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国家重点实验室开放基金(NKLVBP2001002)
作品数:
1
被引量:8
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相关作者:
王朝
王晓玲
刘杉杉
蔺文成
胡峰
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相关机构:
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
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原核表达
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2012
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猪捷申病毒8型rVP1-ELISA检测方法的建立
被引量:8
2012年
为建立猪捷申病毒(PTV)抗体的间接ELISA检测方法,将PTV-8VP1基因克隆至原核表达载体pET-30a中,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta表达重组的VP1蛋白。SDS-PAGE及Western-blot分析结果表明,表达的重组蛋白分子质量约为36.2ku,且能被PTV-8阳性血清特异性识别。以纯化的重组蛋白包被ELISA反应板,建立了检测PTV抗体的间接ELISA方法。特异性试验结果表明,重组VP1蛋白与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型和猪瘟病毒阳性血清不发生反应。敏感性试验结果表明血清稀释至1∶800时仍检测为阳性。该方法的批内、批间变异系数均小于10%,表明具有较好的重复性。利用建立的方法对633份临床样品进行检测,阳性率是88.10%。选取58份临床样品与间接免疫荧光方法作比对试验,两者的符合率是94.80%。
胡峰
刘杉杉
蔺文成
王晓玲
张超范
王朝
刘朝霞
胡泉博
崔尚金
关键词:
猪捷申病毒
原核表达
间接ELISA
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