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国家自然科学基金(30470749): 作品数：22 被引量：160H指数：10; 相关作者：邵宗鸿付蓉邢莉民李丽娟王一浩更多>>; 相关机构：天津医科大学总医院中国医学科学院北京协和医学院北京大学肿瘤医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金天津市科技支撑计划重点项目更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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重型再生障碍性贫血患者树突细胞刺激异体淋巴细胞增殖的功能被引量：1: 2009年; 目的了解重型再生障碍性贫血（SAA）患者树突细胞（DC）刺激异体淋巴细胞增殖的功能，探讨SAA的免疫病理机制。方法以25例SAA患者和12例正常对照者为研究对象，以重组人白介素4（rhIL-4）、重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM—CSF）和重组人肿瘤坏死因子（rhTNF）体外诱导骨髓单核细胞分化为成熟髓细胞样DC（mDC），与正常淋巴细胞按1：100、1：50作混合淋巴细胞培养（MLR），噻唑兰（MTT）比色法计算淋巴细胞增殖率。ELISA法检测MLR培养上清IL-12、干扰素γ（IFNγ）浓度。分析MLR上清液IL4、IFN-γ水平与淋巴细胞增殖率相关性。结果SAA初治组、恢复组和对照组mDC与淋巴细胞1：100混合培养时，淋巴细胞增殖率分别为（219．8±94．0）％、（159．1±66．0）％、（160．1±91．9）％，培养上清IL-12水平分别为（8．2±3．6）ng／L、（6．5±2．8）ng/L、（6．1±2．6）ng／L，IFNγ／水平分别为（21.8±8．7）ng／L、（25．5±9．1）ng／L和（22．6±7．8）ng／L，3组差异均无统计学意义（P值均〉0．05）。初治组、恢复组和对照组mDC与淋巴细胞1：50混合培养时，淋巴细胞增殖率分别为（322．1±171．1）％、（180．9±79．1）％、（192．3±91．9）％，培养上清TL—12水平分别为（12．6±4．4）ng／L、（9．44-3．3）ng／L、（8．5±3．7）ng／L，IFNγ水平分别为（32．3±9．2）ng／L、（27．4±6．5）ng／L、（24．4±7．4）ng／L，3项指标初治组均高于对照组（P〈0．05），恢复组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。MLR上清液IL-12水平与淋巴细胞增殖率呈正相关（r=0．529，P〈0．01）；MLR上清液IFNγ水平与淋巴细胞增殖率呈正相关（r=0．381，P〈0．05）。结论SAA患者mDC刺激淋巴细胞增殖功能增强，在SAA发病中起重要作用。; 王珺邵宗鸿付蓉吴玉红邢莉民王化泉; 关键词：白细胞介素12

骨髓单个核细胞Coombs试验阳性血细胞减少患者骨髓巨噬细胞活化抗原表达及其临床意义被引量：8: 2010年; 目的探讨骨髓单个核细胞Coombs（BMMNC—Coombs）试验阳性血细胞减少（又称免疫相关性血细胞减少，IRP）患者骨髓巨噬细胞（Mm）活化抗原表达及其临床意义。方法采用流式细胞仪（FACS）检测61例IRP患者及10例重型再生障碍性贫血（SAA）（病例对照组）和13例正常人（正常对照组）骨髓造血细胞膜自身抗体类型、骨髓M①数量（CD未／CD未）％及Mm活化抗原（CD^69）表达水平（CD68^＋CD69^＋／CD68^＋）％，并探讨其临床意义。