甘肃省国际合作计划(0804WCGA127)
- 作品数：7 被引量：18H指数：3
- 相关作者：康宏包广洁苏雪莲李振强闭艳妲更多>>
- 相关机构：兰州大学西北民族大学更多>>
- 发文基金：甘肃省国际合作计划甘肃省科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 山羊颞下颌关节盘细胞体外培养研究被引量：5
- 2010年
- 目的:研究山羊颞下颌关节盘纤维软骨细胞体外培养的生物学特性及其损伤修复的细胞学基础。方法:切取1月龄山羊颞下颌关节盘,II型胶原酶消化获得关节盘纤维软骨细胞。逐日观察细胞的形态变化,测定其生长曲线,甲苯胺蓝染色、I型胶原免疫组化染色鉴定。透射电镜观察细胞超微结构。结果:原代培养的关节盘纤维软骨细胞以长梭形为主,部分多角形,7d即可传代。甲苯胺蓝染色阳性,I型胶原免疫组化染色胞质内可见棕黄色颗粒。超微结构显示细胞分为2种,软骨细胞样细胞和成纤维细胞样细胞;线粒体、内质网发达。结论:体外分离培养的山羊颞下颌关节盘纤维软骨细胞具有较强的增殖能力,1～3代细胞可作为颞下颌关节盘组织工程的种子细胞。
- 舒维娜康宏张卫平李欣包广洁
- 关键词：颞下颌关节盘细胞培养
- 酶消化结合组织块培养法用于颞下颌关节盘组织工程细胞扩增的初步研究被引量：1
- 2010年
- 目的采用酶消化结合组织块培养法对山羊颞下颌关节(temporomandibular joint,TMJ)盘细胞进行体外培养和扩增,探索TMJ关节盘细胞体外培养及扩增的新方法。方法在无菌条件下,切取一月龄山羊TMJ关节盘,剪至1.0 mm^3的碎块,用0.25%胰酶、0.01%Ⅰ型胶原酶消化关节盘组织块,将消化好的组织块置入6孔板中培养。在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化及贴壁率,甲苯胺蓝染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色进行细胞鉴定,测定其生长曲线。结果原代培养的关节盘纤维软骨细胞4天可观察到贴壁细胞,7天贴壁细胞逐渐增多,第10天时细胞彼此相连,铺满平底,细胞以梭形为主,部分多角形。传代后12小时贴壁率达90%,大部分为多角形,4～5天即可长满瓶底。甲苯胺蓝染色可见异染颗粒,胶原免疫组化染色胞浆内可见棕黄色颗粒。结论酶消化结合组织块培养法培养的山羊TMJ关节盘细胞具有较强的增殖能力,可作为TMJ关节盘组织工程中获取大量原代细胞的实用方法。
- 柯一凡康宏舒维娜苏雪莲李振强闭艳妲周烨
- 关键词：组织块培养法颞下颌关节盘
- 自组装山羊颞下颌关节盘组织工程纤维软骨模型的构建被引量：5
- 2011年
- 目的构建山羊颞下颌关节盘纤维软骨自组装模型,观察自组装组织工程纤维软骨的生物学特征,为颞下颌关节盘及其他组织工程纤维软骨的进一步研究创造条件。方法分离、培养山羊颞下颌关节盘细胞,按每井5.5×106个接种到预制的直径5 mm×深10 mm琼脂糖井内,每天换液,培养2周,观察和检测颞下颌关节盘形态和成分的变化。结果接种后1 d,山羊颞下颌关节盘细胞在琼脂糖井内聚集,开始自组装成一圆盘状基体,后来逐渐变成圆球形。培养2周时,苏木精-伊红染色可观察到纤维软骨细胞呈圆形,周围有基质包绕;Safranin-O/fast green染色显示自组装基体内纤维软骨细胞分泌细胞外基质氨基多糖;picro-sirius red染色可见自组装基体内有大量胶原纤维。Ⅰ型胶原免疫组织化学染色可见胞浆和细胞外有棕黄色颗粒,表明自组装纤维软骨可以产生与自然关节盘组织一致的Ⅰ型胶原成分。结论利用琼脂糖井构建的山羊颞下颌关节盘自组装组织工程模型,能产生与自然关节盘成分相似的细胞外基质,表明组织工程化颞下颌关节盘组织的途径是可行的。
- 康宏李振强闭艳妲
- 关键词：颞下颌关节盘纤维软骨
- 碱性成纤维细胞生长因子对骨髓间充质干细胞向颞下颌关节盘细胞分化的影响被引量：7
- 2012年
