广东省自然科学基金(021990)
- 作品数：10 被引量：21H指数：4
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- 镉影响腺垂体-肾上腺皮质系统的整体实验被引量：1
- 2005年
- 朱伟杨杏芬魏青赵敏郑树声林忠宁
- 关键词：镉细胞凋亡CASPASE-9
- 镉诱导大鼠腺垂体细胞凋亡及与p38 MAPK&ERK1/2途径介导机制关系的初步研究被引量：4
- 2005年
- 目的了解CdCl2对腺垂体的损伤以及细胞凋亡发生与p38MAPK、ERK12表达的关系,为了解镉致腺垂体毒作用的分子机制提供科学依据。方法采用健康雄性SD大鼠进行整体试验(n=12),分别每天经口灌胃给予0、1.0、2.0、4.0mgkgbwCdCl2,6周后取腺垂体进行指标检测;离体试验采用酶解分离大鼠之原代腺垂体细胞,分别以0、1.56、3.12、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00μmolLCdCl2处理,收获细胞进行检测;特异性阻断剂阻断凋亡效应的试验采用2.65μmolLp38MAPK的特异阻断剂SB203580或10μmolLERK12激酶的特异阻断剂U0126处理细胞,然后以3.12μmolL或100.00μmolL的CdCl2处理细胞后进行相应的检测。检测指标包括:TUNEL法和流式细胞术等检测凋亡。结果整体实验和离体实验结果均显示CdCl2以剂量依赖方式诱导腺垂体细胞发生凋亡(P<0.05);特异性阻断剂效应的研究结果显示2.65μmolLSB203580和10μmolLU0126对TUNEL阳性细胞的相对灰度和凋亡细胞率均有一定的影响。结论在一定的剂量条件下,CdCl2影响腺垂体激素分泌水平,并导致发腺垂体细胞凋亡,MAPKs家族成员p38MAPK和ERK12激酶通路在凋亡发生过程中可能发挥一定的作用。
- 杨杏芬朱伟魏青林忠宁郑树声赵敏陈铁江范瑞全
- 关键词：镉腺垂体细胞凋亡MAPKS
- 氯化镉诱发肾上腺皮质细胞凋亡与蛋白激酶B活力的关系
- 2008年
- 目的了解氯化镉（CdCl2）诱发肾上腺皮质细胞凋亡的发生与蛋白激酶B（protein kinase B，PKB，又称Akt）活力变化的关系。方法体外分离培养豚鼠肾上腺皮质细胞，以蛋白因子添加素Ⅴ和碘化丙啶联合标记，流式细胞仪检测，观察CdCl2诱发细胞凋亡的特征；采用免疫沉淀-化学发光法测定PKB／Akt活力。结果6．25～100．00μmol／L剂量CdCl2处理肾上腺皮质细胞2h，细胞凋亡发生率随剂量增加而增加，25．00μmol／L及更高剂量组与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；回归分析表明，CdCl2剂量与凋亡发生率呈剂量-效应关系。以50．00μmol／L CdCl2处理细胞，细胞凋亡发生率随时间的延长而增加，CdCl2作用15min～4h，平均凋亡率为5．58％～73．08％，其中1、2、4h时间点与对照相比，差异有统计学意义（P〈0．05）；CdCl2处理时间与凋亡发生率呈时间-效应关系。6．25～200．00μmol／L剂量CdCl2处理30min，显示CdCl2可引起肾上腺皮质细胞PKB／Akt表达降低，在一定剂量范围内呈线性关系。结论CdCl2诱发肾上腺皮质细胞凋亡的同时引起细胞内PKB／Akt表达水平的降低。
- 赵敏魏青卢次勇杨杏芬
- 关键词：氯化镉细胞凋亡肾上腺皮质蛋白激酶类
- 镉诱导腺垂体细胞凋亡与半胱天冬酶信号变化初探被引量：8
- 2005年
