国家自然科学基金(81170006)
- 作品数：3 被引量：19H指数：2
- 相关作者：李俊明黄自坤徐晓萌叶建青邓亚婷更多>>
- 相关机构：南昌大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 巨噬细胞极化及其在感染性疾病中的作用被引量：11
- 2012年
- 巨噬细胞作为重要的固有免疫细胞和抗原提呈细胞，在机体抗感染免疫中发挥着重要作用。在不同的微环境下，巨噬细胞可发生表型和功能极化从而呈现出不同的功能，一般将经典途径和替代途径活化的巨噬细胞（M1型和M2型）作为巨噬细胞功能可塑性调变的两个极端。随着研究的深入，巨噬细胞极化类型的诱导及特点也逐渐被揭示，其在微生物感染免疫中的作用日益受到重视。
- 黄自坤李俊明
- 关键词：巨噬细胞活化细菌病毒寄生虫
- 中性粒细胞在结核病免疫中的作用及其研究进展被引量：6
- 2014年
- 多形核中性粒细胞(PMN)作为机体重要的固有免疫效应细胞,是机体抵抗病原微生物感染的第一道防线。早期的研究认为PMN仅作为吞噬细胞在结核分枝杆菌(Mtb)感染的早期参与抗结核病的固有免疫应答,但近年来的研究显示PMN还参与了结核病适应性免疫的诱导和调节,对结核病免疫的发展有重要的影响。目前,人们对其在结核病免疫过程中发挥的确切功能、对结核发生发展的影响及相关机制还未完全明了,然而近年来越来越多的研究正逐步加深我们对PMN在结核病免疫中的作用的认识。现就近年来有关PMN在结核病免疫中的研究进展进行综述。
- 徐晓萌李俊明
- 关键词：结核分枝杆菌中性粒细胞免疫杀伤免疫调节
- 慢病毒介导的 TACO-shRNA 通过促进吞噬体与溶酶体融合提高巨噬细胞清除结核分枝杆菌的能力被引量：2
- 2015年
- 目的 构建以富含色氨酸天冬氨酸膜蛋白（ TACO）基因为靶点的短发夹状RNA（ shRNA）表达慢病毒载体,鉴定其下调TACO表达的效果,以及对巨噬细胞吞噬和杀伤胞内结核分枝杆菌（ M.tb）的影响及相关机制. 方法 设计3条靶向小鼠TACO基因的shRNA表达片段及1条随机序列对照片段,插入慢病毒表达载体pSicoR 后利用293 T细胞进行病毒包装. 采用包装成功的慢病毒颗粒感染RAW264 .7细胞,分别采用real-time RT-PCR和Western blot方法鉴定干扰效果. 选择沉默效果最佳的重组慢病毒感染RAW264.7细胞,48 h后再采用M.tb对这些巨噬细胞进行感染,倍比稀释培养法进行细胞内荷菌量的检测,免疫荧光结合激光共聚焦显微镜检测巨噬细胞内M.tb与溶酶体的共定位情况,cyto-ID细胞自噬检测试剂盒检测各组细胞的自噬水平,Western blot法检测自噬相关蛋白LC3的表达水平.结果 测序结果证实重组慢病毒表达载体均构建成功. 靶向TACO基因的3种重组慢病毒均可下调RAW264 .7细胞中TACO的表达,其中LV-pSRT1的效果最佳. LV-pSRT1感染组RAW264 .7细胞内的荷菌量在感染后0 h时即显著低于对照慢病毒（LV-pSRTc）感染组（5.50×104 vs 8.1×104, P〈0.05）. 以M.tb感染后0 h时间点的细胞内荷菌量为基准,M.tb感染后48 h和72 h时LV-pSRT1感染组RAW264.7细胞内M.tb 的存活率显著低于对照慢病毒感染组（48 h： 134.54% vs 213.58%, P〈0.05; 72 h：148.18%vs 262.96%, P〈0.05）. 与对照慢病毒感染组比较,LV-pSRT1感染组RAW264.7细胞内M.tb与溶酶体的共定位率显著上调（75.67%vs 10.66%, P〈0.05）,同时细胞的自噬水平显著上调（16.20%vs 8.50%, P〈0.05）,LC3Ⅱ的相对表达水平也显著提高（0.51 vs 0.34, P〈0.05）. 结论 TACO基因特异性RNAi慢病毒表达载体可有效抑制RAW264.7细胞中TACO的表达,抑制巨噬细胞对M.tb的吞噬能力,增强巨噬细胞对胞内M.tb的清除能力. 下调TACO表达对巨噬细胞杀�
- 陈洁呙阳邓亚婷江红黄自坤罗清叶建青李俊明
- 关键词：慢病毒巨噬细胞结核分枝杆菌
