国家自然科学基金(30973443)
- 作品数：12 被引量：21H指数：4
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- 溶瘤腺病毒治疗膀胱癌进展被引量：1
- 2011年
- 溶瘤腺病毒是通过基因工程改变部分生物学特性的腺病毒。因其可以复制、增殖,最后裂解膀胱癌细胞而成为治疗膀胱肿瘤新的研究方向。为了使其具有更好的特异性、靶向性和安全性,人们进行了从改变单个基因到改变多个基因又到插入特异性启动子构建不同的溶瘤腺病毒治疗膀胱癌的研究,虽然还有很多问题有待解决,但已经取得了一定的成果。
- 陈猛郝林韩从辉
- 关键词：膀胱癌溶瘤腺病毒基因
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及抗肿瘤作用被引量：4
- 2009年
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子(TNF)超家族成员之一,能选择性的诱导肿瘤细胞、转化细胞凋亡,而对正常组织无毒性,有望成为肿瘤治疗的新方法,备受人们的关注。本文从TRAIL的结构、受体、诱导肿瘤细胞凋亡机制及在肿瘤治疗中的应用等方面作了介绍,以期为TRAIL临床应用提供参考。
- 郝林史振铎韩从辉
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞凋亡肿瘤治疗
- 装载超抗原SEA基因的由前列腺特异性抗原和端粒酶逆转录酶启动子双调控靶向前列腺癌的溶瘤腺病毒载体的构建被引量：3
- 2010年
- 目的构建表达超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素（SEA）基因的由前列腺特异性抗原（PSA）启动子及端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子双调控的特异性增殖溶瘤腺病毒SG504-SEA。方法从前列腺癌组织基因组DNA中获得522bp大小的PSA启动子序列，将PSA启动子克隆到由hTERT启动子调控的特异性增殖溶瘤腺病毒载体SG502中，得到靶向前列腺癌细胞的双调控溶瘤腺病毒载体SG504。将已构建好的含有771bp大小SEA基因片段的病毒骨架质粒PPE3-ccdb—SEA与SGSIM用Lipofectamine 2000共转染至293细胞。共转染后9—14d出现病毒空斑，经过3次病毒空斑纯化，经鉴定正确的腺病毒命名为SG504-SEA，即携带SEA基因的双调控靶向前列腺癌的特异性溶瘤腺病毒。结果经聚合酶链反应（PCR）及酶切鉴定，SEA基因成功克隆到病毒载体中，可以表达SEA基因，且病毒滴度为2．0×10^10pfu／ml。结论成功构建表达超抗原SEA基因的双调控选择增殖型溶瘤腺病毒SG504-SEA。
- 韩从辉郝林胡建鹏王涛贡震贺厚光董秉政张培影
- 关键词：前列腺癌前列腺特异性抗原端粒酶逆转录酶超抗原SEA溶瘤腺病毒
- 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体胞外区基因原核系统的表达与纯化被引量：4
- 2011年
- 肿瘤坏死因子相关凋产诱导配体（TRAIL）属于肿瘤坏死因子（TNF）超家族成员之一，能够诱导前列腺癌、膀胱癌、肺癌等多种肿瘤细胞凋产，但不影响正常细胞。本研究旨存观察重组TRAIL融合蛋白（GST—rTRAIL）的表达，探讨其包涵体蛋白的复性和纯化方法。
- 郝林刘转转贺厚光范涛尤红娟汤仁仙韩从辉
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体纯化方法原核系统TRAIL包涵体蛋白家族成员
- 溶瘤腺病毒及其靶向治疗肿瘤研究进展被引量：1
- 2009年
- 溶瘤腺病毒是对已知腺病毒进行改造得到的能对肿瘤基因表型的缺陷产生特异性杀伤作用及起到抗肿瘤药物的靶向性载体作用的病毒。目前通过对腺病毒5的特定基因片段的处理得到了H101和d11520等生物制品，针对肿瘤细胞的p53基因表达缺陷，特异性识别肿瘤并在肿瘤细胞内进行繁殖和裂解肿瘤细胞。这些生物制品可以作为载体携带抗肿瘤基因，产生更加强大的抗肿瘤作用。
- 胡建鹏郝林韩从辉
- 关键词：溶瘤病毒肿瘤
- 应用E1区缺陷载体构建携带SEA基因的选择性腺病毒
- 2011年
