国家自然科学基金(30640047)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 相关作者：贾秀华黄冰彭展廖东江葛坚更多>>
- 相关机构：中山大学中山大学附属第三医院广东药学院更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- βLCR对β地中海贫血基因在转基因小鼠体内表达的影响
- 2007年
- 目的:明确在转基因小鼠体内,βLCR对β地中海贫血基因表达的影响。方法:将完整人β-IVSⅡ-654地中海贫血基因,与串连了人βLCR的β-IVSⅡ-654地中海贫血基因分别经显微注射法制作转基因小鼠;荧光定量RT-PCR法检测β-IVSⅡ-654地贫基因在转基因小鼠体内的表达;采用统计分析比较两类转基因鼠中外源基因的表达量。结果:成功建立两类整合了人β-IVSⅡ-654地贫基因的转基因小鼠模型。荧光定量RT-PCR分析结果表明,在整合了串连人βLCR的β-IVSⅡ-654地贫基因的小鼠体内,外源基因mRNA的表达量远高于仅整合β-IVSⅡ-654地贫基因的小鼠(统计分析P值)。结论:βLCR核心片段的存在是β珠蛋白基因家族(包括β-地贫基因)在转基因小鼠体内获得高效表达的必要条件。
- 卢丽黄冰陈系古黄树林杨国柱高楠贾秀华彭展
- 关键词：Β地中海贫血转基因小鼠基因表达
- 人表皮细胞与角膜上皮细胞蛋白质组的差异表达初步研究被引量：2
- 2007年
- 目的:应用蛋白质组技术比较人表皮细胞与角膜上皮细胞之间的蛋白质表达差异。方法:实验于2005-11/2006-10在中山大学中山眼科中心国家眼科学重点实验室完成。分别培养人表皮细胞与角膜上皮细胞,裂解原代细胞抽提总蛋白,精确定量后进行双向电泳,扫描电泳凝胶获得二维总蛋白图谱。图谱使用软件辅助比较分析,找出差异表达点,从凝胶中抠取差异点,胶内酶解后用基质辅助激光解吸附/电离飞行时间串级质谱法鉴定差异蛋白。结果:人表皮细胞与角膜上皮细胞蛋白质凝胶分析获得600余个清晰的蛋白质斑点,在比较分析出的26个差异点中初步鉴定出4个差异表达蛋白,分别是细胞内氯离子通道1、Psoriasin、乳酸脱氢酶B和丝氨酸蛋白酶抑制因子。结论:人表皮细胞与角膜上皮细胞在蛋白质表达上有较高的相似性以及较好的可比性,为探索表皮细胞横向分化成角膜上皮细胞的分子机制做出了有益的尝试,并提供了具有一定可操作性的实验方法。
- 林永亮黄冰廖东江高楠葛坚林少春贾秀华罗挺彭展徐晓平
- 关键词：表皮细胞角膜上皮细胞蛋白质组
- 小鼠酪氨酸酶siRNA的体外有效性实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的通过RNAi技术,筛选出针对小鼠酪氨酸酶的有效siRNA,为酪氨酸酶异常等人类疾病的动物模型制作及该类疾病的预防和治疗奠定基础。方法利用针对小鼠酪氨酸酶mRNA的不同干扰片段分别转染小鼠黑色素瘤B16细胞系,同时采用阴性干扰片段转染作为阴性对照,单纯脂质体转染作为空白对照。使用实时荧光定量PCR、酪氨酸酶活性测定和黑色素含量测定3种方法分3个时间点于转染后24、48、72 h对不同组的细胞干扰结果进行检测。结果siNM-011661-001、siNM-011661-002、siNM-011661-003三个干扰片段均能在转染后发挥一定的干扰作用,其中siNM-011661-001在转染后发挥的干扰效果最强,在降低酪氨酸酶基因mRNA表达、酶活性、以及黑素含量三方面分别能起到82.81%、64.73%、52.53%的抑制作用。结论针对小鼠酪氨酸酶的siNM-011661-001序列能在转录后水平发挥高效、稳定的基因沉默作用,是发挥RNAi的优势序列。
- 贾秀华黄冰庄菁朱翔廖东江葛坚林少春徐晓平彭展
- 关键词：RNAI酪氨酸酶B16细胞
- SPF级小鼠超数排卵效果被引量：4
- 2008年
- 目的探求小鼠周龄、品系和季节对SPF级小鼠超数排卵效果的影响。方法在春、夏、冬季对4～10周龄的SPF级BALB／c小鼠和KM小鼠进行超数排卵处理，通过见栓率、产胚率、3．5d胚胎获得量及胚胎类型等方面进行统计学分析。结果小鼠周龄、品系和季节对SPF级BALB／c小鼠和KM小鼠见栓率没有影响；对产胚率、3．5d胚胎获得量和胚胎类型等方面有一定影响。结论SPF级BALB／c小鼠宜用9、10周龄的进行超数排卵处理以供应3．5d胚胎为需要所用，而SPF级KM小鼠使用4～10周龄的都可以；另外，SPF级小鼠超数排卵处理仍宜在春、夏季进行，可以保证获得最佳的效果。
- 黎韡黄冰贾秀华江儒章刘利鸽孙文杰廖秀珍陈敏郑从则
- 关键词：小鼠超数排卵胚胎
