黑龙江省教育厅科学技术研究项目(11521021)
- 作品数：4 被引量：24H指数：4
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- 转GsCBRLK/SCMRP双价基因苜蓿耐碱性及氨基酸含量分析被引量：6
- 2014年
- 从野生大豆盐碱胁迫基因表达谱中筛选并克隆到GsCBRLK基因,与人工合成的高甲硫氨酸含量SCMRP基因构建成双价植物表达载体,将其转入苜蓿,获得超量表达的转基因苜蓿,并进行耐碱性分析。结果显示,经过100、150 mmol L–1 NaHCO3处理14 d后,转基因株系生长状态良好,而非转基因对照株系萎蔫、失绿、甚至死亡;转基因株系的丙二醛含量和相对质膜透性显著低于非转基因株系(P<0.05),而SOD酶活性显著高于非转基因对照(P<0.05),说明超量表达GsCBRLK基因增强了苜蓿的耐碱能力;各转基因株系的甲硫氨酸含量均比对照植株高,表明SCMRP基因的导入提高了苜蓿叶片甲硫氨酸的含量。
- 赵阳朱延明柏锡纪巍吴婧唐立郦才华
- 关键词：转基因苜蓿氨基酸含量耐碱性
- 野生大豆GsbZIP33基因的分离及胁迫耐性分析被引量：11
- 2011年
- bZIP(basic leucine zipper)类转录因子在植物的生长发育、光形态建成、光信号传导及非生物胁迫反应中发挥重要的作用,已成为非生物胁迫基因工程领域的研究热点。本研究以野生大豆(Glycine soja)为材料,利用同源克隆的方法克隆了GsbZIP33转录因子基因,该基因与大豆GmbZIP33(DQ787064)及拟南芥AtbZIP53(NP_171677.1)分别具有95%和54%的相似性,同属于bZIP-S亚家族的成员。GsbZIP33能够响应高盐、干旱和低温胁迫,并且在根和叶中具有不同的表达模式。超量表达GsbZIP33基因的拟南芥对盐胁迫的敏感性提高。以上结果表明,GsbZIP33基因是野生大豆bZIP家族的新成员,并且参与植物非生物胁迫反应过程,意味着该基因在非生物胁迫基因工程研究领域具有良好的理论研究和实际应用价值。
- 才华朱延明柏锡纪巍李勇王冬冬孙晓丽
- 关键词：野生大豆转录因子非生物胁迫
- 植物亚细胞定位载体卡盒pCEG的构建及验证被引量：4
- 2011年
- GFP基因被广泛地应用于植物转基因以及基因功能验证研究,然而构建与GFP融合的植物表达载体,常会因酶切位点难以选择,而使得载体构建过程复杂,周期长。以含GFP的质粒pCAMBIA-1302为基础,消除此质粒本身的多克隆位点(MCS),并在此质粒GFP基因序列前插入原核表达载体pET-32b的多克隆位点,构建了植物GFP亚细胞定位载体卡盒pCEG;采用农杆菌介导的转化方法,将此载体卡盒pCEG导入模式植物烟草叶片中进行瞬时表达,用激光共聚焦显微镜观察GFP蛋白的亚细胞定位情况,发现GFP蛋白均匀的在细胞质和细胞核中表达,证明此载体卡盒可用于植物基因的亚细胞定位分析,并为构建目的基因与GFP融合的植物表达载体提供了很多可用的酶切位点,对植物基因功能验证提供了分子操作简便的植物表达载体卡盒,具有重要的利用价值。
- 朱丹王希朱延明陈超李勇柏锡才华纪巍
- 关键词：亚细胞定位GFP烟草
- 野生大豆转录因子GsNAC20基因的分离及胁迫耐性分析被引量：5
- 2011年
- NAC(NAM,ATAF1/2,CUC2)转录因子作为一类新型转录因子已成为非生物胁迫基因工程领域的研究热点。本研究以野生大豆(Glycine soja)为材料,利用酵母单杂交的方法筛选到一个能够与MYB1AT元件(核心序列为AAACCA)结合的转录因子基因,该基因与大豆NAC20(EU440353.1)基因具有99%的相似性,命名为GsNAC20。GsNAC20蛋白含有典型的NAC结构域和转录激活区。酵母试验表明,GsNAC20转录因子能够与耐逆相关顺式元件MYB1AT特异结合,但不具有自激活功能。细胞定位分析证明该基因位于细胞核中,符合转录因子的特征。GsNAC20能够响应高盐、干旱和低温胁迫,并且在根和叶中具有不同的表达模式。超量表达GsNAC20基因的拟南芥对盐胁迫的敏感性提高。以上结果表明GsNAC20参与植物非生物胁迫反应过程,该基因在非生物胁迫基因工程研究领域具有良好的理论研究和实际应用价值。
- 才华朱延明李勇柏锡纪巍王冬冬孙晓丽
- 关键词：野生大豆转录因子非生物胁迫
