中国博士后科学基金(20060400779)
- 作品数：10 被引量：40H指数：5
- 相关作者：蒲小勇王怀鹏王行环吴一龙周香雪更多>>
- 相关机构：广东省人民医院中山大学附属第一医院南方医科大学南方医院更多>>
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- 胰岛素样生长因子1基因治疗提高老龄大鼠eNOS mRNA和蛋白的表达被引量：3
- 2012年
- 目的 探讨阴茎海绵体内注射胰岛素样生长因子1（ IGF-1）基因能否提高老年性大鼠阴茎勃起功能及其对表皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达的影响.方法 实验分为3组,老年组：24月龄SD雄性大鼠20只,按随机数字表法随机又分为2组：PBS对照组和100μg IGF-1质粒注射组,每组10只；青年对照组：4月龄SD雄性大鼠10只.注射后4周行电刺激检测大鼠阴茎海绵体内压（ICP）和平均动脉压（MAP）,分析比较IGF-1基因治疗的效果；RT-PCR和Western印迹检测阴茎海绵体组织中eNOS基因mRNA和蛋白的表达.结果 IGF-1基因治疗后4周,电刺激发现老年PBS对照组ICP/MAP和总ICP明显均低于青年对照组（均P＜0.05）；IGF-1质粒注射组ICP/MAP和总ICP均明显高于PBS对照组（均P＜0.05）,和青年对照组相仿.IGF-1质粒注射组eNOS mRNA和蛋白表达均明显高于PBS对照组（0.62±0.16比0.25±0.08,0.71±0.19比0.27 ±0.09,均P＜0.05）.结论 IGF-1基因治疗能够改善老龄大鼠的勃起功能,同时提高eNOS的含量.
- 蒲小勇闻安民郑祥光刘久敏周香雪徐战平王怀鹏张仁礼肖恒军司徒杰
- 关键词：胰岛素样生长因子I基因疗法老龄
- TRPM及TRPV家族mRNA在大鼠生精细胞中的表达被引量：2
- 2008年
- 目的探讨瞬时受体电位M型(TRPM)及V型(TRPV)家族基因在大鼠生精细胞中的表达。方法采用机械法分离大鼠生精细胞,TRIzol法提取细胞总RNA,RT-PCR合成并扩增目的基因,琼脂糖凝胶电泳检测目的基因的存在,实时荧光定量RT-PCR技术检测目的基因相对表达量。结果在大鼠生精细胞中检测到TRPM3、TRPM4、TRPM7及TRPV5mRNA的表达,未能检测到TRPM1、TRPM2、TRPM5、TRPM6、TRPM8、TRPV1、TRPV2、TRPV3、TRPV4及TRPV6mRNA的表达。实时荧光定量RT-PCR技术检测显示TRPM家族在大鼠睾丸生精细胞中的表达以TRPM7表达量最高,相当于内参β-actin的(0.0430±0.0034)%,TRPM3和TRPM4表达相对较弱,分别相当于TRPM756%和63%。大鼠睾丸生精细胞中TRPV家族仅存在TRPV5的表达,其表达量相当于内参β-actin的(0.0157±0.0029)%。结论大鼠生精细胞中存在多种TRPM及TRPV家族基因的表达,其中TRPM4及TRPM7mRNA在大鼠生精细胞中呈相对较高表达。本研究结果将为研究生精细胞中TRP通道的功能及TRP通道各亚型之间的相互关系提供参考依据。
- 李世林王行环王怀鹏杨中华高炜城蒲小勇
- 关键词：生精细胞
- 增龄对阴茎海绵体组织胰岛素样生长因子-1表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨年龄对大鼠阴茎海绵体组织中胰岛素样生长因子-1（IGF-1）表达的影响，探讨老年性ED的可能机制。方法实时定量PCR检测IGF-1在青年组（n=10）和老龄组（n=10）大鼠阴茎海绵体组织中mRNA的表达，免疫组织化学染色检测IGF-1蛋白的表达和定位。结果免疫组织化学染色IGF-1在阴茎海绵体内皮细胞和平滑肌细胞表达，与青年组比较，老龄组大鼠IGF-1明显降低（P〈0．05）。结论年龄是影响IGF-1表达水平的因素之一，IGF-1的低表达可能与老年性ED的发生有关。
