国家自然科学基金(30660021) 作品数:19 被引量:24 H指数:3 相关作者: 杨明 陈汉彬 罗洪斌 贾若 寻慧 更多>> 相关机构: 贵阳医学院 贵州医科大学 湖北民族大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省社会发展科技攻关计划项目 贵州省科技计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 更多>>
基于COI基因分析的双齿蚋分子分类研究 2019年 为了确定COI基因序列分析在蚋科中的分类地位,本研究测定了双齿蚋(Simulium bidentatum) COI基因序列,分析该基因序列特征;下载与其同源性较高的12个蚋种的COI基因序列15条,进行同源性分析和分子系统发育研究。结果显示,双齿蚋COI基因序列(DQ534946)与S. notiale、S. snowi、S. nyssa等蚋种的COI基因序列同源性最高,在贝叶斯分析所构建的分子系统进化树中,不同蚋组的序列各自聚成一枝,双齿蚋序列(DQ534946)未与其他任何蚋种聚为一枝。研究结果表明,双齿蚋COI基因序列与蚋亚属序列同源性较高,COI基因序列分析能较好建立蚋亚属内组间关系,双齿蚋未与其他蚋组序列聚为一枝,分类至淡足蚋组并不合适,支持分类至阿根蚋组。本研究进一步明确了COI基因序列分析在蚋科分子系统发育研究中的意义,并在一定程度上解决了双齿蚋在蚋科的分类争议。 罗洪斌 何艳霞 陈晓丹 樊莎莎关键词:COI基因 分子分类 中国厌蚋一新种记述(双翅目,蚋科)(英文) 2010年 记述采自辽宁和黑龙江的中国蚋属厌蚋亚属1新种:四丝厌蚋Simulium (Boophthora) quattuorfile sp.nov.。研究标本收藏于贵阳医学院生物学教研室。 陈汉彬 吴慧 杨明关键词:蚋科 红色蚋细胞色素氧化酶COI基因克隆及鉴定 被引量:3 2010年 目的对红色蚋细胞色素氧化酶亚基I(COI)基因进行克隆、鉴定与序列分析。方法以红色蚋成虫基因组DNA为模板,设计特异性引物进行PCR扩增、纯化基因片段后连接、转化大肠杆菌DH5a,筛选阳性克隆、测序并与NCBI数据库中的核酸序列进行同源性比对分析,掌握其基因序列及其蛋白质结构特征。结果克隆序列的结果表明COI基因全长1542 bp,编码513个氨基酸,编码蛋白等电点为5.84,相对分子量为56 KDa,具有一个细胞色素氧化酶亚基I的核心保守结构;其基因碱基组成A、T、C、G分别为28.60%,36.90%,17.76%,16.74%,G+C含量为34.5%,A+T含量为65.5%。结论成功克隆出红色蚋CO I基因序列,可为进一步研究奠定基础。 罗洪斌 杨明 陈汉彬关键词:克隆 黑龙江省蚋类(双翅目:蚋科)补点调查 2009年 目的:对黑龙江省进行蚋类补点调查,进一步补充黑龙江省蚋类区系资料。方法:选择黑龙江省6个代表性地区采集幼蚋,经隔离培养育出两性成虫,采用常规方法制片、鉴定、编制名表并进行相关讨论。结果:记载黑龙江省蚋属3亚属13种,其中含3个新种。结合前人报告,该省计已知蚋类3属8亚属35种。结论:黑龙江省具有蚋类多样性及明显的地方性。 吴慧 杨明 陈汉彬关键词:蚋科 克隆医学昆虫蚋COI全基因的引物设计方法研究 被引量:9 2008年 目的借助专有软件设计蚋科COI基因的PCR引物,并且检验所设计引物的PCR扩增效率和特异性。方法运用Primer Premier 5.0软件设计4对蚋科COI基因的PCR扩增引物,通过PCR扩增后进行琼脂糖凝胶电泳检测实验。结果在所设计的4对引物中只有1对PCR扩增特异性好且效率高,包含COI基因全序列。结论设计引物时应遵循一定原则,但有一定弹性,可根据模板特点进行设计方法的改良。 罗洪斌 杨明 陈汉彬关键词:克隆 COI 引物设计 兴义维蚋气管鳃形态发育过程的初步研究 被引量:1 2018年 目的:探究兴义维蚋幼虫期气管鳃形态发育的基本过程。方法:参考文献设计、建造蚋类实验室饲养系统,野外采集蚋卵、幼虫和蛹,用常规形态学和DNA条码技术鉴定蚋种,并在自行设计的饲养系统中饲养,每24 h收集幼虫;在显微成像系统下观察蚋幼虫各龄期气管鳃形态。