- 为观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化的影响,采用bFGF诱导山羊BMSCs,通过组织学、免疫组织化学和酶联免疫吸附实验(ELISA)等方法检测BMSCs产生的细胞外基质(ECM)包括Ⅰ型胶原和蛋白多糖的情况,初步评价BMSCs做为颞下颌关节(TMJ)盘组织工程种子细胞的可行性。结果表明:经bFGF诱导,BMSCs向成纤维细胞样细胞分化,能够合成糖胺聚糖(GAG)和I型胶原,因此认为BMSCs作为工程化关节盘种子细胞是可行的。
- 苏雪莲包广洁康宏
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子骨髓间充质干细胞颞下颌关节盘
- 工程化颞下颌关节盘组织的细胞源问题:现状与展望被引量：1
- 2010年
- 目的是为学者探索适当的颞下颌关节盘组织工程种子细胞提供参考。目前颞下颌关节盘组织工程正处于起步阶段,而细胞来源是制约关节盘组织工程发展的主要因素之一,本文概述了关节盘细胞、软骨细胞、皮肤成纤维细胞、骨髓基质干细胞、脂肪干细胞和胚胎干细胞等6种细胞作为关节盘组织工程细胞源的可行性,以便寻找一种合适的细胞源。
- 苏雪莲康宏
- 关键词：颞下颌关节关节盘种子细胞
- 两种生长因子对颞下颌关节盘细胞自组装基体合成影响的动物实验被引量：2
- 2011年
- 目的研究转化生长因子β1（transforming growth factor，TGF-β1）及胰岛素样生长因子Ⅰ（insulin-like growthfactor-I，IGF-I）对颞下颌关节（TMJ）盘细胞自组装基体细胞外基质合成的影响。方法采用10、100μg／L的IGF-I（I10,I100组）及5、50μg/L的TGF-β1（T5、T50组）分别作用于TMJ盘细胞白组装基体，3、6周时观察自组装基体的大小、形态并测重；冰冻切片、天狼猩红（piero-siriusred）及免疫组化染色观察I型胶原的分布，番红-O-固绿染色观察I型胶原及糖胺聚糖分布。定量检测I型胶原、糖胺聚糖含量、测定细胞数量。结果3周时T5、I10组上调糖胺聚糖的分泌、细胞的增殖以及I型胶原的合成．3周时I10组I型胶原（109．16±5．12μg）的表达约是空向对照组（69．13±5．94μg）的近2倍；空白对照组和I10、I100、T5、T50组于第6周时分泌的基质含量及细胞的增殖数量均比第3周增多。结论IGF-I、TGF-β1作用时间的延长对基体的生化合成具有上调作用，10μg/L的IGF-I更适用于组织工程化TMJ盘细胞自组装基体的应用。
- 康宏闭艳妲李振强齐梦怡彭二梅
- 关键词：颞下颌关节转化生长因子胰岛素样生长因子
- 山羊颞下颌关节盘细胞类型及分布表征在组织构建中的设计意义：被引量：3
- 2009年
- 背景:颞下颌关节盘的细胞分型分布尚无定论,对细胞的描述使用的名称也不统一。目的:表征山羊颞下颌关节盘中细胞的分型及分布。设计、时间及地点:单一样本观察,于2007-03/05在兰州大学细胞与分子生物学实验中心、电镜中心完成。材料:颞下颌关节盘取自两只新鲜屠宰的1月龄健康山羊。方法:完整切取山羊双侧颞下颌关节盘,按长轴(内外侧向)及短轴(前后向)分别等分为3部分和两部分,将关节盘分为6份。标记后用体积分数为10%中性甲醛固定24h,石蜡包埋。主要观察指标:苏木精-伊红染色观察关节盘各带细胞类型及数目的不同,甲苯胺蓝染色,Ⅰ型胶原免疫组织化学检测胶原的分布,透射电镜观察细胞超微结构。结果:颞下颌关节盘由不均分布的细胞和胶原纤维组成。胶原几乎都为Ⅰ型,胶原纤维一般表现为波浪形或卷曲状,纤维大致平行,而细胞散在胶原纤维基质中。细胞有成纤维细胞样细胞和软骨细胞样细胞两种,其中前者占优势,两者比例约为2.05∶1。细胞类型和分布在各区没有显著性差异。电镜超微结构显示成纤维细胞样细胞核大,梭形或不规则形,细胞器很少。软骨细胞样细胞胞核圆形或椭圆形,周围有电子透射区,细胞囊不明显,伪足少见。结论:1月龄山羊颞下颌关节盘内各个区域的细胞类型、数目与排列差异没有显著性意义。其中成纤维细胞样细胞较软骨细胞样略占优势。
- 舒维娜康宏张卫平李欣包广洁
- 关键词：颞下颌关节盘