- 蒲小勇闻安民郑祥光刘久敏王怀鹏徐战平周香雪
- 关键词：胰岛素样生长因子-1勃起功能障碍老年人
- 联合检测UBC、HA和CK20诊断膀胱癌的临床价值被引量：8
- 2008年
- 背景与目的:膀胱癌是最常见的泌尿系统肿瘤,尿脱落细胞学检查是无创性诊断的金标准,但敏感性较低。本研究探讨联合运用尿膀胱癌抗原(urinary bladder cancer,UBC)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)和细胞角蛋白20(cyto keratin20,CK20)诊断膀胱癌的临床价值。方法:对64例膀胱癌患者、20例泌尿系良性疾病患者,在膀胱镜检查之前留尿,分别采用酶链免疫吸附实验、放射免疫分析和逆转录聚合酶链反应检测UBC、HA和CK20在尿液中的表达,同时行脱落细胞学检查,分析比较4种方法诊断膀胱癌的临床价值。结果:UBC、HA和CK20诊断膀胱癌的敏感性分别为85.9%(55/64)、89.1%(57/64)、78.1%(50/64),与脱落细胞学(40.6%)检查比较,差异有统计学意义(P<0.01);4种方法诊断膀胱癌的特异性分别为85.0%(17/20)、80.0%(16/20)、80%(16/20)和95%(19/20)。各分级和分期肿瘤UBC、HA和CK20的敏感性分别高于尿脱落细胞学检查,UBC值各分级和分期比较差异无统计学意义(P>0.05)。HA检测G2、G3组较G1组明显增高(P<0.01),但G2、G3组间比较差异无统计学意义(P>0.05);各分期之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。CK20检测随肿瘤的分级与分期的增高,敏感性增高(P<0.01)。联合运用UBC、HA和CK20敏感性可达96.9%,特异性达100%。结论:联合UBC、HA和CK20能提高诊断膀胱癌的敏感性和特异性,初步诊断能够代替膀胱镜检查。
- 蒲小勇王志平陈一戎吴一龙王怀鹏王行环
- 关键词：膀胱肿瘤细胞角蛋白
- 三种PDE_5抑制剂的药代动力学、起效时间和维持时间被引量：7
- 2007年
- 勃起功能障碍（Erectile dysfunction，ED）是指不能达到或维持勃起足以进行满意的性生活^[1]。ED的治疗目前仍主要应用口服药物治疗。西地那非（Sildenafil）、伐地那非（Vardenafil）和他达拉非（Tadalafil）是其中研究较多的3种。西地那非由美国辉瑞（Pfizer）公司研制生产的一种磷酸二脂酶5（phosphodiesterase5，PDE5）抑制剂，
- 蒲小勇王行环王怀鹏吴一龙
- 关键词：PDE5抑制剂药代动力学起效时间口服药物治疗他达拉非
- 胰岛素样生长因子-1在勃起功能障碍基因治疗中的价值被引量：9
- 2007年
- 一、目前ED基因治疗的现状
基因治疗勃起功能障碍（erectile dysfunction，ED）是随着分子生物学实验技术的成熟发展起来的一种新兴的治疗方法，初步研究显示了较好的治疗前景，国际上近几年进行了大量的研究，但仍存在很多的问题需要探讨。
- 蒲小勇王行环王怀鹏吴一龙
- 关键词：勃起功能障碍基因疗法胰岛素样生长因子
- hIGF-1基因治疗老龄大鼠勃起功能障碍的剂量及时效研究被引量：13
- 2008年
