江苏省麻醉学重点实验室开放课题(KJS07003)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
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- 相关机构：徐州医学院附属医院徐州市第一人民医院徐州医学院更多>>
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- JNK信号传导通路在星形胶质细胞缺氧/复氧后损伤的作用
- 2013年
- 目的 建立SD大鼠星形胶质细胞（astrocyte,AC）缺氧/复氧损伤模型,探讨JNK信号转导通路与星形胶质细胞损伤的关系.方法 体外培养新生SD大鼠星形胶质细胞,传至第3代,细胞自然纯化,实验设正常对照组（N）、SP600125组（SP组,10 μmol /L）、缺氧/复氧组（H/R组）和缺氧/复氧＋SP600125组（H/R＋SP组）.分别利用MTT法、AnnexinV/碘化丙啶（propidium iodide,PI）双染法、WB法检测缺氧8 h,复氧4、6、12、24 h时细胞存活率、凋亡率、c-Jun氨基末端激酶（JNK）、磷酸化JNK（p-JNK）的变化.结果 ①缺氧/复氧后细胞活力出现明显下降,SP600125阻断JNK通路后细胞活力高于H/R组;②缺氧/复氧后细胞凋亡率增加,SP600125阻断JNK通路后能够减轻细胞凋亡.③各组AC的JNK水平无显著变化,缺氧/复氧干预后p-JNK表达上调,用SP600125阻断JNK通路后,H/R＋SP组较H/R组p-JNK水平降低.结论 JNK信号通路参与了星形胶质细胞缺氧/复氧损伤过程.
- 李海亮许鹏程董瑞国
- 关键词：JNK缺氧复氧
- 辛醇对大鼠脑缺血再灌注后基质金属蛋白酶-9组织型金属蛋白酶抑制剂-1表达及脑水肿的影响被引量：8
- 2015年
- 目的 探讨辛醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注后基质金属蛋白酶-9（MMP-9）,组织型金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）的表达与其对脑水肿的影响,以及辛醇脑保护的可能机制.方法 雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（n=24）,手术组（n=24）,DMSO溶剂对照组（n=24）,辛醇治疗组（n=24）.线栓法制备大脑中动脉缺血模型,于缺血2h/再灌注24 h,分别采用TTC法检测脑梗死体积,干湿重法测定脑组织含水量,免疫荧光法检测MMP-9、TIMP-1阳性细胞数,Westernblot法检测MMP-9、TIMP-1蛋白的表达.结果 在缺血2h/再灌注24 h条件下,辛醇治疗组与手术组相比脑梗死体积显著减少（P＜0.05）,脑组织含水量明显降低[（78.16±1.47）％ vs （80.88±0.73）％,P＜0.05],MMP-9阳性细胞数显著减少[（10.67±2.16）个/视野vs （29.00±3.40）个/视野,P＜0.05],MMP-9蛋白表达明显降低[吸光度（A）值：（0.14±0.01）vs （0.21±0.02）,P＜0.05],TIMP-1阳性细胞数显著增加[（27.83±2.13）个/视野vs （5.67±1.03）个/视野,P＜0.05],TIMP-1蛋白表达明显增多[吸光度（A）值：（0.42±0.01）vs （0.28±0.01）,P＜0.05],手术组与溶剂对照组相比,各指标无显著差异（P＞0.05）.结论 辛醇的应用能减轻脑水肿,减少脑梗死体积,对脑组织起到保护作用;通过调节MMP-9、TIMP-1的表达可能是辛醇对脑组织的保护机制之一.
- 晏美娟吴嶛程言博耿德勤许鹏程董瑞国
- 关键词：辛醇再灌注损伤脑水肿基质金属蛋白酶-9
- 亚低温对星形胶质细胞缺氧后缝隙连接功能的影响被引量：2
- 2018年
- 目的观察亚低温对缺氧条件下星形胶质细胞缝隙连接变化的影响,探讨亚低温对脑缺血的保护机制。方法原代培养星形胶质细胞,传至第3代以神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定星形胶质细胞,采用三气培养箱分别调节温度,缺氧12 h。分为正常对照组(对照组)、常温(37.0 oC)缺氧组、亚低温(32.0 oC)缺氧组。用锥虫蓝染色法测定各组缺氧后星形胶质细胞存活率;应用划痕标记染料示踪技术在激光扫描共聚焦显微镜下测定缺氧12 h荧光黄染料在缝隙连接间的扩散距离;细胞免疫荧光技术检验缺氧星形胶质细胞缝隙连接的主要缝隙连接蛋白成分Cx43表达水平。结果常温缺氧组部分细胞边缘皱缩;亚低温缺氧组经亚低温干预后大部分细胞轮廓较清晰,胞周光晕明显,细胞存活力较常温缺氧组增加;对照组、常温缺氧组及亚低温缺氧组死亡细胞数分别为(6.19±0.29)个、(8.54±0.99)个和(6.89±2.41)个,对照组死亡细胞数最少,组间两两比较均差异有统计学意义(P<0.05);常温缺氧组荧光黄染料仍可在细胞间进行扩散,扩散距离和Cx43荧光强度较对照组无明显变化(P>0.05);亚低温缺氧组与对照组和常温缺氧组比较,荧光染料扩散距离减少、Cx43荧光强度降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论亚低温可以减轻体外培养星形胶质细胞的缺氧损伤;降低Cx43表达而抑制缝隙连接功能,可能是亚低温干预的脑保护机制之一。
- 朱士光孙秀媛樊红彬耿德勤许鹏程董瑞国
- 关键词：星形胶质细胞CX43亚低温缺氧
