国家自然科学基金(30860332)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 相关机构：宁夏医科大学附属医院宁夏医科大学第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“春晖计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HO-1 siRNA表达载体的构建及其稳定转染SGC7901细胞系的建立被引量：1
- 2012年
- 目的:构建携带绿色荧光蛋白的HO-1基因siRNA表达载体,通过将载体转染入胃癌细胞株SGC7901筛选稳定转染细胞株。方法:参照前期工作,构建可用于筛选阳性克隆并带有绿色荧光的HO-1基因siRNA表达载体,采用脂质体转染法将载体转入SGC7901细胞中,并用G418进行阳性克隆筛选,获得稳定转染细胞系。结果:经酶切和测序验证,证实表达载体构建成功,将HO-1 siRNA表达载体转入SGC7901后,通过G418筛选获得稳定转染细胞系,经检测HO-1的表达水平明显低于为未转染的细胞。结论:本实验成功地构建了HO-1基因siRNA表达载体,筛选出HO-1基因沉默的稳定转染胃癌细胞系,为今后研究HO-1基因的作用机制提供了实验基础。
- 张涛白芳云白飞虎
- 关键词：胃癌HO-1基因SIRNA
- 血红素氧合酶-1在胃癌腹膜转移中的表达及意义被引量：3
- 2009年
- 目的探讨血红素氧合酶－1（hemeoxygenase1，HO－1）在胃腺癌及腹膜转移灶、细胞系及耐药细胞系中的表达及意义。方法用免疫组化法检测68例胃腺癌组织及其腹膜转移灶、转移灶旁无瘤腹膜组织中HO1的表达，以及46例无腹膜转移的胃腺癌组织中HO－1的表达。Western印迹法检测胃腺癌腹膜转移组织及耐药细胞系HO－1的表达。结果胃腺癌及其腹膜转移灶HO－1的阳性表达率分别为39．7％（27／68）和41．2％（28／68），显著高于癌旁无瘤腹膜组织[0％（0／68），P〈0．01]，亦显著高于无腹膜转移胃癌组织[21．7％（10／46），P〈0．05]。低分化转移灶HO—1表达水平显著高于中、高分化转移灶（P〈0．05）。Western印迹法检测胃癌腹膜转移患者的转移灶H01表达水平显著高于其癌旁无瘤腹膜组织（P〈0．05）。H01在耐药细胞系GC9811P的表达水平较其亲本细胞系明显上调（P〈0．06）。结论HO－1在胃腺癌腹膜转移过程中表达增高，HO－1可能参与胃癌腹膜转移发生。高表达HO－1与胃癌腹膜转移组织的恶性程度有关，其信号转导通路可能存在于组织的上皮细胞，并可能与多药耐药有关。
- 惠亮亮白飞虎杨力吴开春
- 关键词：胃肿瘤肿瘤转移血红素氧合酶-1多药耐药
- 血红素加氧酶-1小干扰RNA对人胃癌9811-P细胞体外侵袭的影响被引量：4
- 2011年
- 目的构建血红素加氧酶-1(HO-1)小干扰RNA(siRNA)表达载体,观察HO-1siRNA对人胃癌9811-P(GC9811-P)细胞体外侵袭转移能力的影响。方法设计HO-1siRNA序列,构建其真核表达载体,在Lipofectamine2000介导下转染GC9811-P细胞,通过Western-blotting及RT-PCR检测HO-1在蛋白及mRNA水平的表达变化。通过细胞划痕实验、Transwell小室实验观察GC9811-P细胞体外侵袭转移能力。结果成功构建了HO-1siRNA表达载体,并命名为pEGFP-C1/HO-1-siRNA。获得成功转染HO-1-siRNA的GC9811-P细胞,mRNA及蛋白水平均显示HO-1在GC9811-P细胞中明显下降。细胞划痕实验结果显示转染了HO-1-siRNA组的GC9811-P细胞迁移不明显,而转染了阴性对照组细胞和未转染的空白对照组细胞大量迁移至划痕区。Transwell小室实验结果显示转染了HO-1-siRNA组的GC9811-P细胞穿膜数为(54.2±2.68),而转染了阴性对照组的细胞穿膜数为(83.2±5.71),未转染的空白对照组细胞穿膜数为(84.3±4.29),LSD-t检验分析各组间细胞穿膜数的差异,HO-1-siRNA组细胞穿膜数小于阴性对照组及空白对照组细胞穿膜数(P<0.05)。结论 HO-1在GC9811-P细胞体外侵袭转移中发挥着重要作用,HO-1-siRNA可抑制GC9811-P细胞体外侵袭转移能力。
- 祁妮娜白飞虎
- 关键词：胃癌细胞