- 目的:构建由端粒酶启动子(hTERT)调控的携带超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcus aureusenterotoxin A,SEA)基因的选择性复制重组腺病毒。方法:应用酶切、连接方法将hTERT连接于腺病毒穿梭质粒E1A和E1B序列之前调控E1A和E1B蛋白的表达,CMV启动子和SV40分别调控目的基因SEA的表达和终止,利用脂质体将腺病毒骨架质粒和穿梭质粒共同转染人胚肾293细胞(HEK-293)进行同源重组,获取选择性复制腺病毒CMV-SV40-hTERT(CSS-H),氯化铯梯度离心纯化重组腺病毒,并测定病毒滴度。结果:应用PCR验证、双酶切分析、序列测定等方法验证重组质粒基因片段连接正确无突变,通过同源重组获得携带超抗原SEA基因片段的CSS-H重组腺病毒,测定滴度为2.9×1010pfu/ml。结论:携带SEA基因选择性复制重组腺病毒CSS-H成功构建。
- 胡建鹏韩从辉韩从辉郝林陈猛
- 关键词：腺病毒肿瘤金黄色葡萄球菌肠毒素A
- 双调控溶瘤腺病毒携带SEA基因靶向鼠膀胱癌的表达被引量：2
- 2012年
- 目的:研究hTERT和HIF启动子双调控的溶瘤腺病毒能否感染鼠膀胱癌细胞并表达治疗基因,为动物实验提供依据。方法:以不同浓度溶瘤腺病毒感染鼠膀胱癌细胞,生物倒置显微镜下动态观察细胞形态变化,RT-PCR检测SEA在细胞内mRNA表达,Western blot检测SEA蛋白表达。结果:镜下可见细胞感染腺病毒并最终裂解,RT-PCR和Western blot分别检测到实验组mRNA和蛋白的表达。结论:携带SEA基因的hTERT/HIF双调控溶瘤腺病毒可在鼠膀胱癌细胞内复制增殖并表达SEA基因,可用于治疗鼠膀胱癌的动物实验研究。
- 陈猛郝林史振铎张辉董洋韩从辉
- 关键词：溶瘤腺病毒膀胱癌金黄色葡萄球菌肠毒素A人端粒酶逆转录酶
- 人TRAIL基因原核表达载体的构建及鉴定被引量：4
- 2011年
- 目的:克隆肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因片段(114～281氨基酸残基)并构建原核表达载体。方法:取健康人外周血提取总RNA,设计合成引物并引入EcoR I和Xho I酶切位点,RT-PCR扩增TRAIL基因的胞外区片段,克隆入原核表达载体pGEX-6P-1中,经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆。结果:从外周血cDNA中扩增出501 bp的目的片段,测序结果证实成功构建重组质粒pGEX-6P-1/TRAIL。结论:成功构建TRAIL基因的原核表达载体pGEX-6P-1/TRAIL,为肿瘤细胞的凋亡研究提供理论依据。
- 刘转转郝林范涛贺厚光尤红娟汤仁仙韩从辉
- 关键词：TRAILRT-PCR克隆
- 表达超抗原SEA基因的溶瘤腺病毒载体的构建与鉴定(英文)
- 2010年
- 目的:构建表达超抗原SEA基因的溶瘤腺病毒载体并鉴定。方法:采用PCR技术,从产SEA的葡萄球菌标准菌株ATCC13565基因组DNA中获得SEA全长基因序列,酶切后克隆入pCA13质粒,构建重组病毒质粒pCA13-SEA。将鉴定正确的pCA13-SEA与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3通过Lipofectamine 2000共转染HEK293细胞,经同源重组产生重组腺病毒Ad-SEA。Ad-SEA在293细胞中大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化、测定其滴度。结果:经PCR扩增、酶切鉴定、序列测定证实,SEA基因成功克隆到溶瘤腺病毒载体中,可实现SEA基因的表达。结论:成功构建了表达超抗原SEA基因的溶瘤腺病毒载体,为进一步研究该病毒对膀胱肿瘤靶向治疗的作用奠定了基础。
- 范涛郝林贺厚光梁清董秉政胡建鹏韩从辉
- 关键词：溶瘤腺病毒超抗原SEA肿瘤
- 超抗原及靶向治疗肿瘤作用进展(英文)被引量：1
- 2009年
- 超抗原作为一种强大的T细胞激活剂,单用极低浓度便可激活大量的T淋巴细胞克隆来杀伤肿瘤细胞,但这种杀伤作用缺乏特异性。靶向治疗是现阶段肿瘤治疗的新技术,可针对各种机制来抑制肿瘤的发生和发展或消除肿瘤。对此,通过单抗导向或将超抗原结合于肿瘤细胞表面以及基因工程等手段,国内外的学者已在超抗原的靶向抗肿瘤治疗方面开展了大量工作,为肿瘤的防治提供了参考依据。
- 郝林韩从辉
- 关键词：超抗原肿瘤
