国家自然科学基金(30730082)
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
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- 同种异型抗CD_3单抗对细胞因子诱导的杀伤细胞体外扩增的影响
- 2011年
- 目的探讨同种异型抗CD3单克隆抗体(UCHT1、OKT3)对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)增殖、表型及细胞毒功能的影响。方法分离7位健康志愿者外周血单核细胞,IFN-γ培养24 h后分别加入UCHT1(VCHT1组)、OKT3(OKT3组)及IL-1a、IL-2体外培养,于培养第3、7、10、12、14和21天比较扩增倍数;并选取培养第14天的细胞采用流式细胞仪分析CD3、CD8和CD56分子的表达,比较CIK细胞对K562细胞系的细胞毒作用。结果培养第10、12、14、21天OKT3组扩增倍数显著高于UCHT1组(P均<0.05);平均CD3+CD8+阳性细胞频数在培养第14天明显高于UCHT1组(P<0.05),平均CD5+6细胞频数UCHT1组高于OKT3组(P<0.05);平均CD 3+CD 5+6细胞频数UCHT1组也高于OKT3组,但无统计学差异。对K562细胞的细胞毒作用,UCHT1组有高于OKT3组的趋势(当效靶比为20∶1时,P=0.078)。结论在保证细胞扩增倍数的情况下,选择UCHT1更适用于体外扩增CIK细胞。
- 张克姜维周建陶然李溢柔李进马世武侯金林
- 血清BAFF、APRIL水平与原发性胆汁性肝硬化的关系被引量：2
- 2010年
- 目的探讨血清中B细胞刺激因子(BAFF)和增殖诱导配体(APRIL)水平与原发性胆汁性肝硬化(PBC)的关系。方法选择PBC、慢性乙型肝炎(CHB)患者和健康献血者(HC)各12例,采用ELISA法检测血清中BAFF和APRIL的表达水平。结果 PBC组血清BAFF水平明显高于CHB组(P=0.008)和HC组(P=0.012),但ARPIL水平在三组间差异无统计学意义。血清BAFF水平与谷草转氨酶呈正相关(r=0.391,P=0.020),与血清白蛋白呈负相关(r=-0.434,P=0.017);血清APRIL水平与患者年龄呈正相关(r=0.551,P=0.002),与血清白蛋白呈负相关(r=-0.424,P=0.039)。结论 PBC患者血清BAFF水平明显升高,并与肝脏损害程度相关。
- 朱晓琳马世武胡小雄贺玉凯侯金林朱幼芙
- 关键词：肝硬化B细胞刺激因子增殖诱导配体
- K83A变异MxA蛋白抑制HBV复制体外研究
- 2008年
- 目的研究K83A变异MxA蛋白抑制HBV复制活性。方法将pcDNA3.1-MxA(wild-type)重组质粒(WT组)、pcDNA3.1-MxA-K83A重组质粒(K83A组)和pcDNA3.1空质粒(对照组)分别与pU19-1.24HBV重组质粒按2∶1比例瞬时共转染HepG2细胞,转染3d后western blot检测MxA蛋白表达,Abbott检测各组细胞上清HBsAg和HBeAg表达,定量PCR检测上清和细胞内HBV DNA水平,统计学分析结果。结果MxA、K83A组有较好的MxA蛋白表达;与对照组相比,K83A组和MxA组上清HBeAg分别下降73%和71%(P<0.05),上清HBV DNA水平分别下降2.22lg和2.11lg(P<0.01),细胞内HBV DNA水平下降1.89lg和1.78lg(P<0.01)。结论K83A变异不影响MxA蛋白抑制HBV复制活性。
- 余治健彭劼李晖王战会周元平林占洲侯金林
- 关键词：乙肝病毒转染
- 慢性乙型肝炎患者外周血CD8＋T淋巴细胞亚群T淋巴细胞受体β链互补决定区3谱型研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血CD8＋T淋巴细胞亚群T淋巴细胞受体（TCR）p链V区（BV）中互补决定区3（CDR3）谱型特点。方法采集8例CHB患者（ALT〉2倍正常值上限）的抗凝血，分离外周血单个核细胞，磁珠分选CD8＋T淋巴细胞亚群，提取RNA并应用逆转录聚合酶链反应扩增TCRBV中CDR3基因的24个家族，采用免疫指纹技术进行TCRBV各家族基因扫描和谱型分析。不同细胞亚群间数据比较采用配对t检验。结果8例患者外周血淋巴细胞TCRBV家族CDR3谱型发生明显偏移，表现为单克隆性、寡克隆性及偏峰性克隆增生。8例患者CD8＋T淋巴细胞亚群发生TCRBVCDR3谱型偏移家族总个数高于去除CD8。T淋巴细胞群的外周血单个核细胞[（10．6±4．7）个比（4．1±3．1）个，t=6．619，P〈0．01）]；比较单、寡克隆增生2种形式偏移的家族，CD8＋T淋巴细胞亚群也高于代表CD4＋T淋巴细胞的去除CD8＋T淋巴细胞群的外周血单个核细胞[（8．8±4．5）个比（3．9±2．8）个，t=5．706，P〈0．01]。对其中3例患者磁珠分选前后TCRBV谱型的比较发现，分选后CD8＋T淋巴细胞亚群发生TCRBV谱型偏移家族数均高于分选前。结论通过淋巴细胞亚群分选方式分析TCRBV家族CDR3谱型变化可以减少不同淋巴细胞亚群之间的峰型重叠干扰；应用这一方法分析外周血CD8＋T淋巴细胞亚群克降增牛程度有助于了解CHB患者炎疖的发牛机制．
- 李咏茵马世武张光文黄璇胡小雄杨玲张克侯金林
- 关键词：T淋巴细胞互补决定区3
- 两种培养基对细胞因子诱导杀伤细胞体外扩增的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:比较AIM V、OpTmizer两种培养基对培养细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killercells,CIK细胞)的增殖、表型及细胞毒功能的影响。方法:分离7位志愿者外周血单核细胞(peripheral bloodmononuclear cells,PBMC),分别应用AIM V、OpTmizer两种培养基体外常规诱导CIK细胞,于培养第3、7、10、12、14、17、21天时,计算CIK细胞扩增倍数;通过流式细胞仪分析CD3、CD8、CD56分子的表达;通过LDH释放实验比较两种培养的CIK细胞对K562的细胞毒作用。结果:培养的10、12、14、17、21 d,OpTmizer扩增倍数明显高于AIM V(P<0.05);平均CD56^+及CD3^+CD56^+细胞频数,两组均高于基线(P<0.05);平均CD3-CD56^+细胞频数,OpTmizer组高于基线(ρ<0.05);对K562细胞的细胞毒作用,两组比较差异没有显著性。结论:OpTmizer扩增CIK细胞效率明显高于AIMV,而扩增的细胞亚群及对K562细胞的杀伤作用两组基本相同,OpTmizer比AIM V更适合于体外诱导培养CIK细胞。
- 张克姜维周建陶然李溢柔李进马世武侯金林
- 关键词：杀伤细胞体外培养
