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濒危植物珙桐ISSR-PCR反应体系的建立被引量：11: 2007年; 以珙桐叶片为材料,通过单因子试验分别研究了退火温度、TaqDNA聚合酶用量、dNTP浓度、Mg2+浓度、引物浓度和模板DNA浓度对ISSR-PCR反应的影响,建立了适宜于珙桐ISSR分析的扩增体系,即25μl的反应体系中:模板DNA20 ng,Mg2+1.5 mmol/L,引物0.6μmol/L,dNTP 0.20 mmol/L,TaqDNA聚合酶1.5 U。; 李雪萍何正权陈发菊梁宏伟姚伟李凤兰; 关键词：ISSR 濒危植物

巴东木莲DNA的提取及SRAP-PCR反应体系的正交优化被引量：4: 2008年; 研究确定了提取巴东木莲基因组DNA的方法,采用正交试验设计法对影响SRAP-PCR反应的引物浓度、Taq DNA聚合酶的用量、Mg2+和dNTPs浓度及PCR扩增程序中的退火温度及循环次数进行了比较、优化,同时对DNA模板浓度进行了筛选。结果表明,Mg2+、dNTPs、Taq酶及引物的不同水平均对PCR反应结果有显著的影响。建立了巴东木莲20μL SRAP-PCR的反应体系为1×buffer、Mg2+浓度为2.0 mmol·L-1、dNTPs浓度为0.25 mmol·L-1、引物浓度为0.45μmol·L-1、Taq酶为0.5 U和模板DNA 40ng。适宜的扩增程序为94℃预变性1 min,94℃变性1 min,33℃复性1 min,72℃延伸1 min,10个循环;94℃变性1 min,55℃复性1 min,72℃延伸1 min,30个循环;最后72℃延伸5min。试验表明,该体系重复性好、稳定性强。; 万玉华余璐璐李晓玲陈发菊梁宏伟何正权; 关键词：巴东木莲 DNA提取 SRAP-PCR反应体系正交设计

濒危植物巴东木莲种子休眠与萌发特性的研究被引量：66: 2007年; 巴东木莲(Manglietia patungensis)为我国特有种,属国家重点保护植物。为找出其生殖环节中的致危因素,作者对巴东木莲种子休眠与后熟过程中的形态和萌发特性进行了研究。结果表明,巴东木莲种胚发育不完全可能是种子休眠的主要原因,在其后熟过程中胚不断分化、发育成熟;种皮具有较好的透性,与休眠的关系不大;种子不同部位均存在萌发抑制物,胚乳中高含量的萌发抑制物是影响胚萌发的重要因素。内源激素ABA和IAA在巴东木莲种子休眠与萌发过程中起着重要作用,ABA是引起休眠的关键因素,IAA有助于种子的萌发,IAA/ABA相对含量的变化对种子的休眠和萌发产生重要影响。巴东木莲种子的休眠是由种子本身的形态和生理特点引起的综合休眠,在4℃低温保湿条件下才能完成其形态和生理后熟过程,而自然条件下,巴东木莲种子成熟时正值秋季少雨,很容易失水而不能完成其后熟过程而失去生活力,这可能是导致该物种自然更新困难的重要原因。; 陈发菊梁宏伟王旭何正权李凤兰; 关键词：MANGLIETIA 生理后熟种子萌发

浙江楠染色体核型分析被引量：7: 2009年; 采用染色体常规制片法,结合显微摄影技术对浙江楠染色体进行检测分析,结果表明:浙江楠染色体数为2n=24,核型公式是2n=24=18 m+6 sm,全组染色体总长度为58.11μm,长臂总长34.69μm,核型不对称系数(AS.K%)为59.70%,核型属于Stebbins核型分类中的"2B"类型。; 陈细芳郝明明陈菽李晓玲何正权; 关键词：浙江楠染色体核型分析

濒危植物巴东木莲ISSR分子标记技术体系的建立被引量：5: 2008年; 利用正交设计建立和优化适合于濒危植物巴东木莲的ISSR-PCR分子标记技术体系。对影响ISSR-PCR反应的多个因素,包括引物和DNA模板浓度、Taq酶用量、Mg2+和dNTPs浓度以及PCR扩增的退火温度、退火时间及循环次数等进行了优化。结果表明,适于巴东木莲ISSR-PCR反应的分子标记技术体系为:反应总体积20μl,含2μl 10×buffer、1μl 20 mmol/L MgCl2、4μl 2μmol/L引物、0.4μl 10 mmol/L dNTPs、0.8μl 5 U/μlTaq酶及40 ng模板DNA;PCR扩增程序为:94℃预变性5 min,94℃变性30 s,54℃复性45 s,72℃延伸1.5min,35个循环,最后72℃延伸7 min。本研究建立的ISSR分子标记技术体系稳定性强,重复性高。; 李晓玲温国莉陈发菊梁宏伟何正权; 关键词：巴东木莲 ISSR 分子标记正交设计

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湖北省自然科学基金(2006ABA201)