国家教育部博士点基金(20104433120013)
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 相关作者：杨飞华马伟峰蔡绍晖赵海山杜军更多>>
- 相关机构：南方医科大学暨南大学中山大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- FAPα酶激活式靶向抗肿瘤前药:Z-GP-Dox对斑马鱼的毒性评价被引量：2
- 2012年
- 目的:考察新设计合成的一种FAPα酶激活式靶向抗肿瘤新药甘脯酰阿霉素(Z-GP-Dox)对斑马鱼的毒性作用。方法:以阿霉素作为对照,用不同浓度的Z-GP-Dox处理4月龄的成年斑马鱼及其受精后24h(24hpf)的胚胎,观测其死亡率,并通过显微镜观察Z-GP-Dox对斑马鱼胚胎发育的影响,从形态学和电生理学方面评价其对斑马鱼心脏的毒性作用。结果:Dox对照组的斑马鱼死亡率具有明显的浓度依赖性,而经酰化修饰的前药Z-GP-Dox处理组的斑马鱼死亡率相对较低。Dox可导致斑马鱼胚胎发育严重畸形,心脏功能受损;而相同浓度的前药Z-GP-Dox处理组的胚胎发育基本正常,幼鱼的心脏形态和心率与空白对照组差异不显著。然而,当Z-GP-Dox被FAPα酶解后,其毒性则明显增强,与Dox对照组的毒性相当。结论:与Dox相比,经结构改造的前药Z-GP-Dox对斑马鱼的毒性显著降低,且具有FAPα酶激活式靶向释放特性。
- 马伟峰杨飞华赵海山杜军蔡绍晖
- 关键词：阿霉素斑马鱼
- CXCR7特异性拮抗剂SDF-1/54R的可溶性表达及活性评价被引量：1
- 2014年
- 目的构建SDF-1/54R的原核可溶表达载体,并考查其对CXCR7的抑制作用。方法将PCR扩增的SDF-1/54r基因插入带有GST标签的可溶表达载体pET-41a+,并转化BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达的融合蛋白GST-SDF-1/54R通过SDS-PAGE和Western blotting进行检测,并利用GST亲和层析纯化。纯化产物经肠激酶酶切和纯化后得到目的蛋白SDF-1/54R。用SDF-1/54R处理CXCR7高表达的MCF-7细胞,利用MTT和趋化实验评价其对乳腺癌细胞增殖和转移的影响。结果利用新构建的可溶表达系统成功得到了目的蛋白SDF-1/54R,MTT和趋化实验证实SDF-1/54R对乳腺癌细胞MCF-7的增殖和转移具有明显的抑制作用。结论重组载体表达的可溶蛋白SDF-1/54R是一种良好的CXCR7特异性拮抗剂,具有开发成抗肿瘤药物的潜在应用价值。
- 曹园芝杨飞华马伟峰
- 关键词：CXCR7拮抗剂SDF-1可溶性表达
- CXCR7与肿瘤的生长和转移被引量：3
- 2014年
- CXCR7[chemokine(C-X-C motif)receptor 7]是一个近年来新发现的基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor1,SDF-1)的受体,由RDC1基因编码,通过与CXCL11及SDF-1结合发挥其生物学效应。CXCR7在多种肿瘤细胞表面高表达,在肿瘤的发生、发展过程中发挥着重要作用,促进肿瘤细胞的存活和生长、黏附与侵袭、肿瘤血管新生及癌细胞转移。与其他趋化因子受体不同,CXCR7在与SDF-1结合后,并不引起钙离子内流和趋化反应,而是通过建立合适的趋化因子的梯度,与CXCR4[chemokine(C-X-C motif)receptor 4]相互协调发挥作用。以CXCR7为靶点的肿瘤分子治疗研究不断增加,有望为肿瘤治疗提供新的方法。
- 曹园芝杨飞华马伟峰
- 关键词：肿瘤CXCR7SDF-1
- 重组腺病毒Ad-P2G-DCN的构建及在HEK-293细胞中的表达被引量：1
- 2012年
- 目的制备表达基质细胞衍生因子(SDF-1)拮抗剂P2G与饰胶蛋白聚糖(decorin,DCN)嵌合基因的重组腺病毒,并检测其在HEK-293细胞中的表达情况。方法以前期构建的pET-30a+/P2G-DCN为模板,PCR扩增目的基因P2G-DCN,并克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV;然后将化学合成的SDF-1信号肽序列插入P2G-DCN的5'端,构建为重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/SP-P2G-DCN;经PmeⅠ酶切线性化,与骨架质粒pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,筛选重组腺病毒质粒pAd-SP-P2G-DCN。PacⅠ酶切线性化的pAd-SP-P2G-DCN通过脂质体介导转染人胚肾转化细胞系HEK-293,包装并扩增重组腺病毒Ad-P2G-DCN。荧光计数确定病毒感染滴度,并以Western blot法检测嵌合蛋白P2G-DCN在HEK-293细胞中的表达情况。结果构建了携带P2G-DCN基因的重组腺病毒,该重组腺病毒感染HEK-293细胞后可高效分泌表达重组嵌合蛋白P2G-DCN。结论成功构建了重组腺病毒Ad-P2G-DCN,为后续系统研究Ad-P2G-DCN在肿瘤基因治疗中的作用奠定了实验基础。
- 马伟峰胡厚稳杨飞华蔡绍晖
- 关键词：基质细胞衍生因子饰胶蛋白聚糖腺病毒载体