- 目的:探讨阴茎海绵体内注射胰岛素样生长因子1(hIGF-1)基因提高老年性大鼠阴茎勃起功能的最佳剂量和作用实效。方法:4月龄SD雄性大鼠10只(青年组);24月龄SD雄性大鼠40只,随机分为5组,每组10只:PBS对照组、hIGF-1基因10μg注射组、100μg注射组和1000μg注射组,注射后在不同时间段4周和8周行电刺激检测大鼠阴茎海绵体内压(ICP)和平均动脉压(MAP)的测定,分析比较不同剂量和不同时间hIGF-1基因治疗的效果;RT-PCR检测hIGF-1基因mRNA的表达。结果:电刺激发现老年组较青年组ICP/MAP和总ICP明显降低(P<0.05)。4和8周的治疗之后,10μg注射组、100μg注射组和1000μg注射组较PBS对照组ICP/MAP和总ICP均明显提高(P<0.05);100μg注射组和1000μg注射组在4和8周时ICP/MAP和总ICP值和青年组相仿;10μg注射组虽然不能达到和青年组相仿的治疗效果,但仍然有治疗意义;所有hIGF-1基因治疗组均可检测到hIGF-1 mRNA的表达。结论:hIGF-1基因治疗能够提高老龄大鼠的勃起功能,100μg即可达到有效的治疗,hIGF-1基因治疗至少能够维持8周时间。
- 蒲小勇王行环王怀鹏高炜城杨中华李世林邓春华毛向明
- 关键词：勃起功能障碍老龄胰岛素样生长因子1基因治疗
- 老年性勃起功能障碍的基因治疗被引量：7
- 2008年
- 勃起功能障碍(ED)的发病率随着年龄的增长而增高,基因治疗是近年来新兴的一种治疗方法,各种靶基因、不同的载体以及不同的治疗策略用于ED的基因治疗,均取得了一定的治疗效果。本文就老年性ED的基因治疗现状作一综述。
- 蒲小勇吴一龙周香雪王行环
- 关键词：勃起功能障碍老年基因治疗
- 生长因子与勃起功能障碍的基因治疗被引量：3
- 2011年
- 生长因子具有广泛的生物学作用。勃起功能障碍(ED)的基因治疗是ED治疗的新探索,本文就生长因子,尤其是血管内皮生长因子(VEGF)和胰岛素样生长因子1(IGF-1)在ED基因治疗中的作用和价值作一综述。
- 蒲小勇王怀鹏
- 关键词：勃起功能障碍基因治疗
- 转染胰岛素样生长因子-1基因对原代培养的阴茎海绵体平滑肌细胞增殖的影响被引量：2
- 2012年
- 目的观察转染胰岛素样生长因子-1（IGF-1）基因对原代培养的阴茎海绵体平滑肌细胞（CCSMCs）增殖的影响，探讨IGF-1基因治疗勃起功能障碍（ED）的可能机制。方法构建pcDNA3．1-IGF-1，体外原代培养大鼠CCSMCs并免疫组织化学染色鉴定；CCSMCs分3组：转染pcDNA3．1-IGF-1组、pcDNA3．1组和对照组，转染后不同时间段（3、5、7、9d）噻唑蓝（Mrrr）比色法检测细胞增殖，同时不同时间段（24、48、96h）酶免疫分析法（EIA）定量检测CCSMCs分泌IGF-1含量的变化。结果成功克隆pcDNA3．1-IGF-1载体，成功原代培养CCSMCs；转染pcDNA3．1．1GF-1组细胞在转染后5、7、9d（分别为0．72±O．08、0．80±0．06、0．82±0．07）较转染pcDNA3．1组（分别为0．58±0．07、0．63±0．05、0．6l±0．08）和对照组（0．59±0．06、0．61±0．07、0．62±0．03）增殖明显增加，呈时间依赖性，差异有统计学意义（P〈0．05）。与转染pcDNA3．1组[分别为（46±7）、（48±9）、（50±11）μg/L]和对照组[分别为（47±11）、（52±10）、（51±10）μg/L]比较，转染pcDNA3．1-IGF-1组细胞在转染后24、48、96hCCSMCs分泌的IGF-1含量[分别为（58±8）、（69±11）、（71±8）μg/L]增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论转染IGF-1基因可提高CCSMCs的增殖能力和增加IGF-1的分泌，可能是IGF-1基因治疗ED的基础。
- 蒲小勇闻安民刘久敏郑祥光王怀鹏徐战平张仁礼周香雪
- 关键词：胰岛素样生长因子-1勃起功能障碍增殖阴茎海绵体平滑肌细胞