结果61例IRP患者其Mm数量及活化抗原表达水平[（0．57±0．30）％和（40．30±18．49）％]均高于病例对照组[（0．46±0．08）％和（32．44±19．37）％]及正常对照组[（0．44±0．69）％和（29．71±11．67）％]（P值均〈0．05）；且其M中数量与活化抗原表达水平呈明显正相关（r=0．89，P〈0．01）。根据Mm数量分为A组（MФ百分率≥0．5％）和B组（Mm百分率〈0．5％），A组34例患者中32例（94．1％）有自身抗体IgG，B组27例患者中仅2例（7．4％）；A组患者骨髓Mm活化抗原表达水平（49．19±16．63）％显著高于B组患者（29．H±14．30）％（P〈0．05），而B组患者和病例对照组及正常组无统计学意义（P值均〉0．05）；A组患者的3、6个月的总有效率（分别为47．06％、79．41％）均明显优于B组患者同期的疗效（22．22％、51．85％）（P〈0．05）；并且A、B组患者6个月的总有效率（79．41％、51．85％）均明显高于3个月的疗效（47．06％、22．22％）（P值均〈0．05）。34例自身抗体IgG（＋）IRP患者按M中数量分为高（≥0．75％）、低（〈0．75％）水平2组，25例M中低水平组24例仅能检测到1系骨髓细胞（CD34^＋或CD15^＋或GlycoA^＋）有自身抗体IgG（96％），1例检测到2系骨髓细胞有自身抗体IgG；9例Mm高水平组有8例能检测到2系骨髓细胞有自身抗体IgG，1例为3系骨髓细胞�; 王一浩付蓉邵宗鸿邢莉民王化泉吴玉红刘鸿刘惠王珺陈瑾; 关键词：COOMBS试验巨噬细胞

骨髓单个核细胞Coombs试验阳性的血细胞减少患者补体水平变化及其意义被引量：13: 2009年; 目的了解骨髓单个核细胞Coombs试验阳性血细胞减少（CBCPC）患者补体水平的变化，探讨补体在CBCPC患者骨髓造血细胞破坏机制中的作用。方法对124例CBCPC患者采用ELISA法测定其骨髓上清中的补体膜攻击复合物（C5b-9）、总补体溶血活性（CH50）以及补体C3、C4水平，并采用流式细胞术（FCM）检测CBCPC患者骨髓单个核细胞膜自身抗体结合率，测定23名正常人的骨髓液补体水平；并同时测定其中30例CBCPC患者和7名正常人的外周血血清补体水平。结果CBCPC初治组骨髓C5b-9水平[（119．8±54．0）μg/L]高于恢复组[（100．7±33．4）μg／L]和正常对照组[（93．9±28．8）μg／L]（P〈0．05）；初治组、恢复组骨髓CH50水平[（33．3±11．5）kU／L，（30．8±10．3）kU／L]高于正常对照组[（24．1±6．4）kU／L]（P〈0．05）；初治组、恢复组骨髓C3水平[（4．9±2．2）mg／L、（5．0±3．5）mg／L]低于正常对照组[（7．0±5．6）mg／L]（P〈0．05）；外周血血清补体水平检测结果与骨髓检测结果一致。CBCPC患者骨髓CH50与C3水平呈负相关（r=-0．303，P=0．007）；CH50与C5b-9水平呈正相关（r=0．241，P=0．003）。骨髓细胞膜IgM阳性的CBCPC组C5b-9水平[（117．6±55．7）μg/L]高于IgM阴性组[（99．2±26．2）μg/L]（P〈0．05），骨髓CD34^＋细胞膜IgG结合率、CD34^＋细胞膜IgM结合率与C5b-9呈正相关（r=0．593，P=0．000；r=0．326，P=0．049），CH50水平与网织红细胞呈正相关（r=0．421，P=0．000），与间接胆红素亦呈正相关（r=0．230，P=0．032）。结论CBCPC患者外周血细胞减少与骨髓单个核细胞自身抗体激活补体破坏造血细胞有关。; 陈瑾付蓉李丽娟刘惠王一浩王红蕾邵宗鸿; 关键词：全血细胞减少补体自身抗体

