博士科研启动基金(2007062)
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
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- 相关机构：哈尔滨医科大学黑龙江中医药大学更多>>
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- 靶向CD40的小RNA干扰抑制大鼠异体肢体移植急性排斥反应及细胞凋亡表达的研究
- 2009年
- 目的探讨靶向CD40的小RNA干扰对大鼠异体肢体移植急性排斥反应及细胞凋亡的影响。方法以纯系SD大鼠为供体,纯系Wistar大鼠为受体,行同种异体右后肢移植。27只大鼠肢体移植后随机分为3组:A组:注射梭华-Sofast(15μL)-siCD40-2/pSilencer(100μg)载体复合物600μL;B组:在肢体移植后,即注射Sofast(15μL)-pSilencer 4.1-CMV neo(100μg)空载体复合物600μL;C组:在肢体移植后注射生理盐水600μL。观察移植物排斥反应征象及存活情况,并于第7天对产生免疫耐受大鼠进行混合淋巴细胞反应(MLR),同时进行组织学检查。结果与其它实验组相比,A组移植物发生排斥反应的时间及存活时间均显著延长(P<0.01)(>13d),未见排斥反应征象,其它组均于术后近期发生排斥反应;A组大鼠对供体的淋巴细胞呈现低反应性,移植的供体同系大鼠的肢体得以存活。A组移植物细胞凋亡率低于其他组。A组表达CD40的B细胞低于B、C组。结论在术后不应用免疫抑制剂的情况下,靶向CD40的shRNA干扰可以抗大鼠异体肢体移植急性排斥反应。
- 张震宇刘伟毕郑钢董清平
- 关键词：RNA干扰移植物存活急性排斥反应
- 靶向CD40小RNA干扰抑制大鼠异体肢体移植急性排斥反应后细胞凋亡及P53，P21，Bcl-2，Bax的表达
- 2008年
- 背景：对于CD40通路的研究以往多集中在器官移植，涉及异体肢体方面的报道较少。目的：探讨靶向CD40的小分子RNA干扰对大鼠异体肢体移植急性排斥反应、细胞凋亡的影响，检测CD40通路阻滞后相关基因的表达变化。设计、时间及地点：细胞基因工程体内实验，于2007—09／2008—02在哈尔滨医科大学附属第一医院中心实验室完成。材料：清洁级10～12周龄雄性Wistar受鼠、SD供鼠各27只，行同种异体右后肢移植。真核表达质粒pSilencer4．1-CMV neo为Ambion公司产品。pSilencer4．1-CD40shRNA重组质粒由哈尔滨医科大学附属第一医院中心实验室保存。梭华-Sofastr^TM in vivo体内转染试剂为厦门太阳马生物工程有限公司产品。方法：27只Wistar受鼠异体肢体移植完成后随机分为3组，9只／组。干扰组经阴茎背静脉注入梭华-Sofast（15 μL）-siCD40—2／pSilencer（100μg）载体复合物600μL，空载体组等量注入梭华-Sofast（15μL）-pSilencer4．1-CMV neo（100μg）空载体复合物，对照组等量注入生理盐水，连续注射6d，1次／d。主要观察指标：观察移植物排斥反应征象及移植肢体存活时间，检测细胞凋亡情况，免疫组织化学染色检测p53，p21，Bcl-2，Bax的表达。结果：干扰组未见排斥反应征象，且移植物发牛排斥反应的时间及存活时间均显著长于空载体组、对照组（t=3．137～3．519，P〈0．01）；空载体组、对照组于移植后近期发生排斥反应。干扰组移植后第1，3，5，7天细胞凋亡指数均明显低于空载体组、对照组（t=3．636-4．786，P〈0．01）。干扰组移植后各时间点P53，P21，Bax的表达均明显低于空载体组、对照组（t=3．586-4．531，P〈0．01）；Bcl-2的表达均明显高于空载体组、对照组（t=3．664—4．644，P〈0．01）。结论：在不应用免疫抑制剂的情况下，靶向CD40的小分子RNA干扰可以减轻大鼠异�
- 张震宇刘伟毕郑钢董清平
- 关键词：移植物存活急性排斥反应
- 靶向CD40的shRNA干扰抗大鼠异体肢体移植急性排斥反应的实验研究
- 2008年
- 目的探讨靶向CIM0的RNA干扰对大鼠异体肢体移植急性排斥反应的影响。方法以纯系SD大鼠为供体，纯系Wistar大鼠为受体，行同种异体右后肢移植。27只大鼠肢体移植后随机分为三组，A组：注射入梭华-Sofast—siCD40—2／pSilencer载体复合物600μL；B组：注射Sofast-pSilencer4．1-CMV neo空载体复合物600μL；C组：注射生理盐水600μL，以上均通过阴茎背静脉注射。观察移植物排斥反应征象及存活情况，并于第7天对产生免疫耐受大鼠进行混合淋巴细胞反应，同时进行组织学检查。结果与B、C组相比，A组移植物发生排斥反应的时间及存活时间均显著延长，差异有统计学意义（P〈0．01）（〉13d），未见排斥反应征象；B、C组均于术后近期发生排斥反应。A组大鼠对供体的淋巴细胞呈现低反应性，移植的供体同系大鼠的肢体得以存活。结论术后不应用免疫抑制剂的情况下，靶向CD40的shRNA干扰可以抗大鼠异体肢体移植急性排斥反应。
- 张震宇刘伟毕郑钢董清平
- 关键词：移植物存活移植物排斥
