浙江省公益性技术应用研究计划项目(2011C22013)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
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- 相关机构：浙江省农业科学院浙江师范大学更多>>
- 发文基金：浙江省公益性技术应用研究计划项目国家兔产业技术体系建设项目浙江省重点科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 兔支气管败血性波氏杆菌fimN基因的原核表达被引量：2
- 2011年
- 应用PCR方法扩增兔支气管波氏杆菌(Bb)的菌毛蛋白基因(fimN),将fimN基因克隆到表达载体pET-28a(+)中,获得重组质粒pET28a-fimN。将此重组质粒转化受体菌BL21后,用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE结果显示表达蛋白分子量大小约为27 kD,与理论预期值相符。用Western-blot试验分析纯化的表达产物,结果表明,该重组蛋白能与Bb阳性血清发生特异性反应。
- 章春桃刘燕韦强肖琛闻鲍国连季权安
- 关键词：波氏杆菌纯化
- 兔支气管败血波氏杆菌PCR快速检测方法的建立及应用
- 参考GenBank中支气管败血波氏杆菌fimN基因序列设计了一对特异性引物,扩增出大小为387bp的目的基因片段,优化PCR反应条件,建立了兔支气管败血波氏杆菌的PCR快速检测方法。特异性和敏感性试验显示,该方法与大肠杆...
- 刘燕章春桃韦强肖琛闻鲍国连季权安
- 关键词：支气管败血波氏杆菌PCR
- 文献传递
- 兔支气管败血波氏杆菌PCR快速检测方法的建立及应用被引量：1
- 2012年
- 参考GeneBank中支气管败血波氏杆菌fimN基因序列设计了一对特异性引物,扩增出大小为387bp的目的基因片段,优化PCR反应条件,建立了兔支气管败血波氏杆菌的PCR快速检测方法。特异性和敏感性试验显示,该方法与大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、魏氏梭菌和巴氏杆菌均无交叉反应,且检出最低浓度为10pg,可用于临床检测。
- 刘燕章春桃韦强肖琛闻鲍国连季权安
- 关键词：支气管败血波氏杆菌PCR
- 快速检测兔支气管败血波氏杆菌环介导等温扩增(LAMP)方法的建立及应用被引量：3
- 2013年
- 利用Primer ExplorerV4软件,针对兔波氏杆菌16SrRNA基因设计4条LAMP引物,优化反应条件,检测特异性、敏感性并对临床样品进行检测。结果显示,LAMP反应在62℃恒温扩增1h即可完成,操作简便,不需要PCR仪等复杂仪器,结果可经电泳检测及肉眼观察;具有良好的特异性;敏感性为普通PCR的100倍,最低可检测到1.65×10-6 mg/L的细菌基因组DNA。用建立LAMP检测方法对32份疑似兔支气管败血波氏杆菌(Bb)样品检测呈阳性,与PCR检测结果相符。该方法的建立为Bb的临床快速检测提供了新的思路。
- 李科刘燕肖琛闻韦强鲍国连季权安
- 关键词：RRNALAMP