骨髓单个核细胞Coombs试验（＋）血细胞减少症患者Th17细胞数量及功被引量：13: 2010年; 目的研究骨髓单个核细胞（BMMNC）-Coombs试验（＋）血细胞减少症（又称免疫相关性血细胞减少症,IRP）患者骨髓Th17细胞数量及功能,探讨Th17细胞在IRP发病中的作用.方法选取初诊IRP患者43例、血常规恢复正常IRP患者34例及正常对照13名.采用流式细胞术（FCM）检测骨髓白细胞介素（IL）-23受体（IL-23R）＋CD4＋/CD4＋细胞比例;酶联免疫吸附（ELISA）法测定骨髓上清液IL-6、IL-23和IL-17水平;RT-PCR技术检测BMMNC视黄酸相关孤核受体γt（RORγt）及信号转导转录激活子3（STAT3）mRNA的相对表达水平.结果 IRP初诊组IL-23R＋CD4＋/CD4＋细胞比例[（3.6±3.1）%]明显高于恢复组[（2.0±1.0）%]和正常对照组[（1.9±1.4）%]（P值均＜0.05）;初诊组骨髓上清液IL-6、IL-23和IL-17水平[分别为（26.21±14.55）、（2.23±0.99）和（2.54±1.33）μg/L]明显高于恢复组[分别为（9.08±6.36）、（0.91±0.76）和（1.28±0.18）μg/L]和正常对照组[分别为（14.63±7.66）、（1.19±0.98）和（1.50±0.28）μg/L]（P值均＜0.05）;初诊组RORγtmRNA、STAT3mRNA表达水平（0.25±0.08、1.10±0.16）明显高于恢复组（0.12±0.08、0.97±0.12）和正常对照组（0.07±0.05、0.95±0.13）（P值均＜0.05）.IRP组IL-23R^＋CD4^＋/CD4^＋细胞比例与CD5^＋CD19^＋/CD19^＋细胞比例呈正相关（P＜0.05）;IRP组骨髓液IL-17水平与骨髓CD5^＋CD19^＋/CD19^＋细胞比例、自身抗体数量呈正相关（r分别为0.494、0.377,P值均＜0.05）;IRP组RORγt mRNA表达水平与骨髓CD5^＋CD19^＋/CD19^＋细胞比例及自身抗体数量呈正相关（r分别为0.741、0.541,P值均＜0.05）;IL-23R^＋CD4^＋/CD4^＋细胞比例与骨髓上清液IL-17水平及STAT3 mRNA表达水平呈正相关（r分别为0.438、0.448,P值均＜0.05）.结论 Th17细胞在IRP患者中数量增加,功能活跃;Th17细胞有望成为该类疾病干预治疗的新靶点.; 付蓉王红蕾陈瑾王珺李丽娟刘惠王一浩任悦邵宗鸿; 关键词：COOMBS试验

慢性乙型肝炎病毒感染并发重型再生障碍性贫血的临床特征被引量：10: 2005年; 目的探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染并发重型再生障碍性贫血(SAA)的临床特征.方法观察1991-01～2003-12中国医学科学院血液学研究所诊治的737例SAA患者中慢性乙型病毒性肝炎(慢性乙型肝炎)并发SAA患者(21例,Ⅰ组)所占比例,并采用病例对照方法探讨慢性HBV感染[慢性乙型肝炎和HBV抗体阳性组(23例,Ⅱ组)]并发SAA与SAA对照组(42例,Ⅲ组)在临床表现、实验室特征及疗效和预后方面的异同.结果(1)慢性乙型肝炎并发SAA占同期SAA的比例为2.8%.(2)3组患者治疗前临床特征差异无显著性.(3)治疗后Ⅰ组患者血象、骨髓象恢复晚于Ⅱ、Ⅲ组.(4)Ⅰ、Ⅲ组患者CD8+细胞百分比明显高于Ⅱ组(P＜0.05,P＜0.01).(5)3组患者3年生存率差异无显著性.结论慢性乙型肝炎合并SAA患者经免疫抑制治疗后造血功能恢复较慢;SAA合并HBV抗体阳性者T亚群异常较轻;慢性HBV感染未显著影响SAA患者的预后.; 涂梅峰邵宗鸿刘鸿何广胜施均白洁王化泉邢莉民杨崇礼; 关键词：SAA 重型再生障碍性贫血慢性乙型肝炎抗体阳性慢性HBV感染方法观

