广东省科技计划工业攻关项目(2005B20501001) 作品数:6 被引量:20 H指数:2 相关作者: 艾云灿 孟繁梅 潘子强 尹德胜 汪凯 更多>> 相关机构: 中山大学 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 教育部高等学校骨干教师资助计划 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
海洋病原细菌的氯霉素耐药菌株筛选鉴定及质粒消除 被引量:2 2006年 目的从污染海域筛选非临床氯霉素耐药株,研究耐药基因定位及耐药机制多样性。方法TCBS和EMB选择平板筛选,结合16SrDNA序列分析鉴定耐药株。MIC测定、基因组DNA-RAPD分型和质粒消除评估多样性。结果评估187株氯霉素耐药株的MIC值分布、属种分布、耐药基因定位及耐药机制。发现80株耐药MIC25~128μg/ml是CLSI/NCCLS(1995年)定义临床标准(MIC12.5μg/ml)的2~10倍,分布在弧菌科和肠杆菌科主要属种;58株MIC>25μg/ml基因组DNA-RAPD分型与菌落表型分组结果吻合,显示多样性丰富。采用多轮高温(~43℃)和高浓度(~1%)SDS双重处理和交替培养,77株MIC>25μg/ml分离株的质粒消除效率为28.6%;55株不能消除耐药表型,暗示染色体编码耐药基因;22株可消除氯霉素耐药表型,其中16株完全消除,暗示质粒独立编码耐药基因,6株部分消除,暗示质粒和染色体分别编码耐药基因。结论来自污染海域环境的非临床氯霉素耐药株可作为新模型,提供耐药基因定位及耐药机制多样性的新视野。 孟繁梅 汪凯 潘子强 尹德胜 艾云灿关键词:海洋环境 病原细菌 氯霉素 基因定位 海洋病原细菌PSEUDOMONAS SP·ER22对氯霉素中间体的手性转化 2006年 海洋病原细菌PSEUDOM ONAS SP.ER22(CMR,M IC=64ΜG/ML)接种在含有25ΜG/ML标准品氯霉素中间体(D-(-)-苏-2-氨基-1-对硝基苯基-1,3-丙二醇)LB培养基中培养24 H后,可检测到由(1R,2R)形式转化生成(1S,2S)对映体。LC-MS/MS分析显示互为对映体的特征指纹峰相同(M/Z213),保留时间分别为3.74 M IN和4.98 M IN。 孟繁梅 艾云灿关键词:海洋细菌 手性 生物转化 南海珠江口TCBS和EMB类群细菌动态监测(1999-2002) 被引量:2 2007年 报道1999-2002年对南海珠江口(21°50’~22°50’N,113°20’~114°50’E)26个站点的动态监测结果:(1)TCBS类群包括37%Ⅰ类(假单胞菌属、气单胞菌属),5%Ⅱ类(副溶血弧菌)和58%Ⅲ类(霍乱弧菌、霍乱弧菌埃尔托型,溶藻弧菌);EMB类群包括14%Ⅳ类(变形菌属、沙门氏菌属或志贺氏菌属),50%Ⅴ类(肠杆菌属、克雷伯氏菌属、哈夫尼氏菌属、沙雷氏菌属)和36%Ⅵ类(大肠杆菌);(2)26个站点之间的年平均CFU值差异显著.各站点的TCBS类群数量多而EMB类群数量少,表明TCBS类群为土著优势,而EMB类群主要来自陆源性污染;(3)26个站点被聚类为四大类别,不完全吻合其实际地理位置邻近关系,提示人为干扰活动影响超越自然地理隔离效应.站点G(万山群岛)和H(担杆岛)同属最靠近外海的孤立站点,却被划分为不同类别.H站点TCBS类群数量最高(3.7±2.6×10^4CFU/cm^3),G站点是天然养殖区,EMB类群数量最高(9.5±6.6×10^3CFu/cm^3),表明养殖区域陆源性EMB类群污染突出;(4)TCBS与EMB类群的月平均CFU值变化趋势相似,呈现年度周期性和季节周期性波动;(5)珠江口可以分为南、北部区域.南部区域的陆源性EMB类群污染严重,综合反映了来自珠江口水网系的高通量排放污染,养殖区域的自身污染,及其养殖活动对陆源性污染菌群的规模化“原位扩增”效应. 孟繁梅 尹德胜 潘子强 曾延辉 朱义福 艾云灿关键词:病原菌群 珠江口 关于发展我国海洋微生物学及微生物技术的若干思考与实践 被引量:2 2006年 综合介绍近10年来中国海洋微生物学及微生物技术发展策略的思考与实践。内容涉及:(1)学科内涵与外延;(2)近海与远海研究定位策略;(3)全局性几个关键科学问题;(4)近岸关键区域示范的选择与实践;(5)海洋生物技术产业化与生物安全及生态安全策略研究。 艾云灿关键词:海洋微生物学 生物安全 生态安全 海洋病原细菌Enterobacter sp.EM28-2共存氯霉素乙酰化和磷酸化灭活机制 2006年 报道1例氯霉素耐药性病原菌中共存乙酰化和磷酸化灭活机制。海洋病原菌Enterobactersp.EM28-2(Cmr,M IC=128μg/mL)接种在含25μg/mL标准品D-(-)-氯霉素LB培养基中培养24h后,可同时生成乙酰化和磷酸化氯霉素。LC-MS分析检测出新生成3类指纹峰:①[M+C2H2O-H]-(m/z 363.0,364.9),对应氯霉素C1位羟基的乙酰化产物;②[M+PO3-H]-(m/z 398.9,400.9,402.9),对应氯霉素C3位羟基的磷酸化产物;③[M+C4H4O2-H]-(m/z 408.7,410.7),对应氯霉素C1位和C3位羟基的乙酰化产物。 孟繁梅 汪凯 艾云灿关键词:氯霉素 耐药性 乙酰化 磷酸化 噬菌体展示技术系统发展进展 被引量:14 2011年 噬菌体展示技术(Phage display technology,PDT)是一种特殊的基因工程重组表达技术,噬菌体展示技术系统(Phage display system,PDS)是指包括经过遗传改造后的系列噬菌体、辅助噬菌体、宿主细菌等集成平台(含试剂盒)。文章从噬菌体分子遗传学及其基因(基因组)遗传工程改良角度,基于噬菌体M13、λ、T4和T7等4大类典型噬菌体展示技术系统的发展进展进行了综述。重点强调不同展示系统中的核心部件及其基因工程改造的分子遗传学原理、不同展示锚定位点的技术特征、相关试剂盒的研制状况及选择依据。 孟繁梅 张朝辉 艾云灿关键词:噬菌体 噬菌体展示 蛋白质表达 基因工程 基因组工程