苜蓿RAPD
- 短时盐胁迫对紫花苜蓿叶片气孔特征的影响被引量：2
- 2016年
- 利用扫描电镜技术,研究了紫花苜蓿在不同浓度(0,0.3%,0.9%,1.5%)NaCl溶液处理下气孔的适应性变化。通过对苜蓿叶片的气孔长度、气孔宽度、气孔开度、气孔密度及潜在气孔导度指数等气孔特征的观察,探讨气孔特征与耐盐性的关系。结果显示:苜蓿叶片在盐胁迫24 h后,除气孔密度变化不明显外,其他指标均随盐浓度的增加而呈下降趋势;盐胁迫24 h后气孔密度才开始增加,而其他指标则随盐浓度的不同出现不同程度的恢复现象。这说明在盐胁迫下,苜蓿叶片通过调节气孔大小及开闭来减少水分蒸腾的同时,还通过增加气孔数目来维持光合作用,增强其耐盐性。
- 罗祺圆许涵杰郭鹏
- 关键词：紫花苜蓿气孔盐胁迫
- 盐胁迫对紫花苜蓿生长及光合生理特性的影响被引量：18
- 2013年
- 为了探明盐害对紫花苜蓿生长及光合生理特性的影响,为提高植物耐盐性、增加生物学产量、培育耐盐新品种提供科学依据,通过田间试验,以2年生紫花苜蓿‘公农一号’为研究对象,在不同浓度NaCl处理下研究了紫花苜蓿的生理生化响应。结果表明:(1)S1和S2处理组的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)在胁迫初期小幅上升后开始下降,并随时间的延长趋势变缓,S3处理组则持续下降。(2)各处理组的胞间CO2浓度(Ci)则呈先急剧升高后逐渐下降的趋势。(3)不同浓度处理组蒸腾速率(Tr)均呈下降趋势,后期略有恢复。(4)紫花苜蓿叶片SPAD值和地上部分生物量均随着盐浓度的提高显著降低。研究表明,NaCl胁迫下,紫花苜蓿叶片光合作用受到抑制,进而影响到地上部分生物量。但低盐胁迫后期,苜蓿叶片的光合作用有恢复现象,表现出其具有一定的耐盐性。
- 范方张玉霞姜健杨宝灵高明波
- 关键词：紫花苜蓿盐胁迫SPAD值光合生理特性