重型再生障碍性贫血患者外周血树突细胞亚群及共刺激分子表达的研究被引量：16: 2006年; 目的了解重型再生障碍性贫血(SAA)患者在免疫抑制治疗(IST)前、后外周血树突细胞(DC)亚群数量、比值的变化,测定外周血 T 细胞激活协同分子(CD80、CD86、CD40)在树突细胞及 B细胞表面的表达。方法用单克隆抗体三标法和流式细胞术检测26例发病期和13例 IST 后恢复的SAA 患者外周血髓系 DC 前体(pDC1)与淋系 DC 前体(pDC2)的数量、比例,并与15名正常对照比较。其中10例患者检测了治疗前、后2个月的 pDC1与 pDC2的数量。检测16例 SAA 患者及12名正常对照外刷血 DC 及 B 淋巴细胞表面 CD80、CD86、CD40的表达。结果正常对照组外周血 pDC 总量、pDC1、pDC2及 pDC1/pDC2比值分别为(0.72±0.08)%,(0.41±0.05)%,(0.30±0.05)%,1.58±0.18:而初发 SAA 患者为(0.96±0.18)%,(0.67±0.13)%.(0.32±0.06)%,2.70±0.32,pDC1显著增多(P<0.05),pDC1/pDC2比例明显失衡(P<0.01);恢复期 SAA 患者上述指标下降为(0.77±0.13)%,(0.43±0.10)%,(0.34±0.09)%,1.78±0.36,与正常对照组无差异(P 值均>0.05)。10例 SAA 患者治疗前 pDC1、pDC2及 pDC1/pDC2比值分别为(0.87±0.31)%,(0.35±0.09)%,2.65±0.40,治疗2个月后分别为(0.24±0.09)%,(0.14±0.04)%,2.16±0.26,pDC1、pDC2显著下降(P值均<0.05)。正常对照组外周血 DC 表面 CD80、CD86、CD40的表达分别为(1.61±0.84)%,(11.97±4.31)%,(0.56±0.45)%,而 SAA 患者分别为(9.14±4.08)%,(29.84±3.02)%,(7.04±3.79)%,SAA 患者 DC 表面 CD86表达明显高于正常对照(P<0.05)。正常对照组外周血淋巴细胞CD19、CD80、CD86、CD40的表达分别为(9.38±0.92)%,(2.57±0.44)%,(1.86±0.32)%,(7.34±1.22)%;而 SAA 患者分别为(11.12±2.26)%,(5.17±0.68)%,(5.98±0.96)%,(8.85±2.49)%,CD80^+细胞、CD86^+细胞比例明显高于正常对照(P 值分别为<0.05和0.01)。正常对照外周血 B 淋巴细胞 CD80、CD86、CD40的表达分别为(28.22±3.56)%,(8.04±0.66)%,(81.6±6.48)%;而 SAA患者分别为(23.06±3.73)%,(20.46±2.78)%,(81.57±5.29)%,SAA 患者 B 淋巴细胞上 CD86表达明显高�; 涂梅峰邵宗鸿刘鸿何广胜施均白洁曹燕然王化泉邢莉民崔振珠孙娟陈辉树薛艳萍杨崇礼; 关键词：贫血树突细胞协同刺激分子