- 目的 了解氯化镉诱导腺垂体细胞凋亡发生及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(procaspase- 9)mRNA表达的变化,为阐明镉致腺垂体毒作用的分子机制提供科学依据。方法 在整体实验中,将健康雄性SD大鼠 48只,分为 4组,每组 12只,分别每天经口灌胃给予 0、1 .0、2 .0、4. 0mg/kg氯化镉, 6周后进行腺垂体激素促肾上腺皮质激素、黄体生成素、卵泡刺激素水平、超微结构、原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡及procaspase 9mRNA表达检测;离体实验采用酶解分离大鼠之原代腺垂体细胞, 37℃、5%CO2 条件下培养 120h后分别以 0、1. 56、3 .12、6 .25、12.50、25 .00、50 .00、100 00μmol/L氯化镉处理 6h,收获细胞以TUNEL法检测细胞凋亡及原位杂交法检测procaspase- 9mRNA表达。结果 整体实验表明氯化镉作用后 3个剂量组血中促肾上腺皮质激素、黄体生成素和 1 0mg/kg氯化镉剂量组卵泡刺激素水平均降低,腺垂体细胞呈现明显的凋亡征象;整体和离体实验结果均显示氯化镉以剂量依赖方式诱导腺垂体细胞procaspase- 9mRNA表达的增强,且可使凋亡细胞增多,与对照组比较,差异均具有统计学意义。结论 在一定剂量条件下,氯化镉影响腺垂体激素分泌水平改变,并诱发腺垂体细胞凋亡,caspase -9通路在凋亡发生过程中可能发挥了一定的作?
- 朱伟杨杏芬魏青林忠宁郑树声赵敏
- 关键词：氯化镉CASPASE-9MRNA表达
- 醋酸铅诱发肾上腺皮质细胞凋亡及与c-Akt/PKB相关性研究
- 2009年
- 目的了解醋酸铅（PbAc）诱发肾上腺皮质细胞凋亡的发生与c—AkCPKB（protein kinase B，PKB，蛋白激酶B）活性变化的关系。方法体外分离培养豚鼠肾上腺皮质细胞，分别设立空白对照组、12．50、25．00、50．00和100．00moL／LPbAc剂量组，染毒细胞2h，以蛋白因子添加素V和碘化丙啶联合标记，流式细胞仪检测细胞凋亡；分别以0、6．25、12．50、25．00、50．00、100．00、200．00mol／LPbAc与细胞孵育30min，采用免疫沉淀-化学发光法测定C—AKT／PKB活性。结果给予不同剂量的PbAc（12．50～100．00mol/L）染毒2h，其中100．00mol／L剂量组出现细胞凋亡的百分率（36．53±14．30）明显增加，与对照组（7．62±6．33）相比差异有统计学意义（P〈0．01）。肾上腺皮质细胞凋亡的发生率与PbAc剂量之间具有较好的相关关系（r=0．708，P〈0．01）。6．25～200．00moL／L6个剂量PbAe处理30min，结果表明各剂量组c—AkCPKB条带密度呈低剂量轻微受抑制、高剂量逐渐升高的趋势，灰度值分别为7874．67（对照组）、6395．87、7194．07、8457．13、9463．87、9398．47和12110．4，两者之间具有良好的相关关系（r=0．928，P〈0．01）。结论高剂量PbAc作用可一定程度地诱发肾上腺皮质细胞凋亡和肾上腺皮质细胞c～Akt/PKB增加。
- 赵敏杨杏芬魏青卢次勇
- 关键词：醋酸铅凋亡肾上腺皮质
- 镉致腺垂体-肾上腺皮质凋亡机制研究被引量：7
- 2007年
- 目的观察CdCl2作用后腺垂体-肾上腺皮质系统凋亡情况及半胱天冬酶-9的表达变化。方法48只雄性SD大鼠随机分为4组,即对照组、CdCl2低剂量组(1.0 mg/kg)、中剂量组(2.0 mg/kg)、高剂量组(4.0 mg/kg)。经口灌胃染毒,每周5 d,连续6周。染毒结束后分离腺垂体和肾上腺皮质进行透射电镜观察、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡、半胱天冬酶原-9mRNA(procaspase-9mRNA)表达、半胱天冬酶-9(caspase-9)表达。结果电镜检查可见凋亡细胞早期形态学变化;中、高剂量组腺垂体和肾上腺TUNEL阳性细胞的平均灰度值和procaspase-9 mRNA阳性细胞相对灰度值均为对照组的1.2倍以上(P<0.05);蛋白印迹(westernboltting)结果显示,随着染毒剂量的增加,垂体-肾上腺系统caspase-9表达逐渐增强(P<0.01)。结论CdCl2可诱发腺垂体-肾上腺皮质细胞凋亡,在此过程中caspase-9及其酶原mRNA表达呈现出与凋亡较为一致的趋势。
