国家自然科学基金(30640016)
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 相关作者：杨国玲张振颖张渊金礼吉张芙蓉更多>>
- 相关机构：大连医科大学大连理工大学大连市友谊医院更多>>
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- 犬小孢子菌在光滑皮肤和头皮组织诱导条件下差异表达基因分析被引量：7
- 2009年
- 目的筛选犬小孢子菌抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)文库中的差异表达基因。方法应用斑点杂交和实时定量PCR技术筛选并检测差异基因;利用BLAST软件在GenBank数据库上进行同源序列比较。结果数据库比对:犬小孢子菌SSH文库中共得到13个差异表达序列,其中8个具有同源基因6个具有功能分类。实时定量PCR检测:FSH1和PQ-LRP基因在儿童头皮组织培养菌株(tester)RNA池中的表达量分别为儿童光滑皮肤培养菌株(driver1)的44.6倍和117倍;P-GAL4和NADH1基因在tester RNA池中的表达量分别为成人头皮组织培养菌株(driver2)的78.2倍和9.8倍。结论儿童头皮培养菌株中的FSH1和PQ-LRP基因较儿童光滑皮肤培养菌株中呈上调表达,P-GAL4和NADH1基因较成人头皮培养菌株中呈上调表达,提示上述基因可能是犬小孢子菌致头癣的重要基因。
- 张渊张振颖杨国玲金礼吉
- 关键词：犬小孢子菌基因表达实时定量PCR
- 利用抑制消减杂交初步构建犬小孢子菌在不同诱导底物表达的差异基因文库被引量：6
- 2009年
- 目的比较犬小孢子菌在儿童与成人头皮组织、儿童头皮组织与儿童光滑皮肤组织为诱导底物表达的差异基因,探讨犬小孢子菌蛋白酶在头癣中的发病机制。方法将犬小孢子菌菌株分别接种于含儿童光滑皮肤组织(driver1)、儿童头皮组织(tester)和成人头皮组织(driver2)三种底物诱导培养基中培养,经抑制消减杂交技术(SSH)分别构建在tester与driver1,tester与driver2培养基中培养的犬小孢子菌菌株正反向差异基因文库,菌液PCR筛选鉴定,对阳性克隆进行测序分析。结果在tester与driver1的正向差异基因文库中初步筛选出1个差异表达基因与编码红色毛癣菌线粒体细胞色素b和NADH1-5具有高度同源性,另15个差异表达基因在真菌界均未知。结论应用SSH技术成功构建了不同底物诱导培养基犬小孢子菌表达的差异基因文库;这个与编码红色毛癣菌线粒体细胞色素b和NADH1-5具有高度同源性的差异表达基因,可能在犬小孢子菌所致头癣中起一定作用,进一步研究该基因的功能对研究头癣的发病机制具有重要意义。
- 张芙蓉张振颖杨国玲金礼吉
- 关键词：犬小孢子菌头癣抑制消减杂交蛋白酶