骨髓单个核细胞Coombs试验阳性血细胞减少患者骨髓“红系造血岛”初步研究被引量：11: 2010年; 目的探讨骨髓单个核细胞Coombs（BMMNC-Coombs）实验（＋）血细胞减少症（又称免疫相关性血细胞减少症,IRP）患者骨髓＂红系造血岛（EI）＂的形成机制.方法选取IRP患者48例、病例对照10例及正常对照11名为研究对象,采用流式细胞术（FCM）检测骨髓红系造血细胞自身抗体（BM-autoAb）,免疫荧光（IF）法标记骨髓＂EI＂,并分析其临床资料.结果 48例IRP患者中14例（29.17%）IF阳性,即＂EI＂中巨噬细胞和幼红细胞间沉积自身抗体IgG,且这14例患者BM-autoAb均为抗GlycoAIgG型（100%）;均有贫血;胸骨骨髓增生程度大多呈活跃或明显活跃,红系比例为0.441±0.139,易见＂EI＂及红细胞吞噬现象;髂骨红系比例为0.248±0.204;血清总胆红素水平（TBIL）为（13.4±7.5）μmol/L,血清间接胆红素水平（IBIL）为（9.4±4.7）μmol/L.6个月总有效率85.7%.IF阴性组（34例）,BM-autoAb抗GlycoAIgG型2例（5.89%）;其中贫血31例（91.2%）,无贫血3例（8.8%）;网织红细胞（Ret）比例为（0.013±0.010）;胸骨骨髓增生程度为活跃、明显活跃或低下,红系比例为0.298±0.082,髂骨红系比例为0.212±0.162;TBIL为（13.3±17.1）μmol/L;IBIL为（6.6±6.7）μmol/L;6个月总有效率61.3%.IF阳性组患者RBC、Hb、Ret、IBIL、胸骨红系比例及6个月总有效率与IF阴性组患者相比差异均有统计学意义（P值均＜0.05）.结论一些IRP患者骨髓涂片中所见部分＂EI＂中的幼红细胞和巨噬细胞是通过自身抗体IgG连结的,这些＂EI＂不是滋养骨髓红系的造血龛,而是巨噬细胞吞噬、破坏幼红细胞的原位标志.这部分IRP患者骨髓巨噬细胞通过其表面的IgGFc受体连接、吞噬及破坏覆有自身抗体IgG的幼红细胞,从而导致红系造血细胞破坏.; 付蓉王一浩董舒文刘惠李丽娟邹鹏邵宗鸿; 关键词：血细胞减少免疫相关自身抗体

骨髓单个核细胞Coombs试验（＋）血细胞减少患者骨髓巨噬细胞数量及功能的研究被引量：11: 2009年; 目的探讨骨髓单个核细胞Coombs（BMMNC—Coombs）试验（＋）血细胞减少患者骨髓巨噬细胞（MФ）数量、功能及其临床意义。方法采用流式细胞术（FACS）检测61例BMMNC—Coombs试验（＋）血细胞减少患者、10例重型再生障碍性贫血（SAA）患者及13名正常对照骨髓MФ（CD68或CIM5阳性）数量并通过鸡红细胞（CRBC）吞噬试验检测MФ功能，并分析其临床意义。结果BMMNC—Coombs试验（＋）血细胞减少患者其MФ百分率、吞噬率及吞噬指数[（0．57±0．30）％、（37．56±15．20）％和0．75±0．347均高于SAA组[（0．46±0．08）％、（28．26±10．46）％和0．59±0．39]及正常对照组[（0．44±0．69）％、（25．63±19．75）％和0．55±0．16]（P〈0．05）；且Mm百分率与MФ吞噬率及吞噬指数均呈正相关（r=0．43，P〈0．01；r=0．40，P〈0．01）。根据MФ数量将患者分为A组（MФ≥0．5％）和B组（MФ〈0．5％），A组34例患者中32例（94．12％）自身抗体为IgG型，B组27例患者中仅2例（7．41％）自身抗体为IgG型；A组患者MФ的吞噬率和吞噬指数[（46．62±13．38）％和O．91±0．361显著高于B组患者[（28．67±12．59）％和0．61±0．30]（P〈0．05），而B组患者与AA及正常对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。将34例自身抗体IgG型患者分为MФ高（≥0．75％）、低水平（〈0．