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中国博士后科学基金(20060400716)
作品数:
2
被引量:7
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相关作者:
张学军
杨雁
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何淑芳
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黄芪有效部位群对大鼠肌成纤维细胞增殖移行及胞内Smads蛋白磷酸化的影响
被引量:4
2008年
目的研究黄芪有效部位群(effective fractions of astragalus,EFA)对转化生长因子-β1(transforming growth factorbeta1,TGF-β1)诱导的大鼠肌成纤维细胞(myofibroblast,MFB)增殖、移行及胞内Smads蛋白磷酸化的影响。方法采用MTT法观察EFA不同浓度对新生小牛血清(NBS)或TGF-β1诱导的MFB细胞增殖的影响;浸润小室法观察EFA对TGF-β1诱导的MFB细胞移行的影响;免疫吸附和Westem blot法研究EFA对TGF-β1诱导的MFB细胞内Smads蛋白磷酸化的影响。结果EFA(10-160mg·L^-1)呈浓度依赖性抑制NBS及TGF-βl诱导的MFB细胞增殖;EFA(80mg·L^-1)能明显抑制TGF-β1诱导的MFB细胞移行;EFA(10-80mg·L^-1)呈浓度依赖性抑制TGF-β1诱导的MFB细胞内Smad2C、Smad2L蛋白磷酸化,但各组间Smad2/3蛋白表达水平无差别。结论EFA通过干扰TGF-β/Smad信号转导通路而抑制MFB细胞的增殖、移行从而起到抗肝纤维化的作用。
何淑芳
梁佳玉
方佳
杨林
杨雁
张学军
关键词:
肌成纤维细胞
SMAD
应用SYBR荧光实时定量RT-PCR法检测TGF-β1诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞中PAI-1mRNA表达
被引量:3
2009年
目的应用SYBR荧光实时定量RT—PCR法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor betal,TGF-β1)诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblasts,KFS)中纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor1,PAI-1)mRNA的表达。方法体外分离培养KFs,应用不同浓度(1.25~20pmol·L-1)TGF-β1刺激KFs3h或TGF-β1(10pmol·L-1)刺激KFs不同时间(0.5~6h),采用SYBRGreenI荧光实时定量RT—PCR法检测,以B—actin基因作为内参,计算各组PAI-1mRNA的相对表达量。结果与空白对照组相比,TGF-β1能明显诱导KFs中PAI-1mRNA的表达,10、20pmol·L-1浓度组表达比值分别增至4.19及4.44倍(P〈0.01);TGF-β1(10pmol·L。)的1、2h时问组表达比值分别增至2.29及2.41倍(P〈0.05),3、6h时间组分别增至4.19及5.83倍(P〈0.01)。提示,TGF-β1诱导KFs中PAI=1mRNA表达的最适浓度为10pmol·L-1、最适时间为3h。结论利用SYBR荧光实时定量RT—PCR法检测TGF-β1诱导KFs中PAI-1mRNA的表达,为进一步研究瘢痕疙瘩中TGF-β1信号通路的靶基因调控机制,以及开发治疗瘢痕疙瘩的新药提供了基础。
何淑芳
杨林
黄维娟
杨雁
周伏圣
方巧云
张安平
杨森
张学军
关键词:
瘢痕疙瘩
纤溶酶原激活物抑制剂-1
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