四川省青年科技基金(06ZQ026-040)
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 相关作者：秦廷武杨志明王治陈曦张玉龙更多>>
- 相关机构：四川大学华西医院四川省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省青年科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 玻璃化冻存组织工程肌腱体内植入实验研究被引量：3
- 2009年
- 目的探讨玻璃化冻存组织工程肌腱植入大鼠体内修复跟腱缺损后不同时期,大鼠的免疫排斥反应及对肝、肾、心血管功能的影响。方法抽取1周龄SD大鼠尾腱,采用组织块法培养肌腱细胞。取第2～4代肌腱细胞,以5×106个/mL细胞密度接种至长1.5cm生物衍生肌腱材料,复合培养构建组织工程肌腱。采用21%DMSO作为玻璃化冻存保护液,Eurocollins solution作为4℃条件下预冷液和洗脱液的基础液体,按自制的玻璃化冻存方法冻存。健康SD大鼠72只,雌雄不限,体重210～230g。随机分成A(n=32)、B(n=32)、C(n=8)3组。A、B组实验动物于跟腱中段制备长约0.5cm肌腱缺损模型,分别将玻璃化冻存后及未冻存的组织工程肌腱移植修复缺损肌腱;C组大鼠未手术,为正常对照。术后2、4、6、8周,行大体观察、肝、肾及心血管功能检测;术后2、4、6周行血清免疫学检测。结果A、B组植入部位均未见组织坏死、积液及化脓感染;术后2周,A、B组均出现粘连现象,4～6周逐渐好转,8周未见明显粘连,新生组织连续性完整,肌腱桥接部已愈合,与正常肌腱类似。术后2、4、6周,血清中IgG和IgM含量A、B、C组组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。肝功能检测:A组术后4周,B组术后4、6周,谷草转氨酶均低于C组,差异有统计学意义(P<0.05);其余各时间点A、B组谷草转氨酶与C组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。各时间点A、B组谷丙转氨酶、ALP、直接胆红素和总胆红素与C组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。肾功能检测:术后2周,A组血清白蛋白和B组肌酐明显下降,与C组比较差异均有统计学意义(P<0.05);术后4、6、8周,A、B组各指标浓度与C组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。心血管功能检测:A组各时间点血糖、甘油三酯、胆固醇与C组比较差异均无统计学意义(P>0.05);B组术后8周甘油三酯与C组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃化冻存�
- 廖梅旭刘程俊朱明华秦廷武
- 关键词：组织工程肌腱玻璃化冻存体内植入免疫排斥反应
- 表面改性及微沟槽技术对肌腱细胞生长与取向的影响被引量：6
- 2008年
- 利用光刻技术制作微格式模板,微接触转印法制作微沟槽PDMS表面,微流道技术裱衬不同浓度的Ⅰ型胶原于微沟槽表面上,比较其对细胞生长形态及生长取向的影响。对照组为未裱衬胶原的微沟槽、平板PDMS及裱衬胶原的平板PDMS。种植SD大鼠肌腱细胞在材料上,于37℃孵箱中培养48 h。采用MTT比色法测定不同浓度的胶原对肌腱细胞的生长增殖的影响。通过倒置相差显微镜、扫描电镜、荧光显微镜观察细胞生长的形态,取向情况。结果显示:Ⅰ型胶原修饰的PDMS微沟槽材料比未裱衬胶原的对照组具有明显的促细胞生长的作用(P<0.05),并且随着胶原浓度的增加作用越明显。有微沟槽表面的材料对细胞的生长形态和生长取向有明显影响。提示,Ⅰ型胶原修饰的微沟槽材料不仅能规范肌腱细胞的生长取向,而且能促进肌腱细胞的生长,从而得到理想的细胞生长形态,该结果对工程化肌腱的构建有重要的指导意义。
- 陈曦秦廷武王治杨志明
- 关键词：表面改性肌腱细胞
- 一种改进型动态应变三维细胞培养装置的研制被引量：4
- 2008年
- 介绍了一种用于组织工程研究的改进型动态应变细胞培养装置,针对原有的旧设备,分别从控制单元的硬件和软件设计、机械单元结构及细胞培养单元的结构三方面进行改进和升级,新装置使用范围广、可控精度高、操作简单。
- 张玉龙秦廷武杨志明
- 关键词：细胞培养生物反应器机械刺激
- 大鼠骨骼肌脱细胞处理方法的优化研究被引量：2
- 2009年
- 目的探讨SD大鼠骨骼肌脱细胞的优化处理方法。方法SD大鼠16只,雌雄不限,体重180～200g。取其中10只大鼠36条骨骼肌肌束,随机分为3组,正常组(A组,n=4):不作脱细胞处理;时间组(T组)及浓度组(C组)按照低渗-去垢剂方法进行脱细胞处理(n=16),其中T组十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)浓度均为1.0%,根据处理时间不同(24、48、72、96h),分为T1、T2、T3、T4组(n=4);C组处理时间均为48h,根据SDS浓度不同(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%)分为C1、C2、C3、C4组(n=4)。取各组材料行HE染色观察及羟脯氨酸含量检测,并根据结果筛选最优脱细胞处理条件。另取6只SD大鼠14条完整肌束,随机取7条按照最优条件进行脱细胞处理(实验组),余7条作为正常对照(对照组),对肌束行大体观察、Masson染色及生物力学检测。结果HE染色显示T1、T2、C1、C2、C3组肌纤维与A组无差异;C4组肌纤维部分脱除;T3组肌纤维完全脱除且基膜结构保留完整;T4组肌纤维完全脱除但基膜结构部分被破坏。羟脯氨酸含量检测:A组与C1、C2、C3、T1及T2组比较,差异无统计学意义(P>0.05);A组与C4、T3和T4组比较,差异有统计学意义(P<0.05);C4组与T3、T4组比较,差异有统计学意义(P<0.05);T3组和T4组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。根据HE染色及羟脯氨酸含量检测实验结果筛选出最优脱细胞处理条件为4℃、1.0%SDS、72h。大体观察:实验组与对照组比较肌束颜色变浅,呈半透明状,且结构相对较松散。Masson染色观察:实验组胶原纤维连续性良好,较对照组结构疏松。生物力学测试:实验组及对照组最大破坏载荷分别为(1.38±0.35)N及(1.98±0.77)N,最大拉伸位移分别为(3.19±3.23)mm及(3.56±2.17)mm,两组以上指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论应用1.0%SDS,于4℃条件下对大鼠骨骼肌经震荡处理72h可得到完全去除肌纤维且ECM保留完好的脱细胞基质。
- 卿泉秦廷武
- 关键词：骨骼肌脱细胞羟脯氨酸生物力学