75％）两组，MФ低水平组25例患者骨髓均仅能检测到一系细胞与IgG结合，MФ高水平组9例患者中8例能检测到二系细胞结合IgG，1例骨髓三系细胞均结合有IgG；MФ高水平组患者中MФ的吞噬率及吞噬指数[（60．22±12．51）％、1．23±0．23]显著高于MФ低水平组[（43．32±9．24）％、0．84±0．24]（P〈0．05）；MФ高水平组患者外周血红细胞、血红蛋白、血小板计数均显著低于MФ低水平组（P〈0．05）；MФ高水平组网织红细胞比例、胆红素水平及胸骨�; 王一浩付蓉邵宗鸿王化泉邢莉民刘鸿吴玉红李丽娟刘惠王珺陈瑾王红蕾; 关键词：COOMBS试验骨髓单个核细胞血细胞减少

骨髓单个核细胞Coombs试验阳性血细胞减少患者骨髓红系造血细胞膜靶抗原初步研究被引量：8: 2012年; 目的了解骨髓单个核细胞Coombs（BMMNC-Coombs）试验阳性（＋）血细胞减少（又称免疫相关性血细胞减少症，IRP）患者骨髓红系造血细胞膜上促红细胞生成素受体（EPOR）表达量与自身抗体（IgG／IgM）的关系，探索自身抗体可能的作用靶点。方法对46例初治IRP患者[15例有核红细胞自身抗体阳性（＋）、31例有核红细胞自身抗体阴性（-）]及18名健康对照应用流式细胞术（FCM）检测骨髓红系造血细胞膜上EPOR表达量，分析自身抗体与EPOR表达水平的相关性；反转录（RT）-PCR技术检测EPORmRNA的表达水平；FCM分选骨髓红系造血细胞后，Western印迹法检测信号转导蛋白Star5及磷酸化Stat5（P—Stat5）蛋白表达水平以观察EPO／EPOR信号通路是否受抑；利用甘氨酸缓冲液洗脱3例自身抗体IgM强阳性患者骨髓红系造血细胞膜上结合的自身抗体，重新标记后再次检测EPOR的表达水平。结果（1）IRP患者有核红细胞自身抗体（＋）组EPOR表达量为1．6％±0．9％，明显低于自身抗体（-）组（4．6％±4．1％，P〈0．01），而后者明显高于健康对照组（2．3％±1．8％，P〈0．05）。IRP患者有核红细胞膜上EPOR与自身抗体呈显著负相关（r=-0．543，P=0．000），EPOR（Y）与自身抗体（x）的直线回归方程为：Y=0．040—0．335X。（2）有核红细胞自身抗体（＋）组EPORmRNA表达水平为（0．68±0．14），明显高于自身抗体（-）组（0．55±0．12，P〈0．01）和健康对照组（0．58±0．12，P〈0．05）。（3）有核红细胞自身抗体（＋）组Stat5蛋白表达明显高于健康对照组（1．45±0．94比0．54±0．36），P—Stat5蛋白表达明显低于健康对照组（0．42±0．18比0．85±0．38）（均P〈0．05）；而自身抗体（-）组Stat5、P—Stat5蛋白表达水平（0．75±0．69、0．70±0．18）与健康对照组比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。（; 付蓉刘惠王珺李丽娟王红蕾王一浩邵宗鸿; 关键词：全血细胞减少

骨髓单个核细胞Coombs试验（＋）血细胞减少症患者有核红细胞膜EPO受体与自身抗体关系的初步研究被引量：15: 2010年; 骨髓单个核细胞（BMMNC）Coombs试验（＋）的免疫相关性血细胞减少症（IRP）是由于B淋巴细胞分泌多种针对骨髓造血细胞自身抗体引起的外周血细胞减少.目前推测自身抗体的作用机制之一可能是封闭骨髓造血细胞膜功能抗原进而抑制造血.; 刘惠付蓉李丽娟王一浩王珺王红蕾吴玉红邢莉民关晶陈瑾邹鹏邵宗鸿; 关键词：免疫相关性血细胞减少症 COOMBS试验骨髓单个核细胞自身抗体 EPO受体外周血细胞减少

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