- 魏青杨杏芬朱伟林忠宁郑树生赵敏
- 关键词：镉
- P44/42MAPK及P38MAPK介导氯化镉致肾上腺皮质细胞凋亡的作用
- 2005年
- 张波杨杏芬黄俊明魏青杨颖
- 关键词：肾上腺皮质细胞氯化镉P44/42P38MAPK
- 氯化镉致豚鼠肾上腺皮质细胞凋亡作用被引量：2
- 2008年
- 目的探讨P44/42丝裂素活化蛋白激酶(P44/42MAPK)在CdCl2诱发豚鼠肾上腺皮质细胞凋亡中的作用机制。方法原代培养豚鼠肾上腺皮质细胞,以0,12.5,25,50,100和200μmol/L CdCl2处理细胞2 h,及100μmol/L的CdCl2处理0,0.5,1,2,3和4 h,以Annexin V碘化丙啶(PI)联合染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率;0,12.5,25,50,100和200μmol/L CdCl2处理1 h,或者100μmol/L的CdCl2处理0,15,30,60,90和120 min;采用蛋白印迹(Western Blot)法分析P44/42总蛋白量、磷酸化水平以及c-Fos的表达水平。结果CdCl2以时间和剂量依赖的方式诱导细胞凋亡,0,12.5,25,50,100和200μmol/L CdCl2处理细胞2 h后,凋亡率分别为1.99%,14.79%,35.28%,44.62%,55.91%及73.48 7%;100μmol/L CdCl2染毒0,0.5,1,2,3和4 h,细胞凋亡率分别为1.04%,14.70%,33.99%,49.36%,61.57%及71.55%。CdCl2诱发P44、P42磷酸化水平升高及c-fos的高表达,以25,50,100和200μmol/L CdCl2染毒1 h,P44磷酸化水平分别升高了1.0,1.2,2.1和3.2倍;100和200μmol/L CdCl2染毒1 h,P42磷酸化水平升高了0.8和1.3倍;12.5,25,50,100和200μmol/L CdCl2处理细胞1 h,c-Fos的表达水平升高了0.6,1.2,1.4,2.3和1.8倍。100μmol/L CdCl2作用细胞15,30,60,90和120 min后,P44磷酸化水平分别升高了0.5,3.1,4.9,5.9和5.3倍;P42的磷酸化水平分别升高了0.1,0.5,0.9,1.1和1.1倍,同时c-Fos蛋白水平分别升高了1.6,2.3,2.3,3.1和2.8倍。结论一定剂量CdCl2作用肾上腺皮质细胞后,P44/42呈现过度磷酸化,并可能通过诱发c-Fos高表达,导致细胞凋亡。
- 张波杨杏芬魏青赵敏林忠宁杨颖黄俊明
- 关键词：氯化镉肾上腺皮质细胞凋亡C-FOS
- MAPK信号转导通路及镉的干扰作用被引量：5
- 2004年
- 丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)信号转导途径是非常保守的、传递细胞外多种类型刺激至细胞核内的信号通路 ,与细胞的增殖、分化、炎症反应及凋亡有关。不同MAPK亚型激活后效应的差异与细胞类型、刺激的种类与方式、不同通路间的协同效应等有关。MAPK通路的异常激活与失活是许多外界刺激下细胞反应的机制之一。研究表明 :镉能引起不同细胞的增殖或凋亡 ,并且发现不同MAPK亚型在染镉细胞中的活性发生了改变 ,提示了镉细胞毒性机制研究的又一线索。
- 张波杨杏芬
- 关键词：丝裂素活化蛋白激酶镉增殖凋亡
- 镉致腺垂体细胞增殖效应的初步研究被引量：1
- 2006年
- 朱伟杨杏芬魏青赵敏郑树声林忠宁
- 关键词：镉腺垂体细胞增殖MAPKS