结果:改进和建立了原代野生蚋类人工饲养系统,鉴定采集的蚋种为兴义维蚋,其1~5龄幼虫期无明显气管鳃分子化形态,6龄幼虫中可见囊状未分支气管鳃,7龄幼虫时气管鳃发生分支化,形成8条呼吸丝,分4对,其中5对呼吸丝透过幼虫表皮可见。结论:成功设计并建立了野生蚋类原代人工饲养系统,兴义维蚋1~5龄幼虫气管鳃呈透明团块状,6龄分支化形态为囊状未分支形态,7龄幼虫出现完全的分支化形态。 贾若 杨曜铭 寻慧 付小珍 曹梅 高维平 杨明关键词:气管鳃 贵州威宁草海国家级自然保护区蚊蚋类调查 2018年 目的:调查贵州威宁草海国家级自然保护区蚊蚋相。方法:收集贵州威宁草海国家级自然保护区内有水环境的积水或流水中水生植物和石头上的蚊、蚋类幼虫、蛹,培育出蚊、蚋成虫,经形态学和DNA条形码技术进行分类鉴定。结果:在保护区沿岸共采集到蚊幼虫400余条,育出成虫68头;蚋蛹400头、幼虫1 000余条,育出成虫159头;经经形态学和DNA条形码技术鉴定为蚊科(Family Culicidae Meigan,1818)2亚科3属共10种,占贵州省记述种9.17%;蚋科(Family Simuliidae Newman,1834)1亚科1属共8种,占贵州省记述种21.62%;调查亦见贵州省新记述五指库蚊、窄足真蚋和昌隆蚋。结论:此次调查贵州威宁草海国家级自然保护区蚊科10种、蚋科8种,多为嗜吸人、畜血常见种。 杨曜铭 曽祥光 杨明关键词:昆虫 害虫 DNA条形码技术 兴义维蚋蚋卵(胚胎)原代培养细胞核型分析 2016年 目的:分析兴义维蚋蚋卵(胚胎)原代培养细胞核型。方法:应用组织块法处理野外采集兴义维蚋蚋卵(胚胎),以改良Shields and Sang M3为基础培养基,pH 6.0-6.5,置于28℃生化恒温培养箱中进行原代细胞培养,选取10个处于有丝分裂增殖时期的细胞,通过秋水仙素处理,制作中期染色体标本,进行核型分析。结果:显微镜下观察,前中期染色体为3对(2n=6),染色体凝集程度未达最大化呈现长杆状,染色体长度为9.43-13.58μm;中期染色体为3对(2n=6),高度凝集呈现短杆状,染色体长度为2.43-4.67μm,两条中期染色体臂比值〈1.67,属中着丝粒染色体,4条染色体臂比值〉1.67,属亚中着丝粒染色体。结论:初步阐析了兴义维蚋蚋卵(胚胎)原代培养细胞核型特征。 周静 刘占钰 徐旭 崔立秋 陈汉彬 杨明关键词:蚋科 胚胎 原代细胞 核型分析 利用DNA条形码技术发现贵州省蚋类新记录 被引量:2 2016年 目的:综合利用DNA条形码序列和形态学特征鉴定蚋种。方法:利用车载式捕虫网于2014年7-9月在贵州省雷山、江口、德江、关岭和开阳5县采集蚋类标本,并进行初步的形态学鉴定;测定雌蚋DNA条形码序列,利用生命数据条形码系统( BOLD )及系统发育分析方法鉴定蚋种。结果:初步确定划分蚋属下蚋种的K2P距离阈值为4%,利用该阈值及生命数据条形码系统鉴定153只雌蚋为麻子绳蚋。结论:麻子绳蚋为贵州省蚋类新记录,分布于雷山、江口、德江、关岭和开阳5县。 张圣芳 贾若 杨曜铭 王毅 寻慧 陈汉彬 杨明关键词:蚋科 DNA条形码 系统发育分析 利用车载式采集方法研究贵州飞行昆虫多样性 被引量:1 2016年 目的:探讨利用车载式采集方法研究贵州飞行昆虫多样性的可行性。方法:选择贵州省7县,采用自制车载式捕虫网分别在日出和日落前后1 h以车速48 km/h沿河采集飞行昆虫,比较日出和日落前后1 h采集的各类飞行昆虫的数量,体视显微镜下进行形态学初步分类。结果:共采集昆虫标本49 622只,日出前后1 h采集数量(7 842只)低于日落前后1 h采集数量(41 780只),差异有统计学意义(P<0.05);所采集除昆虫标本中除1只为双尾纲昆虫外,其余均为昆虫纲昆虫,共8目145科,其中20科(分别属于5个目)此前未见分布于贵州的报道,优势类群鞘翅目、双翅目、鳞翅目、膜翅目的科数分别占总科数的26.2%、25.5%、20.7%和20.0%,半翅目和蜻蜓目各占4.8%和1.4%,襀翅目和脉翅目各占0.7%。结论:利用自制车载式捕虫网采集飞行昆虫研究当地昆虫多样性的方法可行,日落前后采集效果最佳。 张圣芳 杨曜铭 潘威 贾若 寻慧 王毅 杨明关键词:昆虫 多样性